摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
缩略语表 | 第9-10页 |
1 前言 | 第10-23页 |
1.1 研究背景 | 第10页 |
1.2 小麦遗传转化的主要方法 | 第10-13页 |
1.2.1 基因枪法 | 第11页 |
1.2.2 农杆菌介导法 | 第11-12页 |
1.2.3 花粉管通道法 | 第12-13页 |
1.2.4 其它遗传转化方法 | 第13页 |
1.3 小麦农杆菌转化研究进展 | 第13-18页 |
1.3.1 小麦农杆菌转化的发展历程 | 第13-14页 |
1.3.2 影响农杆菌介导的小麦转化效率的主要因素 | 第14-17页 |
1.3.3 小麦农杆菌转化中存在的主要问题 | 第17-18页 |
1.4 选择标记基因在小麦转化上的应用 | 第18-21页 |
1.4.1 以bar为选择标记基因的小麦转基因研究进展 | 第18-19页 |
1.4.2 以pmi为选择标记基因的转基因研究进展 | 第19-21页 |
1.5 研究的目的和意义 | 第21-23页 |
2 载体的构建及农杆菌的制备 | 第23-30页 |
2.1 材料与方法 | 第23-26页 |
2.1.1 实验材料 | 第23-24页 |
2.1.2 实验方法 | 第24-26页 |
2.2 结果与分析 | 第26-28页 |
2.2.1 转化载体的构建 | 第26-27页 |
2.2.2 菌体PCR鉴定农杆菌转化子 | 第27-28页 |
2.3 讨论 | 第28-30页 |
3 以bar为选择标记基因,将抗赤霉病基因导入小麦 | 第30-47页 |
3.1 材料与方法 | 第30-36页 |
3.1.1 实验材料 | 第30-31页 |
3.1.2 培养基和主要试剂配制 | 第31-32页 |
3.1.3 实验方法 | 第32-36页 |
3.1.4 结果统计 | 第36页 |
3.2 结果与分析 | 第36-44页 |
3.2.1 小麦转化植株的获得 | 第36-39页 |
3.2.3 不同预培养时间对转化的影响 | 第39-40页 |
3.2.4 高渗处理对转化的影响 | 第40-41页 |
3.2.5 PPT抗性检测转基因植株 | 第41页 |
3.2.6 PCR鉴定转基因植株 | 第41-43页 |
3.2.7 Southern杂交鉴定转基因植株 | 第43-44页 |
3.3 讨论 | 第44-47页 |
3.3.1 农杆菌介导的小麦转化体系的研究 | 第44-45页 |
3.3.2 外源基因在转基因小麦中的整合及遗传 | 第45-47页 |
4 以pmi为选择标记基因的小麦农杆菌转化 | 第47-55页 |
4.1 材料与方法 | 第47-50页 |
4.1.1 实验材料 | 第47页 |
4.1.2 培养基和主要试剂配制 | 第47-48页 |
4.1.3 实验方法 | 第48-49页 |
4.1.4 结果统计 | 第49-50页 |
4.2 结果与分析 | 第50-54页 |
4.2.1 BAR/PPT和PMI/甘露糖筛选体系的比较 | 第50-53页 |
4.2.2 CPR鉴定转基因植株 | 第53页 |
4.2.3 PCR鉴定转基因植株 | 第53-54页 |
4.3 讨论 | 第54-55页 |
4.3.1 小麦遗传转化中筛选标记基因的选择 | 第54-55页 |
4.3.2 PMI/甘露糖筛选体系的优化 | 第55页 |
5 结论 | 第55-57页 |
参考文献 | 第57-65页 |
致谢 | 第65页 |