| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 中英文缩略词表 | 第10-11页 |
| 前言 | 第11-15页 |
| 第1章 神经生长因子及其受体在上皮性卵巢肿瘤中的表达 | 第15-31页 |
| 1.1 背景 | 第15页 |
| 1.2 材料与方法 | 第15-23页 |
| 1.2.1 临床组织标本 | 第15-16页 |
| 1.2.2 组织样本RNA抽提相关试剂 | 第16页 |
| 1.2.3 蛋白抽提及免疫印迹相关试剂 | 第16页 |
| 1.2.4 ELISA检测相关试剂 | 第16-17页 |
| 1.2.5 westernblot及免疫组化相关抗体 | 第17页 |
| 1.2.6 免疫组织化学染色相关试剂： | 第17页 |
| 1.2.7 实验仪器及设备 | 第17-18页 |
| 1.2.8 卵巢肿瘤组织及癌旁组织mRNA提取 | 第18-20页 |
| 1.2.9 卵巢肿瘤组织及癌旁组织蛋白提取 | 第20-21页 |
| 1.2.10 ELISA检测蛋白含量 | 第21页 |
| 1.2.11 组织样本westernblot检测 | 第21-22页 |
| 1.2.12 卵巢肿瘤组织与正常卵巢组织免疫组化实验 | 第22-23页 |
| 1.2.13 统计学分析 | 第23页 |
| 1.3 结果 | 第23-28页 |
| 1.3.1 在恶性上皮性卵巢肿瘤组织和正常卵巢组织中NGF及其受体mRNA的定量表达 | 第23-24页 |
| 1.3.2 在良性卵巢肿瘤组织和恶性上皮性卵巢肿瘤组织中NGF及其受体mRNA的表达 | 第24-25页 |
| 1.3.3 恶性上皮性卵巢肿瘤组织与正常卵巢组织中NGF及其受体蛋白的定量表达 | 第25-26页 |
| 1.3.4 恶性上皮性卵巢肿瘤组织和良性卵巢肿瘤组织中NGF及其受体蛋白的定量表达 | 第26-27页 |
| 1.3.5 利用Westernblot方法分析不同样本中NGF及其受体蛋白的定量表达 | 第27页 |
| 1.3.6 免疫组织化学方法检测NGF及其受体在正常卵巢组织和上皮性恶性卵巢肿瘤中的表达 | 第27-28页 |
| 1.4 讨论 | 第28-31页 |
| 第2章 NGFR调控卵巢癌细胞糖代谢的实验研究 | 第31-71页 |
| 2.1 背景 | 第31-32页 |
| 2.2 材料与方法 | 第32-50页 |
| 2.2.1 细胞系 | 第32页 |
| 2.2.2 质粒 | 第32页 |
| 2.2.3 细胞培养及检测相关试剂 | 第32-33页 |
| 2.2.4 糖代谢相关检测试剂 | 第33页 |
| 2.2.5 荧光素酶活性检测试剂 | 第33页 |
| 2.2.6 质粒抽提纯化试剂 | 第33页 |
| 2.2.7 细胞总RNA抽提相关试剂 | 第33页 |
| 2.2.8 RT-PCR相关试剂 | 第33-34页 |
| 2.2.9 蛋白抽提及免疫印迹(WesternBlot)相关试剂 | 第34页 |
| 2.2.10 抗体 | 第34-35页 |
| 2.2.11 染色质免疫共沉淀实验试剂 | 第35页 |
| 2.2.12 主要仪器 | 第35页 |
| 2.2.13 细胞培养 | 第35-36页 |
| 2.2.14 siRNA转染 | 第36页 |
| 2.2.15 shNGFR质粒构建及慢病毒稳转株建立 | 第36-39页 |
| 2.2.16 构建NGFR真核表达克隆 | 第39-41页 |
| 2.2.17 pGL3-NGFR报告质粒的构建 | 第41-42页 |
| 2.2.18 启动子活性分析实验 | 第42页 |
| 2.2.19 RNA抽提 | 第42-43页 |
| 2.2.20 逆转录(RT)反应 | 第43页 |
| 2.2.21 荧光定量PCR实验 | 第43-44页 |
| 2.2.22 蛋白免疫印迹实验 | 第44-45页 |
| 2.2.23 葡萄糖吸收检测实验 | 第45-46页 |
| 2.2.24 乳酸分泌检测实验 | 第46页 |
| 2.2.25 细胞能量代谢实验 | 第46-47页 |
| 2.2.26 染色质免疫共沉淀(ChIP)实验 | 第47-50页 |
| 2.2.27 数据统计 | 第50页 |
| 2.3 实验结果 | 第50-62页 |
| 2.3.1 构建稳定敲减NGFR的卵巢癌细胞株 | 第50-51页 |
| 2.3.2 敲减NGFR可显著抑制Akt信号和ERK信号的活化 | 第51-53页 |
| 2.3.3 敲减NGFR可显著抑制HIF-1α的表达。 | 第53-54页 |
| 2.3.4 抑制NGFR表达可显著抑制糖酵解 | 第54-57页 |
| 2.3.5 低氧环境诱导SK-OV-3和HO-8910细胞系中NGFR的表达 | 第57-58页 |
| 2.3.6 HIF-1α调控NGFR的表达 | 第58-59页 |
| 2.3.7 NGF信号增强HIF-1α介导的糖酵解过程 | 第59-62页 |
| 2.4 讨论 | 第62-71页 |
| 全文总结 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-82页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第82-83页 |
| 综述 | 第83-101页 |
| 参考文献 | 第97-101页 |
