| 序言 | 第1-8页 |
| 第一部分：四维正交凝胶电泳系统(4-DES) | 第8-40页 |
| 中文摘要 | 第9-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 引言 | 第11-14页 |
| 材料和方法 | 第14-22页 |
| 一、实验仪器.材料及试剂 | 第14-15页 |
| 二. 方法 | 第15-22页 |
| 1. 红细胞胞质蛋白质提取 | 第15页 |
| 2. Raji细胞胞质蛋白质提取 | 第15页 |
| 3. 蛋白质浓度测定(Braford assay) | 第15页 |
| 4. 第一维电泳：非变性薄层等电聚焦电泳(1st-DE：native-tl-IEF) | 第15-17页 |
| 5. 第二维电泳：非变性凝胶电泳(2nd-DE：native-PAGE) | 第17-18页 |
| 6. 碱-超声蛋白胶内萃取策略(Alkaline-ultrasonic protein extractive strategy) | 第18页 |
| 7. SDS-PAGE分离 | 第18-19页 |
| 8. 第三/四维电泳：变性IEF/SDS-PAGE(3,rd-/4th-DE：denaturing-IEF/SDS-PAGE) | 第19-20页 |
| 9. 蛋白酶体20S核心复合体CP活性检测 | 第20页 |
| 10. 蛋白质胶内酶切及质谱分析 | 第20-22页 |
| 实验结果与讨论 | 第22-35页 |
| 一. 1st-DE：native-tl-IEF条件优化 | 第22-24页 |
| 二. 碱-超声蛋白胶内萃取策略条件优化 | 第24-26页 |
| 三. 四维正交凝胶电泳系统(4-DES) | 第26-31页 |
| 四. 蛋白酶体20S(CP)、血红蛋白α2β2(Hb,α2β2)、过氧化物氧化酶-2(PRDX2)及热休克蛋白60(HSP60)胞质蛋白复合体4-DES蛋白质组学表征 | 第31-35页 |
| 结论 | 第35-36页 |
| 参考文献 | 第36-40页 |
| 第二部分：广谱四维正交凝胶电泳系统(BS4-DES) | 第40-87页 |
| 中文摘要 | 第41-42页 |
| Abstract | 第42-43页 |
| 引言 | 第43-46页 |
| 材料和方法 | 第46-52页 |
| 一. 材料 | 第46-47页 |
| 二. 方法 | 第47-52页 |
| 1.第一维电泳：非变性薄层等电聚焦电泳（Ist-DE: native-tl-IEF) | 第47-48页 |
| 2. 第二维电泳：酸-碱非变性凝胶电泳(2nd-DE：acidic-basic-native-PAGE) | 第48-49页 |
| 3. 氨水-超声蛋白胶内萃取策略(NH_3·H_2O-ultrasonic protein extractive strategy) | 第49页 |
| 4. SDS-PAGE分离 | 第49页 |
| 5. 第三/四维电泳：变性IEF/SDS-PAGE(3rd-/4th-DE：denaturing-IEF/SDS-PAGE) | 第49页 |
| 6. 蛋白酶体20S核心复合体CP活性检测表征1st-/2nd-DE的非变性电泳特性 | 第49-50页 |
| 7. 蛋白质胶内酶切及质谱分析 | 第50-52页 |
| 实验结果与讨论 | 第52-81页 |
| 一. 酸性非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Acidic-native-PAGE) | 第52-59页 |
| 1. Acidic-native-PAGE初步构建 | 第52-55页 |
| 2. Acidic-native-PAGE条件优化 | 第55-56页 |
| 3. Acidic-native-PAGE分离机制 | 第56-59页 |
| 二. 氨水-超声蛋白胶内萃取策略(NH_3·H_2O-ultrasonic protein extractive strategy) | 第59-65页 |
| 1. NH_3·H_2O-ultrasonic protein extractive strategy条件优化 | 第59-61页 |
| 2. NH_3·H_2O的两大特性：挥发性与弱碱性 | 第61-63页 |
| 3. NH_3·H_2O-ultrasonic protein extractive strategy萃取机制 | 第63-65页 |
| 三.广谱四维正交凝胶电泳系统(BS4-DES) | 第65-72页 |
| 1. BS4-DES与其它分离技术的比较 | 第66-68页 |
| 2. BS4-DES理论分辨率 | 第68-69页 |
| 3. BS4-DES对蛋白质修饰的影响 | 第69-72页 |
| 四.血液蛋白质复合体BS4-DES蛋白质组学表征 | 第72-81页 |
| 1. 正常血清与血浆Part Ⅰ蛋白质组学表征 | 第72-74页 |
| 2. 疾病血清蛋白质组BS4-DES表征 | 第74-81页 |
| 结论 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-87页 |
| 附录 | 第87-118页 |
| 综述 | 第118-132页 |
| 参考文献 | 第125-132页 |
| 致谢 | 第132-135页 |
| 在读期间论文发表及会议参加情况 | 第135-136页 |
