| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 本文所用英文缩略词及中文对照 | 第7-10页 |
| 1 引言 | 第10-14页 |
| 1.1 棉花抗黄萎病相关研究进展 | 第10-11页 |
| 1.2 植物 CyP、DAHPS 和 CCoAOMT 基因研究进展 | 第11-12页 |
| 1.2.1 植物 CyP 基因研究进展 | 第11页 |
| 1.2.2 植物 DAHPS 基因研究进展 | 第11-12页 |
| 1.2.3 植物 CCoAOMT 基因研究进展 | 第12页 |
| 1.3 病毒诱导的基因沉默（VIGS）及其研究进展 | 第12-13页 |
| 1.4 课题研究目的与意义 | 第13-14页 |
| 2 材料和方法 | 第14-24页 |
| 2.1 材料和试剂 | 第14页 |
| 2.1.1 供试植物材料 | 第14页 |
| 2.1.2 试剂 | 第14页 |
| 2.1.3 载体和菌株 | 第14页 |
| 2.2 试验方法 | 第14-24页 |
| 2.2.1. 拟南芥的培育及接菌处理 | 第14-15页 |
| 2.2.2 拟南芥阳性植株的筛选及分子检测 | 第15-16页 |
| 2.2.3 转基因拟南芥功能验证 | 第16-18页 |
| 2.2.4 拟南芥 RNA 分离、纯化及检测 | 第18-19页 |
| 2.2.5 拟南芥 GhCyP、EDS1、NDR1、BAK1、EREBP、PR4、PR5 的时空表达分析 | 第19-20页 |
| 2.2.6 VIGS 载体的构建 | 第20-22页 |
| 2.2.7 农杆菌介导的 VIGS 转化棉花 | 第22页 |
| 2.2.8 棉花 RNA 分离、纯化及检测 | 第22-23页 |
| 2.2.9 棉花 GhCyP 的时空表达分析 | 第23页 |
| 2.2.10 基因沉默后棉花的功能验证 | 第23页 |
| 2.2.11 数据分析方法 | 第23-24页 |
| 3 结果与分析 | 第24-48页 |
| 3.1 转 GhCyP 拟南芥功能验证 | 第24-33页 |
| 3.1.1 转 GhCyP 基因拟南芥的鉴定 | 第24页 |
| 3.1.2 转基因拟南芥黄萎病抗性表现 | 第24-27页 |
| 3.1.3 转基因拟南芥病菌分离试验 | 第27-28页 |
| 3.1.4 转基因拟南芥体外抑菌试验 | 第28-29页 |
| 3.1.5 转基因拟南芥和野生型 PPIase 活性比较 | 第29-30页 |
| 3.1.6 GhCyP、EDS1、NDR1、BAK1、EREBP、PR4 及 PR5 基因的时空表达分析 | 第30-33页 |
| 3.2 棉花中 GhCyP 基因的功能研究 | 第33-38页 |
| 3.2.1 GhCyP 的 VIGS 载体构建 | 第33-34页 |
| 3.2.2 农杆菌介导的 VIGS 沉默棉花 GbCLA1 基因 | 第34页 |
| 3.2.3 农杆菌介导的 VIGS 沉默棉花 GhCyP 基因 | 第34-35页 |
| 3.2.4 棉花抗病性鉴定 | 第35-36页 |
| 3.2.5 棉花根系观察 | 第36页 |
| 3.2.6 棉花株高测量 | 第36-37页 |
| 3.2.7 物质积累量比较 | 第37-38页 |
| 3.3 转 GhDAHPS 拟南芥功能验证 | 第38-44页 |
| 3.3.1 转 GhDAHPS 基因拟南芥阳性植株检测 | 第38-39页 |
| 3.3.2 转基因拟南芥黄萎病抗性表现 | 第39-40页 |
| 3.3.3 转基因拟南芥黄萎病菌的分离 | 第40-41页 |
| 3.3.4 转基因拟南芥和野生型主根长度的比较 | 第41-42页 |
| 3.3.5 转基因拟南芥与野生型薹木质素积累量比较 | 第42-44页 |
| 3.4 转 GhCCoAOMT 拟南芥的功能研究 | 第44-48页 |
| 3.4.1 转 GhCCoAOMT 拟南芥阳性苗检测 | 第44页 |
| 3.4.2 转基因拟南芥黄萎病抗性表现 | 第44-45页 |
| 3.4.3 转基因拟南芥与野生型薹木质素积累量比较 | 第45-46页 |
| 3.4.4 转基因拟南芥和野生型主根长度的比较 | 第46-48页 |
| 4 讨论 | 第48-52页 |
| 4.1 GhCyP 基因在拟南芥中的过量表达提高了植株的黄萎病抗性 | 第48-49页 |
| 4.2 GhCyP 基因在棉花中的沉默降低了植株的黄萎病抗性 | 第49-50页 |
| 4.3 GhDAHPS 基因在拟南芥中过量表达提高了植株的黄萎病抗性 | 第50-51页 |
| 4.4 GhCCoAOMT 基因在拟南芥中过量表达提高了植株的黄萎病抗性 | 第51-52页 |
| 5 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-60页 |
| 附录 A 试验中所用载体结构示意图 | 第60-62页 |
| 附录 B 试验所用试剂配方 | 第62-65页 |
| 在读期间发表论文 | 第65-66页 |
| 作者简历 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
