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尿酸盐晶体通过内质网应激对成骨前体细胞生长及其分化的影响

摘要第2-4页
Abstract第4-5页
引言第8-10页
实验材料第10-12页
    1 实验细胞第10页
    2 主要仪器第10-11页
    3 试剂与药品第11-12页
实验方法第12-18页
    1 MSU晶体的配置第12页
    2 成骨前体细胞 3T3-E1的复苏、传代、培养、冻存及诱导第12-13页
    3 MTT法检测MSU对成骨前体细胞 3T3-E1增殖的影响第13页
    4 碱性磷酸酶、茜素红染色观察成骨前体细胞向成骨的分化情况第13-14页
    5 RT-PCR检测Runx2、Osterix、Collal I、Osteocalcin、Bip、CHOP、ATF4的mRNA相对表达量第14-15页
        5.1 总RNA的提取第14页
        5.2 cDNA的合成第14页
        5.3 RT- PCR检测mRNA表达水平第14-15页
    6 Western Blot检测Bip、CHOP、ATF4、eIF2α 蛋白的表达量第15-17页
        6.1 试剂配制第15-16页
        6.2 蛋白样品的制备第16页
        6.3 配置SDS-PAGE凝胶第16页
        6.4 SDS-PAGE凝胶电泳第16页
        6.5 半干法转膜第16页
        6.6 封闭第16页
        6.7 孵育抗体第16-17页
        6.8 显色第17页
    7 统计学分析第17-18页
实验结果第18-24页
    1 显微镜下尿酸盐晶体(MSU)的形态第18-19页
    2 不同浓度的尿酸盐晶体能够抑制成骨前体细胞 3T3-E1的增殖第19-20页
    3 碱性磷酸酶、茜素红染色显示不同浓度的尿酸盐晶体能够抑制成骨前体细3T3-E1向成骨细胞的分化第20-21页
    4 mRNA水平显示:不同浓度的尿酸盐晶体(MSU)能够抑制调控成骨前体细胞 3T3-E1向成骨细胞分化的基因runt related transcription factor 2(Runx2), Osterix的表达及分泌Collal I、Osteocalcin的功能第21-22页
    5 mRNA和蛋白水平显示不同浓度的尿酸盐晶体(MSU)在作用于成骨前体细 3T3-E1增殖分化的过程中,激活Bip、CHOP的表达、降低ATF4、e IF2α 的表达第22-24页
讨论第24-26页
结论第26-27页
参考文献第27-31页
综述第31-45页
    综述参考文献第38-45页
攻读学位期间的研究成果第45-46页
缩略词表(附录)第46-47页
致谢第47-48页

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