中文摘要 | 第5-9页 |
ABSTRACT | 第9-12页 |
序言 | 第15-35页 |
1. 骨质疏松研究现状 | 第16-19页 |
2. 神经调控骨代谢平衡的国内外研究现状 | 第19-23页 |
3. 前列腺素E2在骨代谢重建中的作用 | 第23-27页 |
参考文献 | 第27-35页 |
第一部分 感觉神经参与维持骨代谢平衡 | 第35-65页 |
前言 | 第35-37页 |
材料和方法 | 第37-44页 |
1. 实验动物 | 第37页 |
2. 实验小鼠基因型鉴定 | 第37-38页 |
3. 小鼠血液及组织提取 | 第38页 |
4. Micro-CT分析 | 第38-39页 |
5. 骨组织脱钙 | 第39页 |
6. 石蜡包埋与切片 | 第39页 |
7. 冰冻组织包埋与切片 | 第39-40页 |
8. 脊髓背根神经节包埋、冰冻切片及染色 | 第40-41页 |
9. 免疫组织化学染色 | 第41-42页 |
10.抗酒石酸酸性磷酸酶Trap染色 | 第42-43页 |
11. 免疫荧光染色 | 第43页 |
12. 动态骨形成实验 | 第43-44页 |
13. Masson三色染色 | 第44页 |
14. 统计分析 | 第44页 |
结果 | 第44-58页 |
1. Avil-TrkA~(F592A)小鼠模型的建立和骨代谢变化观察 | 第44-50页 |
2. 可诱导感觉神经损伤模型Avil-iDTR~(fl/-)小鼠的建立和骨代谢变化分析 | 第50-58页 |
讨论 | 第58-62页 |
参考文献 | 第62-65页 |
第二部分 前列腺素E2通过感觉神经维持骨代谢平衡 | 第65-99页 |
前言 | 第65-67页 |
材料与方法 | 第67-73页 |
1. 实验动物 | 第67-68页 |
2. 骨质疏松模型建立 | 第68页 |
3. micro-CT分析 | 第68页 |
4. 小鼠血液及组织提取 | 第68页 |
5. 小鼠血清及骨髓PGE2酶联免疫吸附实验(ELISA) | 第68-69页 |
6. 骨组织脱钙、石蜡(冰冻)包埋、切片及染色 | 第69页 |
7. 动态骨形成实验 | 第69页 |
8.脊髓背根神经节感觉神经元分离培养 | 第69-70页 |
9. 细胞爬片免疫荧光染色 | 第70-71页 |
10. 感觉神经元RNA提取 | 第71-72页 |
11. 荧光定量PCR | 第72-73页 |
12. 统计分析 | 第73页 |
结果 | 第73-88页 |
1. 不同骨质疏松模型小鼠体内PGE2(Prostaglandin E2)的变化 | 第73-76页 |
2. OC-COX2~(-/-)小鼠模型的建立和骨代谢变化观察 | 第76-81页 |
3. Avil-EP4~(-/-)小鼠模型的建立和骨代谢变化观察 | 第81-87页 |
4. 感觉神经敲除EP4受体后PGE2促进骨生长的作用减弱 | 第87-88页 |
讨论 | 第88-93页 |
参考文献 | 第93-99页 |
第三部分 感觉神经维持骨代谢平衡的调控机制 | 第99-115页 |
前言 | 第99-100页 |
材料与方法 | 第100-104页 |
1. 实验动物 | 第100页 |
2. 小鼠血液及股骨提取 | 第100页 |
3.小鼠股骨组织的固定、包埋、冰冻切片和染色 | 第100-101页 |
4. 脊髓背根神经节感觉神经元的分离和培养 | 第101页 |
5. 体外钙成像技术 | 第101-102页 |
6. 蛋白免疫印迹 | 第102-103页 |
7.Avil-EP4~(-/-)小鼠普萘洛尔体内注射 | 第103页 |
8. 统计分析 | 第103-104页 |
结果 | 第104-109页 |
1. PGE2致敏脊髓背根神经节内感觉神经元 | 第104-105页 |
2. PGE2刺激外周感觉神经后中枢五羟色胺信号通路变化 | 第105-107页 |
3. Avil-EP4~(-/-)小鼠骨骼系统中交感兴奋性增高 | 第107-108页 |
4. Avil-EP4~(-/-)小鼠外周抑制去甲肾上腺素受体后小鼠骨量变化 | 第108-109页 |
讨论 | 第109-112页 |
参考文献 | 第112-115页 |
全文总结 | 第115-116页 |
学术成果 | 第116-117页 |
致谢 | 第117-119页 |
附录 | 第119-122页 |