| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 英文缩略词表 | 第9-10页 |
| 第1章 马驽巴贝斯虫病及其诊断技术研究进展 | 第10-22页 |
| 1.1 马驽巴贝斯虫病概要 | 第10-15页 |
| 1.2 马驽巴贝斯虫病诊断技术研究进展 | 第15-21页 |
| 1.2.1 病原学诊断 | 第15-16页 |
| 1.2.2 免疫学诊断 | 第16-18页 |
| 1.2.3 分子生物学诊断 | 第18-21页 |
| 1.3 本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 第2章 新疆马驽巴贝斯虫地方流行虫株Bc-Y的分离、获得及部分地区流行病学研究 | 第22-28页 |
| 2.1 试验材料 | 第22-23页 |
| 2.1.1 样品采集 | 第22页 |
| 2.1.2 试剂与仪器 | 第22页 |
| 2.1.3 引物 | 第22-23页 |
| 2.2 试验方法 | 第23-24页 |
| 2.2.1 血液涂片染色、镜检 | 第23页 |
| 2.2.2 马驽巴贝斯虫PCR检测 | 第23页 |
| 2.2.3 马驽巴贝斯虫地方流行虫株Bc-Y的分离、获得 | 第23-24页 |
| 2.3 结果与分析 | 第24-27页 |
| 2.3.1 血液涂片染色镜检结果 | 第24页 |
| 2.3.2 马驽巴贝斯虫病PCR检测结果 | 第24-25页 |
| 2.3.3 不同区域马驽巴贝斯虫病感染情况 | 第25-26页 |
| 2.3.4 不同年龄马驽巴贝斯虫感染情况 | 第26页 |
| 2.3.5 马驽巴贝斯虫地方流行虫株Bc-Y测序结果 | 第26-27页 |
| 2.4 讨论与小结 | 第27-28页 |
| 第3章 马驽巴贝斯虫新疆株Bc48靶基因克隆表达及重组质粒构建 | 第28-41页 |
| 3.1 试验材料 | 第28-29页 |
| 3.1.1 血液来源 | 第28页 |
| 3.1.2 菌种及质粒 | 第28页 |
| 3.1.3 试剂及工具酶 | 第28-29页 |
| 3.1.4 主要仪器设备 | 第29页 |
| 3.2 试验方法 | 第29-35页 |
| 3.2.1 Bc48基因表达引物设计 | 第29页 |
| 3.2.2 马驽巴贝斯虫Bc48基因的PCR扩增 | 第29-30页 |
| 3.2.3 PCR产物的回收与纯化 | 第30页 |
| 3.2.4 重组表达载体的构建 | 第30-32页 |
| 3.2.5 重组表达质粒的 PCR/双酶切鉴定 | 第32页 |
| 3.2.6 目的基因序列测定 | 第32页 |
| 3.2.7 重组表达质粒的诱导表达 | 第32-33页 |
| 3.2.8 可溶性高效表达重组质粒的筛选 | 第33页 |
| 3.2.9 诱导条件的优化 | 第33-34页 |
| 3.2.10 目的蛋白的纯化 | 第34页 |
| 3.2.11 Western blotting 分析 | 第34-35页 |
| 3.3 结果与分析 | 第35-39页 |
| 3.3.1 马驽巴贝斯虫Bc48基因的扩增 | 第35页 |
| 3.3.2 马驽巴贝斯虫Bc48基因序列分析 | 第35-36页 |
| 3.3.3 重组表达质粒的鉴定结果 | 第36-37页 |
| 3.3.4 目的基因Bc48的测序分析结果 | 第37页 |
| 3.3.5 高效可溶性表达重组质粒的筛选 | 第37-38页 |
| 3.3.6 诱导条件的优化结果 | 第38-39页 |
| 3.3.7 目的蛋白的纯化及鉴定 | 第39页 |
| 3.4 讨论与分析 | 第39-41页 |
| 第4章 马驽巴贝斯虫病间接ELISA检测方法的建立及初步应用 | 第41-52页 |
| 4.1 试验材料 | 第41-42页 |
| 4.1.1 抗原及血清 | 第41页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第41页 |
| 4.1.3 主要仪器设备 | 第41-42页 |
| 4.1.4 临床样品来源 | 第42页 |
| 4.2 试验方法 | 第42-45页 |
| 4.2.1 GST-GB蛋白的定量 | 第42页 |
| 4.2.2 间接ELISA方法的建立 | 第42-45页 |
| 4.3 结果与分析 | 第45-51页 |
| 4.3.1 GST-GB蛋白浓度的测定 | 第45页 |
| 4.3.2 最佳抗原包被浓度和血清稀释度的确定结果 | 第45-46页 |
| 4.3.3 血清最佳作用时间的确定 | 第46页 |
| 4.3.4 酶标二抗最佳工作浓度和时间的确定 | 第46-47页 |
| 4.3.5 底物作用时间的确定 | 第47-48页 |
| 4.3.6 阴阳性临界值的确定 | 第48页 |
| 4.3.7 间接ELISA方法评测的结果 | 第48-51页 |
| 4.3.8 样品检测结果 | 第51页 |
| 4.4 讨论与分析 | 第51-52页 |
| 全文结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-61页 |
| 附录 | 第61-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 作者简介 | 第65页 |
