摘要 | 第8-10页 |
ABSTRACT | 第10-11页 |
缩略语表 | 第12-13页 |
1 前言 | 第13-22页 |
1.1 研究问题的由来 | 第13页 |
1.2 骨骼肌生长发育调控相关研究 | 第13-18页 |
1.2.1 骨骼肌发育的基本过程 | 第14-15页 |
1.2.2 骨骼肌生长发育过程中主要调控因子研究进展 | 第15-17页 |
1.2.3 骨骼肌的再生 | 第17-18页 |
1.3 Mybph基因研究进展 | 第18-21页 |
1.3.1 Mybph基因的结构 | 第18-19页 |
1.3.2 Mybph基因的功能研究进展 | 第19-21页 |
1.4 研究目的与意义 | 第21-22页 |
2 实验材料与方法 | 第22-42页 |
2.1 材料 | 第22-26页 |
2.1.1 猪组织样品 | 第22页 |
2.1.2 细胞系、载体和菌株 | 第22-23页 |
2.1.3 主要试剂与试剂盒 | 第23-24页 |
2.1.4 主要试剂的配制 | 第24-25页 |
2.1.5 主要仪器设备 | 第25-26页 |
2.1.6 主要生物学分析软件及网站 | 第26页 |
2.2 试验方法 | 第26-42页 |
2.2.1 组织和细胞总RNA的提取 | 第26-27页 |
2.2.2 cDNA的合成 | 第27-28页 |
2.2.3 引物的设计 | 第28-29页 |
2.2.4 PCR扩增反应 | 第29页 |
2.2.5 猪组织表达谱的构建 | 第29-30页 |
2.2.6 真核表达载体的构建 | 第30-33页 |
2.2.7 干涉片段的合成 | 第33页 |
2.2.8 细胞培养及质粒转染 | 第33-35页 |
2.2.9 激光共聚焦技术 | 第35页 |
2.2.10 细胞增殖实验 | 第35-36页 |
2.2.11 免疫荧光技术 | 第36-37页 |
2.2.12 Western Blot技术 | 第37-40页 |
2.2.13 细胞周期的测定 | 第40-42页 |
3 结果与分析 | 第42-56页 |
3.1 Mybph基因的组织表达谱 | 第42页 |
3.2 生物信息学对小鼠Mybph蛋白亚细胞定位的预测 | 第42-43页 |
3.3 Mybph在C2C12细胞中的表达定位 | 第43-44页 |
3.4 真核表达载体pcDNA3.1(+)-Mybph的构建 | 第44-46页 |
3.4.1 C2C12细胞RNA的提取及cDNA的合成 | 第44-45页 |
3.4.2 PMD-18T-Mybph质粒与真核表达载体pcDNA3.1(+)的双酶切 | 第45-46页 |
3.5 干涉片段的选择 | 第46页 |
3.6 Mybph基因在C2C12细胞分化过程中的时空表达情况 | 第46-47页 |
3.7 Mybph基因对C2C12细胞分化的影响 | 第47-50页 |
3.7.1 超表达Mybph基因对C2C12细胞分化的影响 | 第47-48页 |
3.7.2 干涉Mybph基因对C2C12细胞分化的影响 | 第48-50页 |
3.8 Mybph基因对C2C12细胞增殖的影响 | 第50-54页 |
3.8.1 实时无标记分析技术(RCTA)检测Mybph基因对C2C12细胞增殖的影响 | 第50-51页 |
3.8.2 免疫荧光技术检测Mybph基因对C2C12细胞增殖影响 | 第51-54页 |
3.8.3 Western blot检测Mybph基因对C2C12细胞增殖影响 | 第54页 |
3.9 Mypbh基因对细胞周期的影响 | 第54-56页 |
4 讨论 | 第56-59页 |
4.1 Mybph基因在成肌细胞时空分化过程中表达差异 | 第56页 |
4.2 Mybph基因在猪不同组织的差异性表达 | 第56页 |
4.3 Mybph基因对成肌细胞增殖、分化的调控 | 第56-58页 |
4.3.1 Mybph基因对成肌细胞分化的影响 | 第57页 |
4.3.2 Mybph基因对成肌细胞增殖的影响 | 第57-58页 |
总结 | 第58-59页 |
5 小结 | 第59-61页 |
5.1 本研究的主要结果 | 第59-60页 |
5.2 本研究的创新点 | 第60页 |
5.3 下一步工作计划 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-69页 |
致谢 | 第69页 |