| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 前言 | 第8-11页 |
| 第二章 材料与方法 | 第11-40页 |
| 2.1 实验材料 | 第11-16页 |
| 2.1.1 研究对象 | 第11页 |
| 2.1.2 样品处理 | 第11页 |
| 2.1.3 细胞株及质粒 | 第11-13页 |
| 2.1.4 实验试剂用品 | 第13-14页 |
| 2.1.5 主要仪器设备 | 第14-15页 |
| 2.1.6 序列合成及测定 | 第15-16页 |
| 2.2 实验方法 | 第16-40页 |
| 2.2.1 基因组DNA提取 | 第16-17页 |
| 2.2.2 DNA定量 | 第17页 |
| 2.2.3 PCR引物设计 | 第17-19页 |
| 2.2.4 PCR扩增 | 第19-20页 |
| 2.2.5 重组质粒构建 | 第20-28页 |
| 2.2.6 APMl基因启动子定点突变 | 第28-33页 |
| 2.2.7 转染3T3L1细胞 | 第33-38页 |
| 2.2.8 双荧光素酶报告基因检测 | 第38-39页 |
| 2.2.9 数据统计 | 第39-40页 |
| 第三章 实验结果 | 第40-52页 |
| 3.1 临床样本特征 | 第40页 |
| 3.2 DNA提取 | 第40页 |
| 3.3 APM1启动子区PCR产物琼脂糖凝胶电泳 | 第40页 |
| 3.4 APM1启动子区PCR产物测序 | 第40-41页 |
| 3.5 测序结果统计 | 第41-42页 |
| 3.6 重组子构建 | 第42-44页 |
| 3.6.1 pGL4.11酶切 | 第42页 |
| 3.6.2 APM1片段酶切 | 第42-43页 |
| 3.6.3 pGL4.11-APM1重组子酶切鉴定 | 第43-44页 |
| 3.7 APM1定点突变鉴定 | 第44-46页 |
| 3.8 小鼠前脂肪细胞3T3L诱导成熟 | 第46-47页 |
| 3.9 不同单体型APM1启动子区萤光素酶报告基因活性检测 | 第47-50页 |
| 3.9.1 不同单体型APM1启动子区萤光素酶报告基因活性 | 第47-49页 |
| 3.9.2 萤火虫荧光素酶活性与海肾荧光素酶活性比值 | 第49-50页 |
| 3.10 数据统计 | 第50-52页 |
| 第四章 讨论 | 第52-60页 |
| 第五章 小结与展望 | 第60-61页 |
| 5.1 小结 | 第60页 |
| 5.2 展望 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-65页 |
| 附录 | 第65-68页 |
| 附录Ⅰ 英文缩写词 | 第65-66页 |
| 附录Ⅱ 主要溶液的配制 | 第66-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 作者简历 | 第69-70页 |
