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Mybph基因在肌细胞增殖、分化中的调控作用研究

摘要第8-10页
ABSTRACT第10-11页
缩略语表第12-13页
1 前言第13-22页
    1.1 研究问题的由来第13页
    1.2 骨骼肌生长发育调控相关研究第13-18页
        1.2.1 骨骼肌发育的基本过程第14-15页
        1.2.2 骨骼肌生长发育过程中主要调控因子研究进展第15-17页
        1.2.3 骨骼肌的再生第17-18页
    1.3 Mybph基因研究进展第18-21页
        1.3.1 Mybph基因的结构第18-19页
        1.3.2 Mybph基因的功能研究进展第19-21页
    1.4 研究目的与意义第21-22页
2 实验材料与方法第22-42页
    2.1 材料第22-26页
        2.1.1 猪组织样品第22页
        2.1.2 细胞系、载体和菌株第22-23页
        2.1.3 主要试剂与试剂盒第23-24页
        2.1.4 主要试剂的配制第24-25页
        2.1.5 主要仪器设备第25-26页
        2.1.6 主要生物学分析软件及网站第26页
    2.2 试验方法第26-42页
        2.2.1 组织和细胞总RNA的提取第26-27页
        2.2.2 cDNA的合成第27-28页
        2.2.3 引物的设计第28-29页
        2.2.4 PCR扩增反应第29页
        2.2.5 猪组织表达谱的构建第29-30页
        2.2.6 真核表达载体的构建第30-33页
        2.2.7 干涉片段的合成第33页
        2.2.8 细胞培养及质粒转染第33-35页
        2.2.9 激光共聚焦技术第35页
        2.2.10 细胞增殖实验第35-36页
        2.2.11 免疫荧光技术第36-37页
        2.2.12 Western Blot技术第37-40页
        2.2.13 细胞周期的测定第40-42页
3 结果与分析第42-56页
    3.1 Mybph基因的组织表达谱第42页
    3.2 生物信息学对小鼠Mybph蛋白亚细胞定位的预测第42-43页
    3.3 Mybph在C2C12细胞中的表达定位第43-44页
    3.4 真核表达载体pcDNA3.1(+)-Mybph的构建第44-46页
        3.4.1 C2C12细胞RNA的提取及cDNA的合成第44-45页
        3.4.2 PMD-18T-Mybph质粒与真核表达载体pcDNA3.1(+)的双酶切第45-46页
    3.5 干涉片段的选择第46页
    3.6 Mybph基因在C2C12细胞分化过程中的时空表达情况第46-47页
    3.7 Mybph基因对C2C12细胞分化的影响第47-50页
        3.7.1 超表达Mybph基因对C2C12细胞分化的影响第47-48页
        3.7.2 干涉Mybph基因对C2C12细胞分化的影响第48-50页
    3.8 Mybph基因对C2C12细胞增殖的影响第50-54页
        3.8.1 实时无标记分析技术(RCTA)检测Mybph基因对C2C12细胞增殖的影响第50-51页
        3.8.2 免疫荧光技术检测Mybph基因对C2C12细胞增殖影响第51-54页
        3.8.3 Western blot检测Mybph基因对C2C12细胞增殖影响第54页
    3.9 Mypbh基因对细胞周期的影响第54-56页
4 讨论第56-59页
    4.1 Mybph基因在成肌细胞时空分化过程中表达差异第56页
    4.2 Mybph基因在猪不同组织的差异性表达第56页
    4.3 Mybph基因对成肌细胞增殖、分化的调控第56-58页
        4.3.1 Mybph基因对成肌细胞分化的影响第57页
        4.3.2 Mybph基因对成肌细胞增殖的影响第57-58页
    总结第58-59页
5 小结第59-61页
    5.1 本研究的主要结果第59-60页
    5.2 本研究的创新点第60页
    5.3 下一步工作计划第60-61页
参考文献第61-69页
致谢第69页

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