中文摘要 | 第8-18页 |
研究背景 | 第8-10页 |
研究目的 | 第10页 |
方法 | 第10-14页 |
第一部分:HBV对NLRP3炎性体活化的影响 | 第10-13页 |
1. 临床标本检测 | 第10页 |
2. 动物实验 | 第10-11页 |
3. 细胞模型 | 第11-12页 |
4. NLRP3炎性体重构实验 | 第12-13页 |
第二部分:人TIM-4启动子报告基因载体的构建及检测 | 第13页 |
第三部分:TIM-4对NLRP3炎性体活性的影响 | 第13-14页 |
结果 | 第14-16页 |
第一部分:HBV对NLRP3炎性体活化的影响 | 第14-16页 |
第二部分:人HIM-4启动子报告基因载体的构建及检测 | 第16页 |
第三部分:TIM-4对NLRP3炎性体活性的影响 | 第16页 |
结论 | 第16页 |
创新点及意义 | 第16-18页 |
ABSTRACT | 第18-26页 |
符号说明 | 第27-28页 |
前言 | 第28-31页 |
技术路线图 | 第31-32页 |
材料与方法 | 第32-48页 |
1. 材料 | 第32-37页 |
1.1 临床标本 | 第32页 |
1.2 主要试剂 | 第32-34页 |
1.3 动物及细胞 | 第34页 |
1.4 PCR引物及siRNA序列 | 第34-36页 |
1.5 主要实验仪器 | 第36-37页 |
2. 方法 | 第37-48页 |
2.1 构建载体 | 第37-41页 |
2.2 质粒DNA的小量抽提步骤 | 第41-42页 |
2.3 Lipo2000脂质体转染 | 第42页 |
2.4 RNA提取及逆转录 | 第42-44页 |
2.5 ELISA | 第44-45页 |
2.6 Western Blot | 第45-47页 |
2.7 稳筛细胞系的建立 | 第47页 |
2.8 细胞免疫荧光 | 第47-48页 |
结果 | 第48-66页 |
第一部分:HBV对NLRP3炎性体活化的影响 | 第48-57页 |
一、慢乙肝患者血浆IL-1β的水平显著升高 | 第48-49页 |
二、HBV转基因小鼠血清IL-1β的水平升高 | 第49-50页 |
三、HBV转基因小鼠肝组织中Caspase-1的活化 | 第50页 |
四、HBV促单核/巨噬细胞产生IL-1β | 第50-51页 |
五、HBV促进IL-1β的产生依赖于Caspase-1 | 第51-52页 |
六、HBV促IL-1β的产生依赖NLRP3炎性体的作用 | 第52-53页 |
七、HBV促进NLRP3炎性体的组装 | 第53-55页 |
八、免疫荧光检测HBV促进NLRP3炎性体的形成 | 第55页 |
九、ASC过表达稳筛细胞系的建立及ASC真核表达载体的构建 | 第55-57页 |
十、HBV通过Rac1激活NLRP3炎性体 | 第57页 |
第二部分:人TIM-4启动子报告基因载体的构建及检测 | 第57-62页 |
一、人TIM-4启动子报告基因系列载体的构建 | 第57-62页 |
二、启动子活性检测 | 第62页 |
第三部分:TIM-4对NLRP3炎性体活性的影响 | 第62-66页 |
一、TIM-4抑制NLRP3炎性体的活性 | 第62-63页 |
二、小鼠Tim-4系列表达载体的构建及鉴定 | 第63-66页 |
讨论 | 第66-71页 |
参考文献 | 第71-76页 |
致谢 | 第76-77页 |
攻读学位期间发表的论文 | 第77-78页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第78页 |