| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 第1章 文献综述 | 第9-20页 |
| ·外壳蛋白基因介导的兰花抗病毒基因工程 | 第10-11页 |
| ·常见的兰花病毒病 | 第10页 |
| ·外壳蛋白基因介导的病毒抗性 | 第10-11页 |
| ·兰科植物的转基因研究进展 | 第11-18页 |
| ·转基因受体系统 | 第12-14页 |
| ·转化子的筛选 | 第14-15页 |
| ·转化方法 | 第15-16页 |
| ·转基因植物分子生物学检测 | 第16-18页 |
| ·研究背景、目的意义及技术路线 | 第18-20页 |
| ·研究背景、目的意义 | 第18-19页 |
| ·本研究的技术路线 | 第19-20页 |
| 第2章 材料和方法 | 第20-30页 |
| ·材料 | 第20-22页 |
| ·试验材料 | 第20页 |
| ·主要试验仪器 | 第20页 |
| ·培养基 | 第20-21页 |
| ·主要的缓冲液、酶及生化试剂 | 第21-22页 |
| ·方法 | 第22-30页 |
| ·卡那霉素抗性筛选剂浓度的选择 | 第22页 |
| ·农杆菌侵染法 | 第22-24页 |
| ·基因枪转化法 | 第24-26页 |
| ·抗性苗的PCR检测 | 第26-28页 |
| ·抗性苗的移栽 | 第28页 |
| ·实时荧光定量PCR检测CyMV-CP基因在转基因兰花植株体内的表达 | 第28-30页 |
| 第3章 结果与分析 | 第30-43页 |
| ·兰花PLBs对卡那霉素的敏感性 | 第30-32页 |
| ·农杆菌侵染转化法遗传转化体系的优化 | 第32-34页 |
| ·头孢霉素浓度的选择 | 第32页 |
| ·农杆菌浸染时间的选择 | 第32-33页 |
| ·共培养时间及浸染液浓度对转化效率的影响 | 第33-34页 |
| ·基因枪介导的遗传转化体系的优化 | 第34页 |
| ·过渡培养时间对基因枪法转化文心兰的影响 | 第34页 |
| ·轰击枪数对基因枪法转文心兰的影响 | 第34页 |
| ·抗性筛选 | 第34-35页 |
| ·试验中存在的问题及解决的方法 | 第35-36页 |
| ·基因枪转化中出现的问题 | 第35-36页 |
| ·农杆菌转化后对农杆菌的抑制问题 | 第36页 |
| ·抗性苗的PCR检测结果分析 | 第36-38页 |
| ·抗性苗总DNA的提取 | 第36-37页 |
| ·抗性苗的PCR检测 | 第37-38页 |
| ·组培苗的移栽 | 第38-39页 |
| ·CYMV-CP基因在转基因兰花中的荧光定量RT-PCR分析 | 第39-43页 |
| ·兰花叶片总RNA的提取 | 第39-40页 |
| ·RT-PCR分析 | 第40页 |
| ·标准曲线的建立 | 第40-41页 |
| ·外源目的基因相对表达量分析 | 第41-43页 |
| 4 结论 | 第43-44页 |
| 5 展望 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-50页 |
| 附录 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 硕士期间发表论文 | 第52页 |