| 英文缩略词对照(Abbreviation) | 第8-9页 |
| 中文摘要 | 第9-13页 |
| Abstract | 第13-18页 |
| 1 前言 | 第19-23页 |
| 2 实验一 小檗碱(BBR)对糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏的保护作用及可能机制 | 第23-47页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-26页 |
| 2.1.1 实验动物与饲料 | 第23页 |
| 2.1.2 药物与试剂 | 第23-25页 |
| 2.1.3 实验仪器与设备 | 第25-26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-34页 |
| 2.2.1 大鼠DN模型的建立方法 | 第26页 |
| 2.2.2 实验分组及给药 | 第26-27页 |
| 2.2.3 整体指标的测定 | 第27-28页 |
| 2.2.4 肾脏病理学检查 | 第28-29页 |
| 2.2.5 观察大鼠肾脏肾小球超微结构的变化 | 第29页 |
| 2.2.6 免疫组化法检测肾皮质nephrin、podocin及α3β1整合素蛋白分布和表达情况 | 第29-31页 |
| 2.2.7 Western blot法检测肾皮质nephrin、podocin、α3β1整合素蛋白、p-Akt、Akt、ILK和TGFβRI的表达水平 | 第31-33页 |
| 2.2.8 统计处理 | 第33-34页 |
| 2.3 实验结果 | 第34-47页 |
| 2.3.1 BBR对不同时期DN大鼠空腹血糖的影响 | 第34页 |
| 2.3.2 BBR对DN大鼠肾功能指标的影响 | 第34-35页 |
| 2.3.3 BBR对DN大鼠肾脏病理异常变化的影响 | 第35-37页 |
| 2.3.4 BBR对DN大鼠肾小球超微结构的影响 | 第37-38页 |
| 2.3.5 BBR对肾脏皮质中nephrin蛋白分布和表达的影响 | 第38-40页 |
| 2.3.6 BBR对肾脏皮质中podocin蛋白分布和表达的影响 | 第40-42页 |
| 2.3.7 BBR对肾脏皮质中α3β1整合素蛋白分布和表达的影响 | 第42-44页 |
| 2.3.8 BBR对肾脏皮质中p-Akt和Akt蛋白表达的影响 | 第44-45页 |
| 2.3.9 BBR对肾脏皮质中ILK和TGF βRI蛋白表达的影响 | 第45-47页 |
| 3 实验二 小檗碱(BBR)改善高糖和TGFβ1诱导的足细胞损伤可能与PI3K/Akt信号通路相关 | 第47-67页 |
| 3.1 实验材料 | 第47-49页 |
| 3.1.1 实验细胞 | 第47页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第47-49页 |
| 3.1.3 实验仪器与设备 | 第49页 |
| 3.2 实验方法 | 第49-56页 |
| 3.2.1 肾小球系膜细胞和足细胞的培养及传代 | 第49-50页 |
| 3.2.2 免疫荧光实验足细胞相关蛋白的表达情况 | 第50页 |
| 3.2.3 细胞免疫组化法检测足细胞相关蛋白的表达情况 | 第50-51页 |
| 3.2.4 细胞黏附实验测定足细胞的黏附功能 | 第51-52页 |
| 3.2.5 ELISA法检测肾小球系膜细胞上清TGF-β1表达水平的影响 | 第52-53页 |
| 3.2.6 蛋白芯片法检测肾小球系膜细胞上清中炎性细胞因子表达水平 | 第53-54页 |
| 3.2.7 激光共聚焦法检测足细胞TGFβRⅠ和TGFβRⅡ表达和分布情况 | 第54-55页 |
| 3.2.8 流式细胞术检测足细胞凋亡情况(Annexin V-/PI-染液) | 第55页 |
| 3.2.9 Western Blot法检测足细胞相关蛋白的表达情况 | 第55-56页 |
| 3.2.10 统计处理 | 第56页 |
| 3.3 实验结果 | 第56-67页 |
| 3.3.1 足细胞的鉴定 | 第56-59页 |
| 3.3.2 足细胞的黏附功能 | 第59-60页 |
| 3.3.3 肾小球系膜细胞上清中TGF-β1的表达水平 | 第60-61页 |
| 3.3.4 蛋白芯片法检测肾小球系膜细胞上清炎症因子表达水平 | 第61页 |
| 3.3.5 激光共聚焦法检测足细胞TGFβRⅠ和TGFβRⅡ表达 | 第61-62页 |
| 3.3.6 BBR对足细胞凋亡的影响 | 第62页 |
| 3.3.7 Western Blot法检测足细胞相关蛋白的表达情况 | 第62-67页 |
| 4 讨论 | 第67-72页 |
| 4.1 BBR对DN大鼠的肾脏保护作用 | 第67-68页 |
| 4.2 BBR发挥对DN大鼠肾脏的保护作用可能与减轻足细胞损伤有关 | 第68-69页 |
| 4.3 DN环境下,肾小球系膜细胞能分泌过量的TGFβ1、IL-6、IL-8、TNF-α和MCP-1 | 第69-70页 |
| 4.4 BBR发挥肾脏保护作用的机制可能与介导足细胞PI3K/Akt通路有关 | 第70-72页 |
| 5 结论 | 第72页 |
| 6 研究的创新与不足 | 第72-73页 |
| 7 参考文献 | 第73-78页 |
| 附录 | 第78-80页 |
| 致谢 | 第80-83页 |
| 综述 | 第83-117页 |
| References | 第100-117页 |
