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PRL-3调控PTEN经PI3K/Akt信号传导通路促胃癌腹膜转移

摘要第3-5页
abstract第5-7页
中英文缩略词表第11-13页
第1章 引言第13-17页
第2章 实验材料和方法第17-39页
    2.1 实验材料、试剂、仪器第17-21页
        2.1.1 组织标本第17页
        2.1.2 细胞株第17页
        2.1.3 抗体第17页
        2.1.4 实验主要试剂第17-19页
        2.1.5 实验主要仪器第19-20页
        2.1.6 实验主要溶液的配制第20-21页
    2.2 实验方法与步骤第21-39页
        2.2.1 细胞培养第21页
        2.2.2 细胞的复苏第21-22页
        2.2.3 细胞的换液、传代与冻存第22-23页
        2.2.4 细胞的接种和培养第23页
        2.2.5 细胞或者组织总蛋白的制备第23-24页
        2.2.6 总蛋白浓度的测定(BCA法)第24页
        2.2.7 SDS-PAGE蛋白凝胶电泳第24-28页
        2.2.9 磷酸酶活性检测第28页
        2.2.10 Real-time PCR检测目的基因的表达第28-31页
        2.2.11 构建突变型和野生型PRL-3 质粒第31页
        2.2.12 构建PRL-3 高表达和低表达质粒第31-32页
        2.2.13 PTEN低表达shRNA的构建第32-33页
        2.2.14 质粒小量抽提第33-34页
        2.2.15 质粒中量抽提第34-35页
        2.2.16 质粒转染第35-36页
        2.2.17 Transwell细胞迁移实验第36-37页
        2.2.18 Transwell细胞侵袭实验第37-39页
第3章 结果第39-49页
    3.1 胃癌组织和正常胃黏膜组织中PRL-3 与PTEN表达关系第39-40页
        3.1.1 组织中PRL-3 表达关系第39-40页
        3.1.2 组织中PTEN与p-PTEN表达关系第40页
        3.1.3 PRL-3 磷酸酶活性检测第40页
    3.2 正常胃黏膜上皮细胞株与不同胃癌细胞株中PRL-3 与PTEN表达关系第40-42页
        3.2.1 不同细胞株中PRL-3 表达关系第40-42页
        3.2.2 不同细胞株中PTEN和p-PTEN表达关系第42页
        3.2.3 不同细胞株中PRL-3 磷酸酶活性变化第42页
    3.3 PRL-3 磷酸酶活性对胃癌细胞PTEN、p-PTEN表达及侵袭、转移的影响第42-45页
        3.3.1 突变型与野生型PRL-3 表达及磷酸酶活性检测第42-43页
        3.3.2 突变型、野生型PRL-3 对PTEN、p-PTEN表达的影响第43-44页
        3.3.3 突变型、野生型PRL-3 对细胞侵袭、转移能力的影响第44-45页
    3.4 PRL-3 对基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9 表达及对细胞侵袭、转移能力的影响第45页
        3.4.1 PRL-3 高表达细胞株及PRL-3 低表达细胞株构建及鉴定第45页
        3.4.2 PRL-3 表达水平对基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9 表达的影响第45页
        3.4.3 PRL-3 表达水平对细胞侵袭、转移能力的影响第45页
    3.5 PI3K/Akt信号传导通路可能参与了PRL-3 调控胃癌侵袭、转移的过程第45-47页
    3.6 PRL-3 可能通过调控PTEN影响PI3K/Akt信号通路影响胃癌细胞侵袭、转移第47-49页
        3.6.1 构建PTEN siRNA质粒,转染PRL-3 稳定低表达细胞株第48页
        3.6.2 PTEN可能参与了PRL-3 调控PI3K/Akt信号通路的过程中第48页
        3.6.3 PTEN可能参与了PRL-3 调控胃癌细胞侵袭、转移过程第48-49页
第4章 讨论第49-54页
第5章 结论第54-55页
致谢第55-57页
参考文献第57-64页
攻读学位期间的研究成果第64-65页
综述第65-77页
    参考文献第71-77页

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