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猪脑心肌炎病毒VP1蛋白B细胞表位解析及其阻断ELISA抗体检测方法的建立

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-11页
上篇 文献综述第12-38页
    第一章 脑心肌炎病毒研究进展第12-38页
        1 生物学特征研究第12-16页
            1.1 病毒的分类及一般特征第12-13页
            1.2 病毒基因组结构特征第13-14页
            1.3 病毒蛋白第14-16页
        2 流行病学研究第16-18页
        3 致病机理第18-21页
            3.1 病毒毒力相关因子第18-19页
            3.2 机体损伤与炎症反应第19-21页
        4 临床症状及病理变化第21-22页
        5 诊断方法研究第22-24页
            5.1 病原学方法第22-23页
            5.2 血清学方法第23-24页
        6 疫苗研究第24-26页
            6.1 常规疫苗第24-25页
            6.2 基因工程疫苗第25-26页
        7 疾病防制第26-27页
        参考文献第27-38页
下篇 研究内容第38-116页
    第二章 猪脑心肌炎病毒单克隆抗体的制备与生物学特性鉴定第38-58页
        摘要第38-39页
        1 材料与方法第39-45页
            1.1 材料第39页
            1.2 方法第39-45页
        2 结果第45-52页
            2.1 病毒的浓缩与纯化第45-46页
            2.2 免疫小鼠血清抗体效价测定第46-47页
            2.3 间接ELISA筛选方法的建立第47页
            2.4 阳性杂交瘤细胞株的建立第47-48页
            2.5 单克隆抗体Ig类和型的鉴定第48页
            2.6 单克隆抗体特异性鉴定第48-51页
            2.7 单克隆抗体腹水效价的测定第51页
            2.8 单克隆抗体中和活性鉴定第51页
            2.9 抗体分泌稳定性测定第51-52页
        3 讨论第52-54页
        参考文献第54-56页
        ABSTRACT第56-58页
    第三章 猪脑心肌炎病毒NJ08株VP1蛋白B细胞表位的鉴定第58-88页
        摘要第58-59页
        1 材料与方法第59-72页
            1.1 材料第59页
            1.2 方法第59-72页
        2 结果第72-82页
            2.1 重组质粒pGEX-F-VP3/VP1的构建与鉴定第72-73页
            2.2 重组VP3/VP1蛋白的表达与鉴定第73-75页
            2.3 F1~F41目的片段的扩增第75-76页
            2.4 重组质粒pGEX-F1~F41的构建与鉴定第76页
            2.5 重组蛋白的表达、纯化及鉴定第76-78页
            2.6 ELISA方法鉴定VP1蛋白B细胞表位第78-79页
            2.7 Western blot鉴定VP1蛋白B细胞表位第79-80页
            2.8 VP1蛋白抗原表位的变异分析第80-82页
        3 讨论第82-84页
        参考文献第84-86页
        ABSTRACT第86-88页
    第四章 猪脑心肌炎病毒阻断ELISA抗体检测方法的建立与应用第88-116页
        摘要第88-89页
        1 材料与方法第89-95页
            1.1 材料第89页
            1.2 方法第89-95页
        2 结果第95-109页
            2.1 pET-28a-VP1质粒的转化与克隆表达第95-96页
            2.2 不同代次重组菌表达VP1蛋白的稳定性第96-97页
            2.3 重组VP1蛋白表达条件的优化第97-99页
            2.4 重组VP1蛋白表达的可溶性检测第99-100页
            2.5 重组VP1蛋白的纯化第100页
            2.6 三批纯化的重组VP1蛋白的鉴定第100-101页
            2.7 单克隆抗体的纯化第101-102页
            2.8 阻断ELISA方法最佳反应条件的确定第102-106页
            2.9 阻断ELISA临界值的确定第106-107页
            2.10 阻断ELISA方法的敏感性第107页
            2.11 阻断ELISA方法的特异性试验第107-108页
            2.12 阻断ELISA方法的重复性试验第108页
            2.13 临床血清样品的检测第108-109页
        3 讨论第109-112页
        参考文献第112-114页
        ABSTRACT第114-116页
全文总结第116-118页
致谢第118页

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