| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 英文缩略语表 | 第10-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-17页 |
| ·侵袭性念珠菌感染和诊断 | 第12-13页 |
| ·侵袭性念珠菌感染 | 第12页 |
| ·侵袭性念珠菌感染的诊断 | 第12-13页 |
| ·白念珠菌烯醇化酶 | 第13-17页 |
| ·烯醇化酶 | 第13-14页 |
| ·白念珠菌烯醇化酶 | 第14页 |
| ·同源序列比对 | 第14-15页 |
| ·在IC诊断中的应用 | 第15页 |
| ·重组白念珠菌烯醇化酶 | 第15-17页 |
| 第二章 白念珠菌烯醇化酶的克隆及重组蛋白的表达、纯化和鉴定 | 第17-34页 |
| ·实验材料 | 第17-22页 |
| ·PCR引物设计与合成 | 第17页 |
| ·分子克隆相关试剂 | 第17-18页 |
| ·菌株及表达载体 | 第18页 |
| ·病人血清 | 第18页 |
| ·主要溶液配制 | 第18-21页 |
| ·主要仪器 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-26页 |
| ·白念珠菌烯醇化酶全长基因的获得 | 第22-23页 |
| ·表达载体的构建 | 第23-25页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第25页 |
| ·诱导表达重组融合蛋白 | 第25页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第25-26页 |
| ·重组蛋白定量及抗原性鉴定 | 第26页 |
| ·结果 | 第26-32页 |
| ·白念珠菌ENO1全长基因的PCR扩增 | 第26-27页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第27-28页 |
| ·重组克隆的筛选和鉴定 | 第28页 |
| ·表达产物鉴定 | 第28-30页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第30-31页 |
| ·蛋白表达量计算 | 第31页 |
| ·重组蛋白抗原性鉴定 | 第31-32页 |
| ·讨论 | 第32-34页 |
| 第三章:白念珠菌烯醇化酶多克隆抗体的制备及鉴定 | 第34-38页 |
| ·实验材料 | 第34页 |
| ·主要实验仪器及试剂 | 第34页 |
| ·实验动物 | 第34页 |
| ·实验方法 | 第34-36页 |
| ·家兔多抗血清的制备 | 第34-35页 |
| ·山羊的多抗血清的制备 | 第35页 |
| ·免疫血清鉴定 | 第35-36页 |
| ·结果 | 第36-37页 |
| ·效价测定 | 第36页 |
| ·双向免疫扩散 | 第36-37页 |
| ·Western Blot分析 | 第37页 |
| ·讨论 | 第37-38页 |
| 第四章:白念珠菌烯醇化酶N端ENO1-319P肽段的原核表达及应用研究 | 第38-56页 |
| ·实验材料 | 第38-39页 |
| ·菌株、载体及相关酶 | 第38页 |
| ·主要试剂配制 | 第38-39页 |
| ·血清标本 | 第39页 |
| ·实验方法 | 第39-45页 |
| ·念珠菌属及人的烯醇化酶的序列比对分析 | 第39页 |
| ·引物的设计与合成 | 第39-42页 |
| ·PCR扩增目的片段 | 第42页 |
| ·表达载体的构建 | 第42-44页 |
| ·重组肽段的诱导表达和鉴定 | 第44页 |
| ·重组肽段的可溶性分析 | 第44页 |
| ·包涵体的纯化和复性 | 第44-45页 |
| ·重组肽段抗原性鉴定 | 第45页 |
| ·检测抗ENO1-319P肽段IgG抗体ELISA法的建立 | 第45页 |
| ·结果 | 第45-54页 |
| ·编码ENO1-319P基因的PCR扩增 | 第45页 |
| ·表达载体ENO1-319P/pET-28a的构建和鉴定 | 第45-47页 |
| ·诱导表达产物鉴定 | 第47-48页 |
| ·重组肽段的可溶性分析 | 第48页 |
| ·包涵体的的纯化和复性 | 第48页 |
| ·重组蛋白抗原性鉴定 | 第48-50页 |
| ·ELISA法检测抗ENO1-319P肽段IgG抗体结果 | 第50-54页 |
| ·讨论 | 第54-56页 |
| 第五章 主要结论 | 第56-57页 |
| 附录A 白念珠菌ENO1序列 | 第57-59页 |
| 附录B 重症患者侵袭性真菌感染诊断标准 | 第59-63页 |
| 参考文献 | 第63-68页 |
| 研究生期间论文发表及参加会议情况 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
