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小麦赤霉病相关基因的克隆及其特征研究

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
缩略词表第11-12页
第一章 文献综述第12-28页
   ·禾谷镰刀菌与赤霉病第12-15页
     ·禾谷镰刀菌的分类及生物学特性第12-13页
     ·赤霉病的症状、侵染过程及危害第13页
     ·禾谷镰刀菌的致病机理第13-15页
   ·植物抗病防御的病理生理第15-20页
     ·植物抗病遗传基础和分子机制第16-17页
     ·植物细胞壁在抗病和感病中的作用第17-19页
     ·植物的基础免疫和NB-LRR第19-20页
   ·基因全长的克隆方法第20-23页
     ·3’RACE or 5'RACE(rapid amplification of cDNA ends),即cDNA末端快速扩增法第20-22页
     ·计算机杂交第22-23页
   ·蛋白质间的相互作用研究方法第23-27页
     ·双杂交技术第24-26页
     ·蛋白片段互补分析方法(protein-fragment complementationassay,PCA)第26-27页
   ·本研究的目的和意义第27-28页
第二章 材料与方法第28-42页
   ·实验材料第28-30页
     ·植物材料第28页
     ·菌株与质粒第28页
     ·酶与各种生化试剂第28页
     ·试验用的引物和寡核苷酸第28-30页
   ·试验方法第30-42页
     ·不同RNA的提取第30-31页
     ·RNA的纯化、cDNA第一链的合成第31-32页
     ·PCR扩增及电泳、胶回收、载体的构建第32-33页
     ·感受态细胞的制备、大肠杆菌的转化和质粒提取第33-35页
     ·酵母双杂交中常用方法第35-38页
     ·提取阳性克隆的酵母质粒并对文库插入片段测序第38-39页
     ·与诱饵互作基因全长的获得第39页
     ·生物信息学分析第39-40页
     ·载体的构建第40页
     ·酵母双杂交作用的进一步确认第40页
     ·半定量RT-PCR第40-42页
第三章 结果与分析第42-58页
   ·镰刀菌接种诱导后小麦穗部总RNA的完整性以及禾谷镰刀菌RNA的完整性第42-43页
     ·镰刀菌接种诱导后小麦穗部总RNA第42-43页
     ·禾谷镰刀菌总的RNA第43页
   ·镰刀菌木聚糖酶基因FGX对小麦文库的筛选第43-52页
     ·镰刀菌木聚糖酶基因的克隆及诱饵载体FGX-pGBKT7的构建第43-46页
     ·FGX-pGBKT7对小麦酵母表达cDNA文库的筛选第46-47页
     ·FGX-pGBKT7和W67、wl(Rubisco)全长基因互作的验证第47-48页
     ·wl(Rubisco)、67基因特征的研究第48-52页
   ·S16基因对小麦文库的筛选第52-58页
     ·小麦S16基因的克隆及诱饵载体S16-pGBKT7的构建第52页
     ·S16-pGBKT7对小麦酵母表达cDNA文库的筛选第52-53页
     ·S16-pGBKT7和S15全长基因互作的验证第53-54页
     ·S15基因特征的研究第54-56页
     ·S15基因的半定量RT-PCR分析第56-58页
第四章 讨论与结论第58-62页
   ·讨论第58-59页
     ·FGX在镰刀菌侵染植物时的作用第58页
     ·克隆基因的相关分析第58-59页
   ·结论第59-62页
参考文献第62-68页
附录:培养基、溶液的配制及载体图谱第68-72页
致谢第72页

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