| 中文摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 前言 | 第8-12页 |
| 课题的提出 | 第12-13页 |
| 第一部分 重组人组织因子途径抑制因子在巴斯德毕赤酵母中的表达 | 第13-27页 |
| 1. 试剂、耗材和仪器 | 第13-14页 |
| ·试剂及耗材 | 第13-14页 |
| ·仪器 | 第14页 |
| 2. 主要试剂的配制 | 第14-20页 |
| ·培养基配制 | 第14-17页 |
| ·缓冲液的配制 | 第17-20页 |
| ·SDS-PAGE胶及缓冲液配制 | 第17-19页 |
| ·Western Blot缓冲液配置 | 第19-20页 |
| 3. 实验方法 | 第20-22页 |
| ·摇瓶中表达重组人组织因子途径抑制因子 | 第20-21页 |
| ·发酵罐中高密度表达重组人组织因子途径抑制因子 | 第21-22页 |
| 4. 结果与讨论 | 第22-26页 |
| ·不同时间菌体生长OD_(600)值重组TFPI表达量及TFPI对FXa的抑制率 | 第22页 |
| ·SDS-PAGE电泳结果 | 第22-24页 |
| ·VVestern-Blet鉴定重组TFPI结果 | 第24-26页 |
| 5. 本章小结 | 第26-27页 |
| 第二部分 重组人组织因子途径抑制因子的纯化 | 第27-41页 |
| 1. 试剂、耗材和仪器 | 第27-29页 |
| ·试剂及耗材 | 第27-28页 |
| ·仪器 | 第28-29页 |
| 2. 主要试剂的配制 | 第29-36页 |
| ·培养基配制 | 第29-31页 |
| ·缓冲液的配制 | 第31-36页 |
| ·SDS-PAGE胶及缓冲液配制 | 第31-34页 |
| ·Western Blot缓冲液配置 | 第34-36页 |
| 3. 实验方法 | 第36-38页 |
| ·超滤 | 第36页 |
| ·离子交换层析 | 第36-37页 |
| ·凝胶过滤层析 | 第37-38页 |
| 4. 结果及讨论 | 第38-40页 |
| ·纯化重组TFPI SDS-PAGE结果 | 第38页 |
| ·纯化各阶段重组TFPI得率、纯度及对FXa的抑制率 | 第38-40页 |
| 5. 本章小结 | 第40-41页 |
| 第三部分 重组TFPI抗血清的制备 | 第41-45页 |
| 1. 试剂、耗材和仪器 | 第41页 |
| ·试剂及耗材 | 第41页 |
| ·仪器 | 第41页 |
| 2. 主要试剂的配制 | 第41-42页 |
| 3. 实验方法 | 第42-43页 |
| ·免疫动物 | 第42页 |
| ·抗体效价的检测 | 第42-43页 |
| 4. 结果与讨论 | 第43-44页 |
| ·抗重组TFPI抗体效价的检测 | 第43-44页 |
| 5. 本章小结 | 第44-45页 |
| 全文总结 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-49页 |
| 附录 | 第49-57页 |
| 1. BCA法定量总蛋白浓度 | 第49-50页 |
| 2. ELISA定量检测发酵液上清中重组TFPI含量 | 第50-52页 |
| 3. ELISA鉴定 | 第52页 |
| 4. SDS-PAGE电泳 | 第52-53页 |
| 5. 半干法电转 | 第53-54页 |
| 6. TFPI活性检测 | 第54-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
