| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-25页 |
| 1 二化螟的发生与危害 | 第11-12页 |
| 2 转基因抗虫水稻 | 第12-14页 |
| ·转Bt基因水稻 | 第12-13页 |
| ·转植物或动物来源抗虫基因水稻 | 第13-14页 |
| 3 苏云金芽孢杆菌 | 第14-19页 |
| ·苏云金芽孢杆菌概述 | 第14-15页 |
| ·Bt毒素的杀虫机理 | 第15-16页 |
| ·害虫对Bt的抗性机理 | 第16-19页 |
| 4 害虫对Bt蛋白的抗性检测方法 | 第19-22页 |
| 5 害虫对Bt作物抗性治理策略 | 第22-23页 |
| ·高剂量/庇护区 | 第23页 |
| ·多基因抗虫作物 | 第23页 |
| 6. 本研究的内容和意义 | 第23-25页 |
| 第二章 二化螟温州田间种群对Bt毒素Cry1Ab抗性等位基因频率的F_2检测 | 第25-39页 |
| 1 材料与方法 | 第26-27页 |
| ·实验材料 | 第26-27页 |
| ·生物测定方法(毒素涂表法) | 第27页 |
| 2 单雌系F_2代法检测田间抗性等位基因频率 | 第27-30页 |
| ·单雌系F_2代筛选法原理 | 第27-28页 |
| ·区分剂量的确定 | 第28页 |
| ·单雌系的建立 | 第28页 |
| ·F_1代饲养 | 第28-29页 |
| ·F_2代饲养 | 第29页 |
| ·F_2筛选 | 第29页 |
| ·抗性等位基因验证 | 第29页 |
| ·抗性等位基因频率值的计算方法 | 第29-30页 |
| 3 抗性品系的筛选 | 第30页 |
| ·实验材料 | 第30页 |
| ·生物测定方法(毒素涂表法) (同1.2) | 第30页 |
| ·二化螟对Cry1Ab毒素敏感毒力基线的建立 | 第30页 |
| ·抗性品系的筛选 | 第30页 |
| ·数据分析 | 第30页 |
| 4 结果和分析 | 第30-35页 |
| ·区分剂量的确定 | 第30-31页 |
| ·F_2筛选 | 第31-32页 |
| ·抗性验证 | 第32-33页 |
| ·抗性品系的筛选 | 第33-34页 |
| ·抗性等位基因频率 | 第34-35页 |
| 5 讨论 | 第35-39页 |
| 第三章 二化螟Bt毒素受体蛋白APN基因全长克隆、序列分析及mRNA表达量研究 | 第39-57页 |
| 1 材料和方法 | 第40-41页 |
| ·材料和试剂 | 第40页 |
| ·主要试剂 | 第40-41页 |
| ·仪器设备 | 第41页 |
| 2 二化螟APN基因的克隆 | 第41-44页 |
| ·总RNA的提取 | 第41页 |
| ·反转录 | 第41-42页 |
| ·基因克隆引物设计 | 第42-43页 |
| ·PCR产物的回收与纯化 | 第43页 |
| ·PCR纯化产物与质粒载体的连接 | 第43页 |
| ·转化和培养 | 第43页 |
| ·质粒DNA的提取(购于爱思进生物技术有限公司) | 第43-44页 |
| ·酶切反应 | 第44页 |
| ·目标片段检测(PCR鉴定) | 第44页 |
| ·序列分析与系统发育树的构建 | 第44页 |
| 3 二化螟氨肽酶N基因mRNA表达量的研究 | 第44-46页 |
| ·RNA的提取和cDNA第一链的合成 | 第44页 |
| ·引物设计 | 第44-45页 |
| ·反应体系和条件 | 第45页 |
| ·实时荧光定量PCR反应效率的确定 | 第45页 |
| ·数据分析 | 第45-46页 |
| 4 结果和分析 | 第46-55页 |
| ·二化螟氨肽酶N序列分析 | 第46-52页 |
| ·二化螟氨肽酶N基因相对表达量研究 | 第52-55页 |
| 5 讨论 | 第55-57页 |
| 全文总结 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-71页 |
| 致谢 | 第71页 |