中文摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
中英文缩略词表 | 第13-14页 |
1 前言 | 第14-16页 |
2 材料和方法 | 第16-39页 |
2.1 实验材料 | 第16-24页 |
2.1.1 实验动物 | 第16页 |
2.1.2 菌株与载体 | 第16-17页 |
2.1.3 主要试剂 | 第17-18页 |
2.1.4 主要实验仪器 | 第18-19页 |
2.1.5 主要试剂溶液配制 | 第19-21页 |
2.1.6 PCR引物设计合成 | 第21-24页 |
2.2 实验方法 | 第24-39页 |
2.2.1 矽肺大鼠模型构建及外周血单核细胞RNA提取和cDNA文库构建 | 第24-26页 |
2.2.2 PCR扩增轻重链可变区基因 | 第26-28页 |
2.2.3 Linker连接肽合成和酶促磷酸化粘端 | 第28-29页 |
2.2.4 VH+Linker+VL(Sc Fv)制备 | 第29-30页 |
2.2.5 合成重组质粒与转化感受态大肠杆菌TG1 | 第30-34页 |
2.2.6 转化后质粒提取及特异性鉴定 | 第34-36页 |
2.2.7 大鼠矽肺噬菌体单链抗体库富集筛选 | 第36-37页 |
2.2.8 Elisa法鉴定阳性克隆 | 第37-38页 |
2.2.9 阳性克隆噬菌体提取及测序鉴定 | 第38-39页 |
3 结果 | 第39-46页 |
3.1 矽肺模型大鼠外周血总RNA提取及逆转录结果 | 第39页 |
3.2 抗体可变区扩增结果 | 第39-40页 |
3.3 单链抗体ScFv合成结果 | 第40页 |
3.4 辅助噬菌体(M13K07)扩增结果 | 第40-41页 |
3.5 噬菌体抗体库构建结果及鉴定 | 第41-42页 |
3.6 大鼠矽肺噬菌体单链抗体库富集筛选结果 | 第42-44页 |
3.7 阳性克隆质粒特异性检测及测序鉴定结果 | 第44-46页 |
4 讨论 | 第46-50页 |
4.1 噬菌体抗体库 | 第46-47页 |
4.2 抗体库的库容量与多样性 | 第47-48页 |
4.3 筛选出的抗体与矽肺的关系 | 第48-50页 |
4.3.1 抗IFN-γ 抗体与矽肺的关系 | 第48页 |
4.3.2 抗IL-2R抗体与矽肺的关系 | 第48-49页 |
4.3.3 抗核糖体P蛋白抗体与矽肺的关系 | 第49-50页 |
5 结论 | 第50-51页 |
6 参考文献 | 第51-54页 |
综述 | 第54-68页 |
参考文献 | 第63-68页 |
个人简历 | 第68-69页 |
致谢 | 第69页 |