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双重PCR和竞争性PCR检测马铃薯环腐病菌和黑胫病菌技术体系建立

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
1 引言第9-18页
   ·马铃薯环腐病的识别与诊断第9-14页
     ·环腐病的症状与病原形态第9-10页
     ·革兰氏染色法鉴定第10页
     ·生理生化反应鉴定第10-11页
     ·茄子接种鉴定法第11页
     ·血清学鉴定第11-12页
     ·分子生物学技术检测马铃薯环腐病菌第12-14页
   ·马铃薯黑胫病的识别与诊断第14-16页
     ·黑胫病的症状与病原形态第14页
     ·血清学鉴定第14-15页
     ·分子生物学技术检测马铃薯黑胫病菌第15-16页
   ·双重PCR 和竞争PCR 在植物病原菌检测中的应用第16-17页
     ·双重PCR 技术和竞争PCR 技术及其原理第16页
     ·双重PCR 和竞争PCR 技术在植物病原菌检测中的应用第16-17页
   ·本研究的目的和意义第17-18页
2 材料与方法第18-29页
   ·试验材料及仪器第18-21页
     ·供试菌株及来源第18-19页
     ·供试培养基及营养液第19页
     ·供试主要试剂第19-20页
     ·主要仪器设备第20页
     ·双重PCR 试验所用引物及出处第20页
     ·竞争性PCR 试验所用引物及出处第20-21页
   ·试验方法第21-29页
     ·供试菌株的分离、纯化、培养和保存第21-22页
     ·DNA 的提取第22-24页
     ·马铃薯苗的繁殖及其植株伤根接种第24页
     ·双重PCR 技术检测马铃薯环腐病菌和黑胫病菌第24-26页
     ·竞争性PCR 定量检测马铃薯黑胫病菌第26-29页
3 结果与分析第29-40页
   ·供试菌株的分离和纯化第29-31页
     ·马铃薯环腐病菌的分离和纯化第29页
     ·马铃薯黑胫病菌的分离、纯化和致病性测定第29-31页
     ·马铃薯田间土壤中细菌的分离、纯化和鉴定第31页
   ·双重PCR 技术检测马铃薯环腐病菌和黑胫病菌第31-35页
     ·引物CMS1/CMS2 特异性检测第31页
     ·引物CMS1/CMS2 灵敏性检测第31-32页
     ·双重PCR 反应体系的建立第32-35页
     ·双重PCR 检测环腐病菌和黑胫病菌侵染的薯块第35页
   ·竞争性PCR 定量检测马铃薯黑胫病菌第35-40页
     ·马铃薯黑胫病菌特异性DNA 序列的PCR 反应及其产物克隆测序第35-37页
     ·PCR 竞争性模板的制备和内参照菌的构建第37-38页
     ·无菌水稀释样品的竞争性定量PCR第38-39页
     ·模拟样品的竞争性定量PCR 检测第39-40页
4 讨论第40-44页
   ·马铃薯环腐病菌PCR 检测的研究第40页
   ·双重PCR 技术检测马铃薯环腐病菌和黑胫病菌的研究第40-41页
   ·竞争性PCR 定量检测马铃薯黑胫病菌的研究第41-44页
5 结论第44-45页
参考文献第45-51页
附录1 缩写词表第51-52页
在读期间发表的学术论文第52-53页
作者简介第53-54页
致谢第54-55页

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