| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩略语/符号说明 | 第12-13页 |
| 前言 | 第13-16页 |
| 研究现状、成果 | 第13-15页 |
| 研究目的与方法 | 第15-16页 |
| 1 研究对象和方法 | 第16-32页 |
| 1.1 材料与方法 | 第16-21页 |
| 1.1.1 实验耗材 | 第16页 |
| 1.1.2 实验试剂 | 第16-18页 |
| 1.1.3 试剂配置方法 | 第18-20页 |
| 1.1.4 实验仪器 | 第20-21页 |
| 1.2 实验方法 | 第21-32页 |
| 1.2.1 肝癌细胞的分离纯化及培养 | 第21-23页 |
| 1.2.1.1 研究对象 | 第21-22页 |
| 1.2.1.2 肿瘤细胞的分离培养 | 第22页 |
| 1.2.1.3 肿瘤细胞纯化及培养条件优化 | 第22-23页 |
| 1.2.1.4 肿瘤细胞的冻存及复苏 | 第23页 |
| 1.2.2 肝癌肿瘤细胞生物学特性鉴定 | 第23-30页 |
| 1.2.2.1 细胞形态观察 | 第23页 |
| 1.2.2.2 利用三种不同方法检测细胞生长曲线 | 第23-25页 |
| 1.2.2.3 利用Incu Cyte Zoom比较细胞迁移能力 | 第25页 |
| 1.2.2.4 利用Incu Cyte Zoom分析细胞侵袭能力 | 第25-26页 |
| 1.2.2.5 利用Incu Cyte Zoom追踪细胞单克隆形成 | 第26页 |
| 1.2.2.6 细胞周期鉴定 | 第26页 |
| 1.2.2.7 细胞核型分析 | 第26-27页 |
| 1.2.2.8 肝癌相关标志物检测 | 第27-30页 |
| 1.2.2.9 裸鼠致瘤性检测 | 第30页 |
| 1.2.3 肝癌细胞培养过程中支原体防治与检测 | 第30-32页 |
| 1.2.3.1 三种抗生素的使用方法 | 第30-31页 |
| 1.2.3.2 三种不同检测方法 | 第31-32页 |
| 2.实验结果 | 第32-96页 |
| 2.1 肝癌细胞系的生物学特性鉴定 | 第32-92页 |
| 2.1.1 细胞形态 | 第32-34页 |
| 2.1.2 细胞增殖曲线 | 第34-41页 |
| 2.1.2.1 MTT法测量倍增时间 | 第34-35页 |
| 2.1.2.2 相差下生长曲线分析 | 第35-38页 |
| 2.1.2.3 荧光成像下生长曲线分析 | 第38-40页 |
| 2.1.2.4 相差成像下通过细胞融合度来确定倍增时间 | 第40-41页 |
| 2.1.3 细胞迁移能力比较 | 第41-46页 |
| 2.1.4 细胞侵袭能力比较 | 第46-51页 |
| 2.1.5 单细胞克隆能力 | 第51-53页 |
| 2.1.6 细胞周期分析 | 第53-55页 |
| 2.1.7 细胞核型分析 | 第55-58页 |
| 2.1.7.1 各细胞株最佳的染色体核型制备条件 | 第55-56页 |
| 2.1.7.2 细胞染色体数目分析 | 第56-58页 |
| 2.1.8 肝癌相关标志物检测结果 | 第58-90页 |
| 2.1.8.1 HBV-DNA载量检测结果 | 第58页 |
| 2.1.8.2 免疫荧光检测结果 | 第58-68页 |
| 2.1.8.3 肿瘤干细胞标志物检测结果 | 第68-90页 |
| 2.1.9 肿瘤细胞致瘤能力 | 第90-92页 |
| 2.2 细胞培养过程中支原体防治与检测 | 第92-96页 |
| 2.2.1 采用Plasmocin处理并运用一步支原体检测试剂盒检测 | 第92页 |
| 2.2.2 快速支原体检测试剂盒检测抗生素BM-Cyclin的处理效果 | 第92页 |
| 2.2.3 PCR方法检测抗生素MRA的处理效果 | 第92-95页 |
| 2.2.3.1 PCR方法的优化 | 第92页 |
| 2.2.3.2 PCR方法检测支原体去除试剂MRA的处理效果 | 第92-95页 |
| 2.2.4 抗生素的交替使用 | 第95-96页 |
| 讨论 | 第96-104页 |
| 结论 | 第104-105页 |
| 参考文献 | 第105-110页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第110-111页 |
| 综述 肝癌干细胞表面标志物的研究进展 | 第111-120页 |
| 综述参考文献 | 第116-120页 |
| 致谢 | 第120页 |
