| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 引言 | 第10-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-20页 |
| 1.1 慢性肾衰竭与中分子 | 第11-12页 |
| 1.1.1 慢性肾衰竭 | 第11页 |
| 1.1.3 中分子 | 第11-12页 |
| 1.2 甲状旁腺激素 | 第12-14页 |
| 1.2.1 甲状旁腺激素概述 | 第12页 |
| 1.2.2 PTH的去除 | 第12-14页 |
| 1.3 纳米抗体技术 | 第14-17页 |
| 1.3.1 纳米抗体(Nb)的发现及结构特征 | 第14-15页 |
| 1.3.2 纳米抗体的应用 | 第15-16页 |
| 1.3.3 纳米抗体的表达 | 第16-17页 |
| 1.4 血液净化吸附剂 | 第17-19页 |
| 1.4.1 血液净化技术 | 第17-18页 |
| 1.4.2 血液净化吸附剂 | 第18-19页 |
| 1.5 本论文研究目的、内容和意义 | 第19-20页 |
| 2 抗PTH纳米抗体的表达和纯化 | 第20-40页 |
| 2.1 引言 | 第20页 |
| 2.2 实验材料与仪器 | 第20-23页 |
| 2.2.1 材料与试剂 | 第20-22页 |
| 2.2.2 主要仪器、耗材 | 第22-23页 |
| 2.3 实验方法 | 第23-30页 |
| 2.3.1 制备感受态细胞 | 第23-24页 |
| 2.3.2 重组质粒的转化 | 第24-25页 |
| 2.3.3 重组蛋白的表达 | 第25页 |
| 2.3.4 菌体破碎 | 第25-26页 |
| 2.3.5 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和考马斯亮蓝染色 | 第26-27页 |
| 2.3.6 琼脂糖凝胶电泳 | 第27页 |
| 2.3.8 固定化金属离子亲和层析 | 第27-28页 |
| 2.3.9 强阴离子交换层析 | 第28-29页 |
| 2.3.10 重组蛋白纯度分析及回收率计算 | 第29页 |
| 2.3.11 BCA法测定总蛋白含量 | 第29-30页 |
| 2.3.12 超滤 | 第30页 |
| 2.4 实验结果与讨论 | 第30-38页 |
| 2.4.1 重组蛋白的表达 | 第30-32页 |
| 2.4.2 重组蛋白的可溶性检测 | 第32-33页 |
| 2.4.3 固定化金属离子亲和层析分离纯化蛋白 | 第33-37页 |
| 2.4.4 强阴离子交换层析纯化目的蛋白 | 第37-38页 |
| 2.5 小结 | 第38-40页 |
| 3 抗PTH纳米抗体的亲和活性检测 | 第40-50页 |
| 3.1 引言 | 第40页 |
| 3.2 实验材料 | 第40-42页 |
| 3.2.1 材料与试剂 | 第40-41页 |
| 3.2.2 主要仪器与耗材 | 第41-42页 |
| 3.3 实验方法 | 第42-45页 |
| 3.3.1 酶联免疫吸附测定 | 第42页 |
| 3.3.2 等温滴定量热法 | 第42-43页 |
| 3.3.3 表面等离子共振 | 第43-45页 |
| 3.4 实验结果及讨论 | 第45-49页 |
| 3.4.1 酶联免疫吸附测定 | 第45页 |
| 3.4.2 等温滴定量热法 | 第45-47页 |
| 3.4.3 表面等离子共振 | 第47-49页 |
| 3.5 小结 | 第49-50页 |
| 4 吸附剂的合成及其吸附性能研究 | 第50-61页 |
| 4.1 引言 | 第50页 |
| 4.2 实验材料 | 第50-51页 |
| 4.2.1 材料与试剂 | 第50页 |
| 4.2.2 主要仪器与耗材 | 第50-51页 |
| 4.3 实验方法 | 第51-58页 |
| 4.3.1 吸附剂的合成 | 第51-53页 |
| 4.3.2 环氧密度和活化羧基密度的测定方法 | 第53-56页 |
| 4.3.3 Bradford法测定吸附剂吸附蛋白情况 | 第56-57页 |
| 4.3.4 吸附剂亲和常数测定 | 第57页 |
| 4.3.5 吸附剂动态结合容量测定 | 第57-58页 |
| 4.3.6 吸附剂对HSA的吸附 | 第58页 |
| 4.3.7 吸附剂对IgG的吸附 | 第58页 |
| 4.4 实验结果及讨论 | 第58-60页 |
| 4.4.1 吸附剂的合成 | 第58页 |
| 4.4.2 吸附剂亲和常数测定 | 第58-59页 |
| 4.4.3 吸附剂对PTH动态结合容量测定 | 第59-60页 |
| 4.4.4 吸附剂对HSA的吸附 | 第60页 |
| 4.4.5 吸附剂对IgG的吸附 | 第60页 |
| 4.5 小结 | 第60-61页 |
| 结论 | 第61-62页 |
| 展望 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-67页 |
| 附录A 重组蛋白PTH(1-84)氨基酸序列 | 第67-68页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |