| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 缩略语表 | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第12-22页 |
| 1.1 研究问题的由来 | 第12-13页 |
| 1.2 FHL2基因研究进展 | 第13-19页 |
| 1.2.1 FHL2基本结构 | 第13-14页 |
| 1.2.2 FHL2基因的表达和定位 | 第14-15页 |
| 1.2.3 FHL2基因的主要功能 | 第15-18页 |
| 1.2.4 FHL2基因在肿瘤细胞中的研究进展 | 第18页 |
| 1.2.5 FHL2基因调节卵巢颗粒细胞发育的研究进展 | 第18-19页 |
| 1.3 TGF-α 研究进展 | 第19-21页 |
| 1.3.1 TGF-α 的基本结构 | 第19页 |
| 1.3.2 TGF-α 的表达和基本功能 | 第19-20页 |
| 1.3.3 TGF-α 参与调控卵巢颗粒细胞发育 | 第20-21页 |
| 1.4 实验的目的和意义 | 第21-22页 |
| 2 实验材料 | 第22-26页 |
| 2.1 实验细胞 | 第22页 |
| 2.2 实验试剂与耗材 | 第22-24页 |
| 2.3 实验仪器 | 第24-25页 |
| 2.4 实验试剂的配制 | 第25-26页 |
| 3 实验方法 | 第26-40页 |
| 3.1 人卵巢颗粒细胞瘤细胞系KGN的培养、传代及冻存 | 第26-27页 |
| 3.1.1 细胞培养 | 第26页 |
| 3.1.2 细胞传代 | 第26页 |
| 3.1.3 细胞冻存 | 第26页 |
| 3.1.4 细胞复苏 | 第26-27页 |
| 3.2 细胞转染 | 第27页 |
| 3.3 细胞加药处理 | 第27-29页 |
| 3.3.1 TGF-α 处理细胞 | 第27-28页 |
| 3.3.2 通路抑制剂处理细胞 | 第28-29页 |
| 3.4 细胞计数 | 第29页 |
| 3.5 细胞周期检测 | 第29-30页 |
| 3.6 CCK-8 法检测细胞增殖 | 第30页 |
| 3.7 人卵巢颗粒细胞瘤细胞系KGN总RNA的提取 | 第30-32页 |
| 3.7.1 RNA的抽提 | 第30-31页 |
| 3.7.2 RNA浓度及质量检测 | 第31-32页 |
| 3.8 cDNA链反转录合成 | 第32页 |
| 3.8.1 cDNA第一链合成 | 第32页 |
| 3.8.2 cDNA的浓度检测 | 第32页 |
| 3.9 引物设计 | 第32-33页 |
| 3.10 QRT-PCR | 第33-34页 |
| 3.11人卵巢颗粒细胞瘤细胞系KGN总蛋白提取和Western Blot实验 | 第34-37页 |
| 3.11.1 蛋白的提取 | 第34-35页 |
| 3.11.2 蛋白浓度检测及制样 | 第35页 |
| 3.11.3 蛋白免疫印迹 | 第35-37页 |
| 3.12 实验设计 | 第37-39页 |
| 3.12.1 FHL2影响卵巢颗粒细胞的生长 | 第37-38页 |
| 3.12.2 TGF-α 对KGN细胞增殖的影响及调控FHL2的表达 | 第38页 |
| 3.12.3 TGF-α 调控FHL2作用的相关信号通路探究 | 第38-39页 |
| 3.13 数据分析 | 第39-40页 |
| 4 实验结果 | 第40-49页 |
| 4.1 FHL2对卵巢颗粒细胞的调控作用 | 第40-44页 |
| 4.1.1 si-FHL2干扰效果检测 | 第40-41页 |
| 4.1.2 FHL2对KGN细胞增殖的影响 | 第41-42页 |
| 4.1.3 FHL2对KGN细胞周期的影响 | 第42-43页 |
| 4.1.4 FHL2对TGF-α、EGFR基因表达的影响 | 第43-44页 |
| 4.2 TGF-α 对KGN细胞增殖的影响及调控FHL2的表达 | 第44-47页 |
| 4.2.1 TGF-α 促进KGN细胞增殖 | 第44页 |
| 4.2.2 TGF-α 促进FHL2的表达 | 第44-46页 |
| 4.2.3 TGF-α 调控FHL2、EGFR、TGF-α 基因的表达 | 第46-47页 |
| 4.3 TGF-α 调控FHL2基因表达的相关信号通路研究 | 第47-49页 |
| 5 讨论 | 第49-55页 |
| 5.1 KGN细胞是研究卵巢颗粒细胞功能的良好模型 | 第49页 |
| 5.2 FHL2对KGN细胞的增殖和周期具有重要调控作用 | 第49-51页 |
| 5.3 TGF-α 对KGN细胞的调控作用依赖于FHL2的表达量 | 第51-52页 |
| 5.4 TGF-α 与FHL2互作共同调控颗粒细胞的增殖 | 第52-53页 |
| 5.5 TGF-α 调控FHL2相关信号通路探究 | 第53-55页 |
| 6 总结 | 第55-56页 |
| 6.1 本试验主要结果 | 第55页 |
| 6.2 本试验创新点 | 第55页 |
| 6.3 本试验不足点及下一步计划 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
