中文摘要 | 第8-11页 |
ABSTRACT | 第11-14页 |
1 前言 | 第15-18页 |
2 实验材料 | 第18-23页 |
2.1 实验取材 | 第18页 |
2.2 细胞 | 第18页 |
2.3 药品与试剂 | 第18-20页 |
2.4 仪器与设备 | 第20-22页 |
2.5 溶液和试剂的配制 | 第22-23页 |
3 实验方法 | 第23-37页 |
3.1 PC-3细胞的培养 | 第23-25页 |
3.1.1 PC-3细胞复苏 | 第23页 |
3.1.2 PC-3细胞培养 | 第23页 |
3.1.3 PC-3细胞换液 | 第23-24页 |
3.1.4 PC-3细胞传代 | 第24-25页 |
3.1.5 冻存细胞 | 第25页 |
3.2 TRPM7-siRNA转染到PC-3细胞 | 第25-26页 |
3.3 使用流式细胞仪检测PC-3细胞凋亡变化(Annexin V-FITC/PI双染) | 第26-28页 |
3.4 RT-PCR | 第28-31页 |
3.4.1 PC-3细胞总RNA的提取 | 第28-29页 |
3.4.2 cDNA的合成 | 第29页 |
3.4.3 PCR扩增 | 第29-31页 |
3.4.4 PCR凝胶电泳和定量分析 | 第31页 |
3.5 MTT法 | 第31-32页 |
3.6 Western blot | 第32-36页 |
3.7 统计学分析 | 第36-37页 |
4 实验结果 | 第37-65页 |
4.1. TRPM7在人前列腺癌组织中的表达 | 第37-38页 |
4.2 阻断TRPM7对PC-3细胞的影响 | 第38-49页 |
4.2.1. 非特异性TRPM7阻断剂及TRPM7-siRNA的作用剂量筛选 | 第38-41页 |
4.2.2 降低TRPM7表达对PC-3细胞凋亡的影响 | 第41-49页 |
4.3 TRPM7对TRAIL诱导的PC-3细胞凋亡的影响及其机制研究 | 第49-65页 |
4.3.1 不同浓度的TRAIL对PC-3细胞凋亡的影响 | 第49-51页 |
4.3.2 TRAIL诱导PC-3细胞凋亡对TRPM7表达的影响 | 第51-52页 |
4.3.3 阻断TRPM7表达对TRAIL诱导后PC-3细胞凋亡的影响 | 第52-54页 |
4.3.4 阻断TRPM7表达对TRAIL诱导PC-3细胞后凋亡蛋白的影响 | 第54-60页 |
4.3.5 TRPM7对PC-3细胞调控的机制研究 | 第60-65页 |
5 讨论 | 第65-73页 |
6. 结论 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-81页 |
附录 | 第81-83页 |
致谢 | 第83-85页 |
综述 | 第85-99页 |
参考文献 | 第94-99页 |