| 致谢 | 第5-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-18页 |
| 1.1 共轭亚油酸主要生理功能 | 第11-12页 |
| 1.2 国内外共轭亚油酸种来源的研究现状 | 第12-14页 |
| 1.2.1 共轭亚油酸天然食物来源 | 第12页 |
| 1.2.2 化学法制备共轭亚油酸 | 第12页 |
| 1.2.3 CLA的生物合成 | 第12-14页 |
| 1.3 脂肪酶与亚油酸异构酶双酶体系生产CLA | 第14-15页 |
| 1.4 固定化酶和固定化细胞 | 第15-16页 |
| 1.5 本课题的研究内容 | 第16-18页 |
| 第二章 CLA检测方法建立 | 第18-24页 |
| 2.0 前言 | 第18页 |
| 2.1 实验材料和仪器 | 第18-19页 |
| 2.1.1 试剂及器材 | 第18-19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-20页 |
| 2.2.1 分光光度计检测法检测 | 第19页 |
| 2.2.2 GC-MS法检测 | 第19-20页 |
| 2.3 实验结果 | 第20-23页 |
| 2.3.1 分光光度计法检测 | 第20页 |
| 2.3.2 GC-MS法检测 | 第20-23页 |
| 2.4 本章小结 | 第23-24页 |
| 第三章 共轭亚油酸的原核表达系统的构建 | 第24-38页 |
| 3.1 引言 | 第24-25页 |
| 3.2 实验材料及仪器 | 第25-27页 |
| 3.2.1 基因和菌种 | 第25页 |
| 3.2.2 试剂及器材 | 第25-26页 |
| 3.2.3 溶液与培养基 | 第26-27页 |
| 3.3 实验方法 | 第27-30页 |
| 3.3.1 共轭亚油酸异构酶基因的获得 | 第27页 |
| 3.3.2 构建工程菌 | 第27页 |
| 3.3.3 优化重组酶表达的诱导条件 | 第27-28页 |
| 3.3.4 Ni+柱纯化初步纯化重组蛋白 | 第28页 |
| 3.3.5 重组酶反应最适温度的探索 | 第28-29页 |
| 3.3.6 重组酶反应最适pH的探索 | 第29页 |
| 3.3.7 在最适反应条件下检测重组酶的转化率和产率 | 第29-30页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第30-36页 |
| 3.4.1 优化重组酶表达的诱导条件 | 第30-31页 |
| 3.4.2 Ni+柱纯化初步纯化重组蛋白 | 第31-32页 |
| 3.4.3 重组酶反应最适温度的探索 | 第32-33页 |
| 3.4.4 重组酶反应最适pH的探索 | 第33-34页 |
| 3.4.5 在最适反应条件下检测重组酶的转化率和产率 | 第34-36页 |
| 3.5 本章小结 | 第36-38页 |
| 第四章 共轭亚油酸的酶法合成工艺研究 | 第38-49页 |
| 4.1 引言 | 第38-39页 |
| 4.2 实验材料与仪器 | 第39-40页 |
| 4.2.1 菌种 | 第39页 |
| 4.2.2 试剂及器材 | 第39-40页 |
| 4.2.3 溶液与培养基 | 第40页 |
| 4.3 实验方法 | 第40-43页 |
| 4.3.1 重组PAI酶液制备 | 第40页 |
| 4.3.2 脂肪酶酶活的测定方法 | 第40-41页 |
| 4.3.3 脂肪酶CAL-B和共轭亚油酸异构酶PAI的共表达 | 第41页 |
| 4.3.4 筛选脂肪酶,优化反应体系 | 第41-42页 |
| 4.3.5 固定化PAI酶 | 第42-43页 |
| 4.3.6 固定化PAI细胞 | 第43页 |
| 4.3.7 双酶联用体系生产共轭亚油酸 | 第43页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第43-48页 |
| 4.4.1 共表达菌株酶活力的检测 | 第43-45页 |
| 4.4.2 筛选脂肪酶 | 第45-46页 |
| 4.4.3 固定化PAI酶 | 第46-47页 |
| 4.4.4 固定化细胞 | 第47-48页 |
| 4.4.5 双酶联用体系生产共轭亚油酸 | 第48页 |
| 4.5 本章小结 | 第48-49页 |
| 第五章 结论与展望 | 第49-50页 |
| 5.1 结论 | 第49页 |
| 5.2 展望 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
