| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 缩略词 | 第9-10页 |
| 1 绪论 | 第10-18页 |
| 1.1 引言 | 第10-11页 |
| 1.2 研究背景 | 第11-16页 |
| 1.2.1 绿僵菌研究背景 | 第11-12页 |
| 1.2.2 酵母中 Crz1 基因研究背景 | 第12-14页 |
| 1.2.4 Crz1 在其他致病真菌中研究背景 | 第14-15页 |
| 1.2.5 钙调磷酸酶研究背景 | 第15页 |
| 1.2.7 基因敲除技术 | 第15-16页 |
| 1.3 研究目的 | 第16页 |
| 1.4 研究内容 | 第16-17页 |
| 1.4.1 MaCrz1 敲除载体和回复载体的构建 | 第16页 |
| 1.4.2 MaCrz1 的功能分析 | 第16-17页 |
| 1.5 技术路线 | 第17页 |
| 1.6 本研究创新之处 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-32页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-21页 |
| 2.1.1 供试菌株和昆虫 | 第18页 |
| 2.1.2 主要培养基 | 第18-19页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第19页 |
| 2.1.4 主要实验设备 | 第19-20页 |
| 2.1.5 主要实验溶液的配置 | 第20-21页 |
| 2.1.6 主要使用软件 | 第21页 |
| 2.2 主要的研究方法 | 第21-32页 |
| 2.2.1 大肠杆菌转化 | 第21-22页 |
| 2.2.2 农杆菌感受态的制备、转化 | 第22-23页 |
| 2.2.3 农杆菌介导的绿僵菌的转化 | 第23页 |
| 2.2.4 MaCrz1 生物信息学的分析 | 第23页 |
| 2.2.5 MaCrz1 敲除载体和回复载体的构建 | 第23-24页 |
| 2.2.6 少量真菌基因组的快速提取 | 第24页 |
| 2.2.7 MaCrz1 的敲除转化子的筛选和 PCR 验证 | 第24-26页 |
| 2.2.8 大量绿僵菌基因组的提取 | 第26-27页 |
| 2.2.9 Southern blot 检测敲除转化子 | 第27-29页 |
| 2.2.10 MaCrz1 回复转化子的筛选 | 第29-30页 |
| 2.2.11 表型分析 | 第30页 |
| 2.2.12 毒力测定 | 第30-31页 |
| 2.2.13 菌株在蝗虫翅膀附着胞形成的观察 | 第31页 |
| 2.2.14 对绿僵菌细胞壁成分进行染色分析 | 第31-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-44页 |
| 3.1 MACRZ1 基因生物信息学分析 | 第32-34页 |
| 3.2 MACRZ1 敲除与回复载体的构建与筛选 | 第34-35页 |
| 3.3 MACRZ1 影响绿僵菌对钙离子的敏感性 | 第35-36页 |
| 3.4 MACRZ1 影响绿僵菌抗逆性及抗氧化能力 | 第36-37页 |
| 3.5 MACRZ1 不影响绿僵菌的萌发 | 第37页 |
| 3.6 MACRZ1 影响绿僵菌的抗紫外能力 | 第37-38页 |
| 3.7 MACRZ1 不影响绿僵菌的抗湿热能力 | 第38-39页 |
| 3.8 MACRZ1 影响绿僵菌的毒力 | 第39-40页 |
| 3.9 MACRZ1 对于绿僵菌菌丝的影响 | 第40-41页 |
| 3.10 MACRZ1 影响绿僵菌附着胞的形成 | 第41-42页 |
| 3.11 MACRZ1 影响绿僵菌细胞壁的成分 | 第42-44页 |
| 4 讨论 | 第44-46页 |
| 5 结论及后续工作 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-51页 |
