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低剂量铁离子照射在NL20人支气管上皮细胞中诱导的长期生物学效应

中文摘要第4-8页
abstract第8-11页
前言第15-19页
第一部分 低剂量α粒子或X射线在NL20细胞中造成的DNA损伤及其修复第19-35页
    材料第19-21页
        一、实验细胞第19页
        二、主要器材第19-20页
        三、主要试剂第20-21页
    方法第21-25页
        1 细胞培养、传代、冻存和复苏第21-22页
        2 辐照条件第22-23页
        3 53BP1免疫荧光实验检测NL20细胞经不同LET射线照射后其DNA损伤修复的情况第23-24页
        4 结晶紫实验检测ATM抑制剂Ku55933对NL20细胞增殖的影响第24-25页
        5 统计学方法第25页
    实验结果第25-33页
        1 NL20细胞受α粒子、X射线单次照射后其DNA损伤修复的情况第25-27页
        2 NL20细胞接受α粒子、X射线分次照射后其DNA损伤修复的情况第27-29页
        3 结晶紫实验检测ATM抑制剂Ku55933对NL20细胞增殖的影响第29页
        4 Ku55933预处理对单次及分次α粒子照射NL20细胞后其DNA损伤修复的影响第29-31页
        5 Ku55933预处理对单次X射线照射NL20细胞后其DNA损伤修复的影响第31-33页
    讨论第33-35页
第二部分 单次低剂量铁离子照射在支气管上皮细胞中导致的长期生物学效应第35-48页
    材料第35-36页
    方法第36-38页
        1 细胞培养和辐照第36页
        2 微核形成实验第36-37页
        3 细胞增殖实验第37页
        4 流式细胞术检测细胞周期分布第37页
        5 细胞内ROS水平测定第37页
        6 Western Blot检测细胞中SOD1、SOD2表达水平第37-38页
        7 软琼脂克隆实验评估细胞转化第38页
        8 统计学方法第38页
    实验结果第38-46页
        1 接受铁离子照射NL20的子代细胞的微核形成率第38-40页
        2 受铁离子照射NL20细胞的子代细胞的增殖速度第40-41页
        3 受铁离子照射NL20细胞的子代细胞的周期分布第41-43页
        4 受铁离子照射NL20细胞的子代细胞的胞内活性氧(ROS)水平第43页
        5 受铁离子照射NL20细胞的子代细胞的SOD1、SOD2表达水平第43-44页
        6 受铁离子照射NL20细胞的子代细胞的细胞转化第44-46页
    讨论第46-48页
第三部分 受单次低剂量铁离子照射后发生转化的NL20子代细胞辐射敏感性改变第48-56页
    材料第48-49页
    方法第49-50页
        1 细胞辐照第49页
        2 铁离子照射NL20后其子代细胞发生细胞转化第49页
        3 微核形成实验第49页
        4 流式细胞仪检测细胞周期分布第49页
        5 Western Blot检测细胞中Reprimo表达水平第49-50页
        6 统计学方法第50页
    实验结果第50-54页
        1 受铁离子照射NL20细胞的41代子代细胞的细胞转化第50-51页
        2 受铁离子照射NL20细胞的子代细胞克隆再次受X射线照射后的微核形成率第51-52页
        3 受铁离子照射NL20细胞的子代细胞克隆再次受X射线照射后的周期分布第52-54页
        4 受铁离子照射NL20细胞的子代细胞克隆细胞中Reprimo的表达水平第54页
    讨论第54-56页
第四部分 Reprimo对H460细胞辐射敏感性的影响第56-68页
    材料第56-57页
        一、实验细胞第56页
        二、实验器材和试剂第56-57页
    方法第57-62页
        1 质粒转化、扩增和提取第57-59页
        2 细胞稳定转染第59-60页
        3 转染质粒的H460细胞总RNA的提取第60页
        4 cDNA的合成第60页
        5 Real-time PCR检测旁效应细胞Reprimo的表达第60-61页
        6 微核形成实验第61页
        7 克隆形成实验第61页
        8 流式细胞仪检测细胞周期第61-62页
        9 统计学方法第62页
    结果第62-66页
        1 H460细胞过表达Reprimo后的RT-PCR验证第62-63页
        2 过表达Reprimo的H460细胞受照后的微核形成率第63页
        3 过表达Reprimo的H460细胞受照后的存活分数第63-64页
        4 过表达Reprimo的H460细胞受照后的细胞周期分布第64-66页
    讨论第66-68页
结论第68-69页
参考文献第69-75页
综述第75-83页
    参考文献第79-83页
攻读学位期间本人出版或公开发表的论文第83-84页
缩略词表第84-85页
致谢第85-87页

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