前言 | 第7-12页 |
第一章 比较人源肝癌细胞系HepG2、Hep3B、SMMC-7721中Nrf2的分布及辐射敏感性 | 第12-27页 |
1.1 实验材料 | 第12-18页 |
1.1.1 细胞株 | 第12页 |
1.1.2 主要试剂及设备 | 第12-17页 |
1.1.4 主要仪器设备 | 第17-18页 |
1.2 试验方法 | 第18-22页 |
1.2.1 操作前准备 | 第18-19页 |
1.2.2 传代方法 | 第19页 |
1.2.3 细胞冻存 | 第19-20页 |
1.2.4 冻存细胞的复苏 | 第20页 |
1.2.5 人肝癌细胞HepG2的照射条件 | 第20页 |
1.2.6 Western Blot法检测HepG2、Hep3B、SMMC-7721细胞照射前和照后的总蛋白及细胞核蛋白中Nrf2表达水平 | 第20-21页 |
1.2.7 MTT法检测HepG2、Hep3B、SMMC-7721细胞对辐射的敏感性 | 第21-22页 |
1.3 实验结果 | 第22-25页 |
1.3.1 LGK-974的性质及配置(来自Selleck公司) | 第22-23页 |
1.3.2 Western Blot实验检测HepG2、Hep3B、SMMC-7721细胞照射前后Nrf2的表达变化 | 第23-25页 |
1.4 讨论 | 第25-27页 |
第二章 LGK-974对HepG2细胞辐射敏感性的影响 | 第27-37页 |
2.1 实验材料 | 第27-29页 |
2.1.1 细胞株 | 第27页 |
2.1.2 主要试剂 | 第27-29页 |
2.2 试验方法 | 第29-31页 |
2.2.1 绘制细胞生长曲线说明LGK-974和IR对HepG2细胞生长的影响 | 第29-30页 |
2.2.2 流式细胞仪检测LGK-974和IR对HepG2细胞凋亡的影响 | 第30-31页 |
2.2.3 克隆形成实验检测LGK-974对HepG2细胞的辐射增敏性 | 第31页 |
2.3 研究结果 | 第31-36页 |
2.3.1 以DMSO溶剂做对照实验 | 第31-32页 |
2.3.2 绘制LGK-974和IR作用与HepG2细胞的生长曲线图 | 第32-33页 |
2.3.3 流式试验检测LGK-974、IR作用下HepG2细胞凋亡情况 | 第33-34页 |
2.3.4 克隆形成试验检测LGK-974对HepG2细胞的辐射增敏作用 | 第34-36页 |
2.4 讨论 | 第36-37页 |
第三章 LGK-974对照射后Nrf2在HepG2细胞中的分布的影响 | 第37-47页 |
3.1 实验材料 | 第37-38页 |
3.1.1 细胞株 | 第37页 |
3.1.2 主要试剂 | 第37页 |
3.1.3 细胞培养用品 | 第37-38页 |
3.2 试验方法 | 第38-40页 |
3.2.1 Western Blot法检测LGK-974及IR对HepG2细胞中Wnt及Nrf2信号通路的影响 | 第38页 |
3.2.2 逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测LGK-974对Nrf2、HO-1和NQO-1基因转录水平的影响 | 第38-39页 |
3.2.3 免疫荧光实验检测Nrf2在HepG2细胞中的分布 | 第39-40页 |
3.3 实验结果 | 第40-45页 |
3.3.1 LGK-974及IR对HepG2细胞中Wnt和Nrf2信号通路相关蛋白表达的影响 | 第41-43页 |
3.3.2 LGK-974对HepG2细胞受照后Nrf2、HO-1和NQO-1转录水平的影响 | 第43-44页 |
3.3.3 LGK-974对HepG2细胞受照后Nrf2蛋白分布的影响 | 第44-45页 |
3.4 讨论 | 第45-47页 |
第四章 LGK-974及IR对HepG2细胞中的ROS水平和DNA损伤程度的影响 | 第47-54页 |
4.1 实验材料 | 第47-48页 |
4.1.1 细胞株 | 第47页 |
4.1.2 主要试剂 | 第47-48页 |
4.2 试验方法 | 第48-50页 |
4.2.1 流式细胞仪检测HepG2细胞中的ROS | 第48-49页 |
4.2.2 单细胞凝胶电泳(彗星实验)检测HepG2细胞中DNA损伤 | 第49-50页 |
4.3 实验结果 | 第50-52页 |
4.3.1 LGK-974对HepG2细胞受照后ROS的影响 | 第50-52页 |
4.3.2 电离辐射及LGK-974对HepG2细胞DNA的影响 | 第52页 |
4.4 讨论 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-58页 |
缩略词表 | 第58-59页 |
在读期间第一作者发表的论文 | 第59-60页 |
致谢 | 第60-61页 |