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矽肺大鼠噬菌体单链抗体库构建与矽肺相关抗体筛选

中文摘要第4-7页
Abstract第7-9页
中英文缩略词表第13-14页
1 前言第14-16页
2 材料和方法第16-39页
    2.1 实验材料第16-24页
        2.1.1 实验动物第16页
        2.1.2 菌株与载体第16-17页
        2.1.3 主要试剂第17-18页
        2.1.4 主要实验仪器第18-19页
        2.1.5 主要试剂溶液配制第19-21页
        2.1.6 PCR引物设计合成第21-24页
    2.2 实验方法第24-39页
        2.2.1 矽肺大鼠模型构建及外周血单核细胞RNA提取和cDNA文库构建第24-26页
        2.2.2 PCR扩增轻重链可变区基因第26-28页
        2.2.3 Linker连接肽合成和酶促磷酸化粘端第28-29页
        2.2.4 VH+Linker+VL(Sc Fv)制备第29-30页
        2.2.5 合成重组质粒与转化感受态大肠杆菌TG1第30-34页
        2.2.6 转化后质粒提取及特异性鉴定第34-36页
        2.2.7 大鼠矽肺噬菌体单链抗体库富集筛选第36-37页
        2.2.8 Elisa法鉴定阳性克隆第37-38页
        2.2.9 阳性克隆噬菌体提取及测序鉴定第38-39页
3 结果第39-46页
    3.1 矽肺模型大鼠外周血总RNA提取及逆转录结果第39页
    3.2 抗体可变区扩增结果第39-40页
    3.3 单链抗体ScFv合成结果第40页
    3.4 辅助噬菌体(M13K07)扩增结果第40-41页
    3.5 噬菌体抗体库构建结果及鉴定第41-42页
    3.6 大鼠矽肺噬菌体单链抗体库富集筛选结果第42-44页
    3.7 阳性克隆质粒特异性检测及测序鉴定结果第44-46页
4 讨论第46-50页
    4.1 噬菌体抗体库第46-47页
    4.2 抗体库的库容量与多样性第47-48页
    4.3 筛选出的抗体与矽肺的关系第48-50页
        4.3.1 抗IFN-γ 抗体与矽肺的关系第48页
        4.3.2 抗IL-2R抗体与矽肺的关系第48-49页
        4.3.3 抗核糖体P蛋白抗体与矽肺的关系第49-50页
5 结论第50-51页
6 参考文献第51-54页
综述第54-68页
    参考文献第63-68页
个人简历第68-69页
致谢第69页

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