| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-42页 |
| 1 研究背景及立题意义 | 第15-16页 |
| 2 基于不同底物特异性的褐藻胶裂解酶或酶系的研究进展 | 第16-31页 |
| ·褐藻胶裂解酶的底物来源和结构组成 | 第17-18页 |
| ·褐藻胶的酶解与非酶降解 | 第18-20页 |
| ·褐藻胶裂解酶的三种不同分类方法 | 第20-21页 |
| ·褐藻胶裂解酶的主要来源 | 第21-22页 |
| ·受底物来源影响的褐藻胶裂解酶的底物专一性 | 第22-23页 |
| ·褐藻胶裂解酶酶系作用方式及机理的系列研究 | 第23-24页 |
| ·褐藻胶裂解酶的调控和定位 | 第24页 |
| ·褐藻胶裂解酶酶活的测定方法 | 第24-25页 |
| ·基于不同底物特异性的褐藻胶裂解酶及酶系的酶学性质 | 第25-28页 |
| ·褐藻胶裂解酶的应用前景 | 第28-29页 |
| ·褐藻胶酶解产物的生物活性及应用 | 第29-30页 |
| ·小结 | 第30-31页 |
| 3 立题依据、研究目和主要研究内容 | 第31-33页 |
| ·立题依据 | 第31页 |
| ·研究目的 | 第31-32页 |
| ·主要研究内容 | 第32-33页 |
| 参考文献 | 第33-42页 |
| 第二章 褐藻胶裂解酶系的酶化学 | 第42-78页 |
| 引言 | 第42页 |
| 1 产酶菌株（HZJ216）的菌种鉴定 | 第42-47页 |
| ·材料与方法 | 第43-46页 |
| ·材料与试剂 | 第43页 |
| ·试剂 | 第43页 |
| ·培养基 | 第43页 |
| ·主要设备 | 第43-44页 |
| ·实验方法 | 第44-46页 |
| ·菌株培养 | 第44页 |
| ·菌株的分子生物学鉴定 | 第44-46页 |
| ·结果与讨论 | 第46-47页 |
| ·PCR 扩增及 BLAST 比对结果 | 第46页 |
| ·基于进化树结果的生理生化鉴定 | 第46-47页 |
| 2 菌株的产酶发酵培养 | 第47-52页 |
| ·材料与方法 | 第48-51页 |
| ·实验材料 | 第48-49页 |
| ·菌种和培养基 | 第48页 |
| ·实验设备 | 第48-49页 |
| ·实验方法 | 第49-51页 |
| ·菌株发酵培养 | 第49页 |
| ·酶活的测定 | 第49-51页 |
| ·蛋白质含量的测定——紫外法 | 第51页 |
| ·结果与讨论 | 第51-52页 |
| ·菌株发酵 | 第51页 |
| ·菌株发酵产褐藻胶裂解酶的酶活测定 | 第51-52页 |
| 3. 褐藻胶裂解酶系的分离纯化 | 第52-56页 |
| ·材料与方法 | 第52-54页 |
| ·材料与试剂 | 第52页 |
| ·主要仪器 | 第52-53页 |
| ·实验方法 | 第53-54页 |
| ·粗酶液的制备 | 第53页 |
| ·组成酶系各单体酶的分离纯化 | 第53-54页 |
| ·结果与讨论 | 第54-56页 |
| ·组成褐藻胶裂解酶系各单体酶的分离纯化 | 第54-56页 |
| 4 褐藻胶裂解酶系的酶学性质 | 第56-73页 |
| ·材料与方法 | 第56-58页 |
| ·材料与试剂 | 第56页 |
| ·主要设备 | 第56-57页 |
| ·实验方法 | 第57-58页 |
| ·褐藻胶裂解酶的分子量和等电点 | 第57页 |
| ·褐藻胶裂解酶的最适pH 值和最适温度 | 第57页 |
| ·褐藻胶裂解酶的热稳定性实验 | 第57页 |
| ·金属离子对褐藻胶裂解酶酶活力的影响 | 第57-58页 |
| ·褐藻胶裂解酶底物特异性的初步判断 | 第58页 |
| ·褐藻胶裂解酶N 端氨基酸序列测定 | 第58页 |
| ·结果与讨论 | 第58-73页 |
| ·褐藻胶裂解酶的分子量和等电点 | 第58-59页 |
| ·褐藻胶裂解酶的最适pH 值和最适温度 | 第59-61页 |
| ·褐藻胶裂解酶的热稳定性实验 | 第61-62页 |
| ·金属离子对褐藻胶裂解酶活性的影响 | 第62-64页 |
| ·褐藻胶裂解酶底物特异性的初步判断 | 第64-65页 |
| ·蛋白质N 端氨基酸序列测定 | 第65-73页 |
| 本章小结 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-78页 |
| 第三章 褐藻胶裂解酶系的酶解产物分析 | 第78-97页 |
| 引言 | 第78-79页 |
| 1. 材料与方法 | 第79-82页 |
| ·试剂与设备 | 第79-80页 |
| ·原料 | 第79页 |
| ·层析柱及填料 | 第79页 |
| ·化学试剂 | 第79页 |
| ·主要仪器设备 | 第79-80页 |
| ·实验方法 | 第80-82页 |
