摘要 | 第2-4页 |
ABSTRACT | 第4-5页 |
第一章 前言 | 第12-19页 |
1.1 颜色与真菌色素 | 第12-13页 |
1.1.1 自然界中颜色与色素 | 第12页 |
1.1.2 大型真菌色素 | 第12页 |
1.1.3 黑色素 | 第12-13页 |
1.1.4 酪氨酸酶 | 第13页 |
1.2 自然界的白化现象与金针菇的白化菌株 | 第13-15页 |
1.2.1 自然界中的白化现象 | 第13-14页 |
1.2.2 食用菌中的白化现象 | 第14页 |
1.2.3 金针菇中的白化菌株 | 第14-15页 |
1.3 金针菇白化现象的研究现状 | 第15-16页 |
1.4 转录组测序及在金针菇研究中的应用 | 第16-18页 |
1.4.1 转录组测序 | 第16-17页 |
1.4.2 转录组测序在真菌中的应用 | 第17-18页 |
1.4.3 转录组测序在金针菇研究中的应用 | 第18页 |
1.5 实验目的与意义 | 第18-19页 |
第二章 金针菇黑色素的提取与鉴定 | 第19-24页 |
2.1 材料 | 第19页 |
2.2 试剂 | 第19页 |
2.3 仪器 | 第19页 |
2.4 金针菇色素提取剂的选择 | 第19-20页 |
2.4.1 金针菇子实体的培养 | 第19页 |
2.4.2 金针菇原料预处理 | 第19-20页 |
2.4.3 金针菇色素提取剂的选择 | 第20页 |
2.5 金针菇色素提取及鉴定 | 第20页 |
2.5.1 色素的粗提取 | 第20页 |
2.5.2 色素的纯化 | 第20页 |
2.5.3 紫外-可见光谱扫描 | 第20页 |
2.5.4 傅里叶红外光谱扫描 | 第20页 |
2.6 结果与分析 | 第20-23页 |
2.6.1 金针菇色素提取剂的选择 | 第20-21页 |
2.6.2 金针菇色素的鉴定 | 第21-23页 |
2.6.2.1 紫外-可见光图谱特征 | 第21-22页 |
2.6.2.2 红外图谱特征 | 第22-23页 |
2.7 讨论 | 第23-24页 |
第三章 黄色型和白色型金针菇色素合成途径中相关酶活的测定 | 第24-30页 |
3.1 材料 | 第24页 |
3.2 试剂 | 第24页 |
3.3 仪器 | 第24页 |
3.4 方法 | 第24-26页 |
3.4.1 金针菇菌丝体和子实体的培养 | 第24页 |
3.4.2 黄色型和白色型金针菇子实体SOD酶活的测定 | 第24-25页 |
3.4.3 黄色型和白色型金针菇子实体PPO酶活的测定 | 第25页 |
3.4.4 黄色型和白色型金针菇子实体酪氨酸酶的测定 | 第25-26页 |
3.5 结果与分析 | 第26-29页 |
3.5.1 栽培的黄色型和白色型金针菇子实体 | 第26-27页 |
3.5.2 黄色型和白色型金针菇SOD酶活的比较 | 第27页 |
3.5.3 黄色型和白色型金针菇PPO酶活的比较 | 第27-28页 |
3.5.4 黄色型和白色型金针菇酪氨酸酶的酶活比较 | 第28-29页 |
3.5.4.1 多巴红的吸收光谱 | 第28页 |
3.5.4.2 黄色型和白色型金针菇酪氨酸酶的酶活比较 | 第28-29页 |
3.6 讨论 | 第29-30页 |
第四章 转录组测序分析 | 第30-42页 |
4.1 材料 | 第30页 |
4.2 转录组测序样本的制备 | 第30页 |
4.3 转录组测序数据分析 | 第30-32页 |
4.3.1 序列的拼接与组装 | 第30-31页 |
4.3.2 Unigene的功能注释及分析 | 第31-32页 |
4.4 转录组测序组装及结果分析 | 第32-39页 |
4.4.1 产量统计结果 | 第32-33页 |
4.4.2 unigene的长度分布结果 | 第33页 |
4.4.3 金针菇子实体转录组的功能注释 | 第33-34页 |
4.4.4 金针菇子实体的GO分类 | 第34-35页 |
4.4.5 金针菇转录组的COG分类 | 第35-36页 |
4.4.6 金针菇转录组KEGG分类 | 第36页 |
4.4.7 CDS统计结果分析 | 第36-37页 |
4.4.8 金针菇Unigene的表达差异分析 | 第37-38页 |
4.4.9 黑色素合成途径关键酶及其基因分析 | 第38-39页 |
4.5 SNP与SSR分析 | 第39-41页 |
4.6 讨论 | 第41-42页 |
第五章 酪氨酸酶基因半定量RT-PCR与荧光定量PCR检测 | 第42-50页 |
5.1 材料 | 第42页 |
5.2 试剂 | 第42页 |
5.3 仪器 | 第42页 |
5.4 检测方法 | 第42-46页 |
5.4.1 RNA提取 | 第42-43页 |
5.4.2 RNA的反转录反应即合成单链cDNA | 第43页 |
5.4.3 半定量RT-PCR验证 | 第43-44页 |
5.4.3.1 反应体系 | 第43页 |
5.4.3.2 反应条件 | 第43-44页 |
5.4.3.3 确定引物的循环数 | 第44页 |
5.4.3.4 半定量RT-PCR扩增 | 第44页 |
5.4.4 荧光定量RT-PCR检测 | 第44-46页 |
5.4.4.1 反应体系 | 第44-45页 |
5.4.4.2 反应条件 | 第45-46页 |
5.5 实验结果与分析 | 第46-48页 |
5.5.1 黄色型与白色型金针菇半定量RT-PCR结果 | 第46-47页 |
5.5.1.1 RNA的质量检测 | 第46页 |
5.5.1.2 引物的循环数的确定 | 第46页 |
5.5.1.3 黄色型和白色型金针菇半定量RT-PCR结果 | 第46-47页 |
5.5.2 黄色型和白色型金针菇荧光定量PCR结果 | 第47-48页 |
5.6 讨论 | 第48-50页 |
结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-56页 |
附录 | 第56-57页 |
致谢 | 第57-58页 |