摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
缩略词 | 第7-11页 |
1 前言 | 第11-23页 |
1.1 植物叶色突变体研究 | 第11-13页 |
1.1.1 叶色突变体的来源 | 第12页 |
1.1.2 叶色突变体的类型 | 第12-13页 |
1.2 植物Chl合成及调控 | 第13-18页 |
1.3 植物叶绿体装备及调控 | 第18-20页 |
1.4 立题依据及研究意义 | 第20-23页 |
2 材料与方法 | 第23-35页 |
2.1 实验材料 | 第23页 |
2.2 Chl含量测定 | 第23-24页 |
2.3 玉米叶肉细胞原生质体分离 | 第24页 |
2.4 叶绿素生物合成前体物质测定 | 第24-25页 |
2.4.1 δ-氨基乙酰丙酸(ALA)的测定 | 第24-25页 |
2.4.2 胆色素原(PBG)的测定 | 第25页 |
2.4.3 尿卟啉原Ⅲ(UrogenⅢ)的测定 | 第25页 |
2.4.4 原叶绿素酸酯(Pchlide)和叶绿素酸酯(Chlide)的测定 | 第25页 |
2.5 改良的SLS方法提取玉米DNA | 第25-26页 |
2.6 实验试剂 | 第26-27页 |
2.7 BAC-SSR引物设计 | 第27页 |
2.8 BSA法建池 | 第27-28页 |
2.9 PCR反应体系 | 第28页 |
2.10 PCR反应程序 | 第28-29页 |
2.11 PCR扩增产物检测 | 第29-32页 |
2.11.1 DNA产物变性 | 第29页 |
2.11.2 电泳准备 | 第29-30页 |
2.11.3 PCR产物的电泳 | 第30页 |
2.11.4 银染法检测PCR产物 | 第30-31页 |
2.11.5 扩增产物数据收集 | 第31-32页 |
2.12 BAC文库的序列分析及候选基因的预测 | 第32页 |
2.13 玉米基因PCR扩增 | 第32-35页 |
2.13.1 PCR扩增体系 | 第32页 |
2.13.2 PCR反应程序 | 第32-33页 |
2.13.3 1%琼脂糖凝胶配制及电泳 | 第33页 |
2.13.4 琼脂糖凝胶DNA回收与纯化 | 第33-35页 |
3 结果与分析 | 第35-47页 |
3.1 eti1突变体的鉴定 | 第35-38页 |
3.1.1 eti1突变体的表型 | 第35页 |
3.1.2 eti1突变体气孔检测 | 第35-36页 |
3.1.3 Chl荧光和含量检测 | 第36-37页 |
3.1.4 叶绿体荧光检测 | 第37页 |
3.1.5 Chl合成中间产物的检测 | 第37-38页 |
3.2 eti1突变体遗传分析 | 第38-39页 |
3.3 图位克隆 | 第39-47页 |
3.3.1 eti1克隆群体构建 | 第39页 |
3.3.2 基因ETI1的BSA分析及初步定位 | 第39-42页 |
3.3.3 基因ETI1的细定位分析 | 第42-45页 |
3.3.4 目标区域内候选基因的预测及功能分析 | 第45-47页 |
4 讨论 | 第47-50页 |
4.1 eti1突变体的表型特征 | 第47页 |
4.2 玉米图位克隆基因策略探讨 | 第47-50页 |
4.2.1 表型鉴定与群体构建 | 第47-48页 |
4.2.2 分子标记开发和基因定位 | 第48-49页 |
4.2.3 基因的预测分析 | 第49页 |
4.2.4 后续工作设想 | 第49-50页 |
5 结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-60页 |
致谢 | 第60页 |