| ·褐藻胶裂解酶的发酵制备 | 第80页 |
| ·褐藻胶酶解终产物的制备 | 第80-81页 |
| ·褐藻胶酶解终产物的分离纯化 | 第81-82页 |
| ·褐藻胶酶解终产物的结构鉴定 | 第82页 |
| ·电喷雾电离质谱 | 第82页 |
| ·NMR 谱 | 第82页 |
| 2. 结果和讨论 | 第82-94页 |
| ·褐藻胶酶解终产物的分离纯化 | 第82-83页 |
| ·褐藻胶酶解终产物的 ESI-MS 分析 | 第83-85页 |
| ·褐藻胶酶解终产物的 NMR 分析 | 第85-94页 |
| 本章小结 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-97页 |
| 第四章 褐藻胶裂解酶的 QM/MM 分子动力学模拟初步研究 | 第97-120页 |
| 引言 | 第97-98页 |
| 1 分子动力学模拟背景介绍 | 第98-104页 |
| ·酶的催化 | 第98-99页 |
| ·酶催化的稳定性 | 第98-99页 |
| ·一般意义上的酸碱催化反应 | 第99页 |
| ·动力学的底物辅助催化反应 | 第99页 |
| ·量子力学/分子力学（QM/MM）分子动力学模拟 | 第99-100页 |
| ·模拟模型的结构和模拟条件 | 第100-104页 |
| ·自由能变化 | 第104页 |
| 2 褐藻胶裂解酶 A1-II’活性中心环区的开放和关闭 | 第104-109页 |
| ·实验方法 | 第105-106页 |
| ·2CWS 和2Z42 环区的比较 | 第105页 |
| ·分子动力学模拟方法研究2CWS 环区的开放与关闭 | 第105-106页 |
| ·结果与讨论 | 第106-109页 |
| ·2CWS 和2Z42 环区的比较 | 第106-108页 |
| ·分子动力学模拟方法研究2CWS 环区的开放与关闭 | 第108-109页 |
| 3 褐藻胶裂解酶与其底物复合物结构的 QM/MM 分子动力学模拟研究 | 第109-115页 |
| ·实验方法 | 第110-111页 |
| ·结果与讨论 | 第111-115页 |
| 本章小结 | 第115-116页 |
| 参考文献 | 第116-120页 |
| 第五章 褐藻胶裂解酶系的应用研究 | 第120-144页 |
| 引言 | 第120-121页 |
| 1 酶制剂的制备工艺 | 第121-130页 |
| ·材料与方法 | 第121-123页 |
| ·实验材料 | 第121页 |
| ·实验方法 | 第121-123页 |
| ·培养条件和褐藻胶裂解酶的发酵 | 第121页 |
| ·酶活评价 | 第121页 |
| ·褐藻胶裂解酶系粗酶的制备 | 第121-122页 |
| ·褐藻胶裂解酶的Na+-K+依赖性 | 第122页 |
| ·各种缓冲液对褐藻胶裂解酶酶活的影响 | 第122-123页 |
| ·各种添加剂对液态褐藻胶裂解酶酶活的影响 | 第123页 |
| ·固体酶的稳定性 | 第123页 |
| ·酶制剂的质量检测 | 第123页 |
| ·数据分析方法 | 第123页 |
| ·结果与讨论 | 第123-130页 |
| ·褐藻胶裂解酶系酶活测定 | 第123-124页 |
| ·Na~+-K~+依赖性特征 | 第124-125页 |
| ·各种缓冲液对褐藻胶裂解酶酶活的影响 | 第125-126页 |
| ·各种稳定剂对液态褐藻胶裂解酶稳定性的影响 | 第126-128页 |
| ·固体酶的稳定性检测 | 第128-129页 |
| ·酶制剂的质量检测 | 第129-130页 |
| 2 褐藻胶裂解酶在低粘度和超低粘度褐藻胶制备中的应用 | 第130-141页 |
| ·材料与方法 | 第130-133页 |
| ·实验材料与试剂 | 第130页 |
| ·主要仪器 | 第130页 |
| ·实验方法 | 第130-133页 |
| ·褐藻胶裂解酶的制备和酶活评价 | 第130页 |
| ·褐藻胶提取率的计算 | 第130-131页 |
| ·褐藻胶粘度的测定 | 第131页 |
| ·低粘度和超低粘度褐藻胶的制备 | 第131-132页 |
| ·酶控工艺和传统工艺比较 | 第132-133页 |
| ·结果与讨论 | 第133-141页 |
| ·酶液的制备 | 第133页 |
| ·低粘度和超低粘度褐藻胶的制备 | 第133-137页 |
| ·酶控工艺和传统工艺比较 | 第137-141页 |
| 本章小结 | 第141-142页 |
| 参考文献 | 第142-144页 |
| 结论、展望及创新点 | 第144-147页 |
| 结论 | 第144-146页 |
| 展望 | 第146-147页 |
| 创新点 | 第147-148页 |
| 致谢 | 第148-149页 |
| 个人简历 | 第149页 |
| 发表的学术论文及研究成果 | 第149页 |
