| 摘要 | 第2-3页 |
| Abstract | 第3-4页 |
| 引言 | 第7-9页 |
| 材料与方法 | 第9-25页 |
| 1 仪器、试剂和耗材 | 第9-10页 |
| 1.1 主要仪器 | 第9页 |
| 1.2 主要试剂和耗材 | 第9-10页 |
| 2 基因测序 | 第10-11页 |
| 2.1 人外周血基因组DNA提取 | 第10页 |
| 2.2 一代测序 | 第10-11页 |
| 2.3 二代测序 | 第11页 |
| 3 人体内实验 | 第11-14页 |
| 3.1 体内实验LPL基因突变对酶浓度影响 | 第11-12页 |
| 3.2 体内实验LPL基因突变对酶活性影响 | 第12页 |
| 3.3 体内实验LPL基因突变对二聚体影响 | 第12-14页 |
| 4 细胞系的获取及培养方法 | 第14页 |
| 5 LPL-wt&LPL-mut慢病毒构建 | 第14-20页 |
| 5.1 LPL-wt载体构建 | 第14-16页 |
| 5.2 LPL-310 载体构建 | 第16-19页 |
| 5.3 LPL-396 载体构建 | 第19页 |
| 5.4 LPL-310396 载体构建 | 第19页 |
| 5.5 慢病毒包装及滴度测定 | 第19-20页 |
| 6 慢病毒转染目的细胞 | 第20-21页 |
| 6.1 慢病毒载体转染目的细胞预实验 | 第20-21页 |
| 6.2 慢病毒载体转染目的细胞正式实验 | 第21页 |
| 7 筛选稳定转染细胞 | 第21页 |
| 7.1 嘌呤霉素筛选浓度确定 | 第21页 |
| 7.2 稳定转染细胞的筛选 | 第21页 |
| 8 细胞学实验 | 第21-24页 |
| 8.1 Real-time qPCR检测LPL在细胞中的表达 | 第21-23页 |
| 8.2 LPL基因突变对细胞增殖能力的影响 | 第23页 |
| 8.3 体外实验LPL基因突变对酶活性、浓度影响 | 第23-24页 |
| 9 统计学分析 | 第24-25页 |
| 结果 | 第25-37页 |
| 1 患者病史简介及检查结果 | 第25-26页 |
| 2 一代测序结果与家系图 | 第26-28页 |
| 3 体内实验LPL基因突变对酶浓度影响 | 第28-29页 |
| 4 体内实验LPL基因突变对酶活性影响 | 第29页 |
| 5 体内实验LPL基因突变对二聚体影响 | 第29-30页 |
| 6 慢病毒构建结果 | 第30-31页 |
| 7 慢病毒滴度测定 | 第31-33页 |
| 8 MOI值的确定 | 第33页 |
| 9 体外实验LPL基因突变对基因转录水平影响 | 第33-34页 |
| 10 体外实验LPL基因突变对细胞增殖能力的影响 | 第34-35页 |
| 11 体外实验LPL基因突变对酶活性、浓度影响 | 第35-37页 |
| 讨论 | 第37-40页 |
| 结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-43页 |
| 综述 | 第43-53页 |
| 综述参考文献 | 第49-53页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |