摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
上篇 文献综述 | 第12-38页 |
第一章 脑心肌炎病毒研究进展 | 第12-38页 |
1 生物学特征研究 | 第12-16页 |
1.1 病毒的分类及一般特征 | 第12-13页 |
1.2 病毒基因组结构特征 | 第13-14页 |
1.3 病毒蛋白 | 第14-16页 |
2 流行病学研究 | 第16-18页 |
3 致病机理 | 第18-21页 |
3.1 病毒毒力相关因子 | 第18-19页 |
3.2 机体损伤与炎症反应 | 第19-21页 |
4 临床症状及病理变化 | 第21-22页 |
5 诊断方法研究 | 第22-24页 |
5.1 病原学方法 | 第22-23页 |
5.2 血清学方法 | 第23-24页 |
6 疫苗研究 | 第24-26页 |
6.1 常规疫苗 | 第24-25页 |
6.2 基因工程疫苗 | 第25-26页 |
7 疾病防制 | 第26-27页 |
参考文献 | 第27-38页 |
下篇 研究内容 | 第38-116页 |
第二章 猪脑心肌炎病毒单克隆抗体的制备与生物学特性鉴定 | 第38-58页 |
摘要 | 第38-39页 |
1 材料与方法 | 第39-45页 |
1.1 材料 | 第39页 |
1.2 方法 | 第39-45页 |
2 结果 | 第45-52页 |
2.1 病毒的浓缩与纯化 | 第45-46页 |
2.2 免疫小鼠血清抗体效价测定 | 第46-47页 |
2.3 间接ELISA筛选方法的建立 | 第47页 |
2.4 阳性杂交瘤细胞株的建立 | 第47-48页 |
2.5 单克隆抗体Ig类和型的鉴定 | 第48页 |
2.6 单克隆抗体特异性鉴定 | 第48-51页 |
2.7 单克隆抗体腹水效价的测定 | 第51页 |
2.8 单克隆抗体中和活性鉴定 | 第51页 |
2.9 抗体分泌稳定性测定 | 第51-52页 |
3 讨论 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-56页 |
ABSTRACT | 第56-58页 |
第三章 猪脑心肌炎病毒NJ08株VP1蛋白B细胞表位的鉴定 | 第58-88页 |
摘要 | 第58-59页 |
1 材料与方法 | 第59-72页 |
1.1 材料 | 第59页 |
1.2 方法 | 第59-72页 |
2 结果 | 第72-82页 |
2.1 重组质粒pGEX-F-VP3/VP1的构建与鉴定 | 第72-73页 |
2.2 重组VP3/VP1蛋白的表达与鉴定 | 第73-75页 |
2.3 F1~F41目的片段的扩增 | 第75-76页 |
2.4 重组质粒pGEX-F1~F41的构建与鉴定 | 第76页 |
2.5 重组蛋白的表达、纯化及鉴定 | 第76-78页 |
2.6 ELISA方法鉴定VP1蛋白B细胞表位 | 第78-79页 |
2.7 Western blot鉴定VP1蛋白B细胞表位 | 第79-80页 |
2.8 VP1蛋白抗原表位的变异分析 | 第80-82页 |
3 讨论 | 第82-84页 |
参考文献 | 第84-86页 |
ABSTRACT | 第86-88页 |
第四章 猪脑心肌炎病毒阻断ELISA抗体检测方法的建立与应用 | 第88-116页 |
摘要 | 第88-89页 |
1 材料与方法 | 第89-95页 |
1.1 材料 | 第89页 |
1.2 方法 | 第89-95页 |
2 结果 | 第95-109页 |
2.1 pET-28a-VP1质粒的转化与克隆表达 | 第95-96页 |
2.2 不同代次重组菌表达VP1蛋白的稳定性 | 第96-97页 |
2.3 重组VP1蛋白表达条件的优化 | 第97-99页 |
2.4 重组VP1蛋白表达的可溶性检测 | 第99-100页 |
2.5 重组VP1蛋白的纯化 | 第100页 |
2.6 三批纯化的重组VP1蛋白的鉴定 | 第100-101页 |
2.7 单克隆抗体的纯化 | 第101-102页 |
2.8 阻断ELISA方法最佳反应条件的确定 | 第102-106页 |
2.9 阻断ELISA临界值的确定 | 第106-107页 |
2.10 阻断ELISA方法的敏感性 | 第107页 |
2.11 阻断ELISA方法的特异性试验 | 第107-108页 |
2.12 阻断ELISA方法的重复性试验 | 第108页 |
2.13 临床血清样品的检测 | 第108-109页 |
3 讨论 | 第109-112页 |
参考文献 | 第112-114页 |
ABSTRACT | 第114-116页 |
全文总结 | 第116-118页 |
致谢 | 第118页 |