| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 文献综述 | 第10-18页 |
| 1.1 转录因子概述 | 第10-11页 |
| 1.2 bHLH转录因子研究进展 | 第11-16页 |
| 1.2.1 bHLH转录因子的结构特点 | 第12-13页 |
| 1.2.2 bHLH转录因子的分类 | 第13页 |
| 1.2.3 植物bHLH转录因子的生物学功能 | 第13-16页 |
| 1.3 bHLH转录因子PTF1的研究状况 | 第16-17页 |
| 1.4 研究的目的和意义 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-33页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-20页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第18页 |
| 2.1.2 菌株和载体 | 第18页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第18页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第18-19页 |
| 2.1.5 培养基和药品配制 | 第19-20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-33页 |
| 2.2.1 ZmPTF1基因的生物信息学分析 | 第20-21页 |
| 2.2.2 ZmPTF1原核表达载体PCR检测及酶切鉴定 | 第21-22页 |
| 2.2.3 PET32a-ZmPTF1质粒转化原核表达菌BL21 | 第22页 |
| 2.2.4 ZmPTF1蛋白的表达与纯化 | 第22-24页 |
| 2.2.5 转录因子ZmPTF1靶基因的初步筛选 | 第24-26页 |
| 2.2.6 PCAMBIA3301-ZmPTF1植物表达载体的构建 | 第26-29页 |
| 2.2.7 农杆菌介导烟草转化及转基因植株的获得 | 第29-30页 |
| 2.2.8 转基因烟草分子鉴定 | 第30-32页 |
| 2.2.9 ZmPTFl基因功能验证 | 第32-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-49页 |
| 3.1 生物信息学分析 | 第33-35页 |
| 3.1.1 ZmPTF1启动子的顺式元件分析 | 第33-34页 |
| 3.1.2 ZmTFl蛋白质信息分析 | 第34-35页 |
| 3.2 ZmPTF1蛋白原核表达 | 第35-38页 |
| 3.2.1 原核表达载体的检测 | 第35-36页 |
| 3.2.2 PET-32a-ZmPTF1表达载体转化BL21菌株鉴定 | 第36-37页 |
| 3.2.3 IPTG诱导目的蛋白表达 | 第37-38页 |
| 3.3 转录因子ZMPTF1靶基因的初步筛选结果 | 第38-40页 |
| 3.3.1 靶基因信息 | 第40页 |
| 3.4 植物表达载体的构建 | 第40-42页 |
| 3.5 PCAMBIA3301-ZMPTF1植物表达载体转化农杆菌 | 第42-43页 |
| 3.6 农杆菌介导烟草转化 | 第43页 |
| 3.7 转基因烟草植株分子鉴定 | 第43-45页 |
| 3.8 ZMPTF1基因功能验证 | 第45-49页 |
| 3.8.1 转基因烟草种子发芽实验 | 第45-46页 |
| 3.8.2 脱落酸抑制种子萌发实验 | 第46-48页 |
| 3.8.3 α-淀粉酶活的测定 | 第48-49页 |
| 4 讨论 | 第49-51页 |
| 4.1 ZMPTF1启动子的顺式元件分析 | 第49页 |
| 4.2 原核表达分析 | 第49页 |
| 4.3 靶基因的初步筛选 | 第49-50页 |
| 4.4 ZMPTF1基因在烟草中的功能验证 | 第50-51页 |
| 5 结论 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
