| 中文摘要 | 第4-5页 |
| 英文摘要 | 第5页 |
| 引言 | 第9-18页 |
| 1. Dip2a概述 | 第9-10页 |
| 1.1 结构和亚细胞定位 | 第9-10页 |
| 1.2 表达模式和功能 | 第10页 |
| 2. Fstl1概述 | 第10-12页 |
| 2.1 Fstl1的结构与分布及其参与的生理病理过程 | 第10-11页 |
| 2.2 FSTL1在发育过程中的功能及部分作用机制 | 第11-12页 |
| 3. DIP2A作为FSTL1的候选受体介导其相关生理功能 | 第12-13页 |
| 4. 报告基因概述 | 第13-15页 |
| 4.1 绿色荧光蛋白(GFP)的概述 | 第13-14页 |
| 4.2 LacZ报告基因的概述 | 第14-15页 |
| 5. 转基因动物模型及基因打靶概述 | 第15-18页 |
| 5.1 转基因动物模型及其制备 | 第15-16页 |
| 5.2 基因打靶技术概述 | 第16-18页 |
| 实验材料与方法 | 第18-26页 |
| 1. 实验材料 | 第18页 |
| 1.1 实验动物 | 第18页 |
| 1.2 质粒及细胞 | 第18页 |
| 1.3 主要试剂和抗体 | 第18页 |
| 1.4 主要仪器 | 第18页 |
| 2. 实验方法 | 第18-26页 |
| 2.1 组织整体染色 | 第19页 |
| 2.2 组织冰冻切片及LacZ染色 | 第19页 |
| 2.3 小鼠输精管结扎 | 第19-20页 |
| 2.4 采集受精卵 | 第20页 |
| 2.5 显微注射及输卵管移植 | 第20-21页 |
| 2.6 小鼠基因型鉴定 | 第21页 |
| 2.7 提取组织总RNA、逆转录、Realtime PCR反应 | 第21-23页 |
| 2.8 提取组织蛋白、BCA定量及Western blot分析 | 第23-24页 |
| 2.9 pCAGGS-EGFP-mDip2a和pCAGGS-mDip2a-EGFP质粒的大量提取及纯化 | 第24-25页 |
| 2.10 细胞培养和转染 | 第25-26页 |
| 实验结果 | 第26-36页 |
| 1. pCAGGS-EGFP-mDip2a和pCAGGS-mDip2a-EGFP载体的构建及其亚细胞定位 | 第26-28页 |
| 1.1 pCAGGS-EGFP-mDip2a和pCAGGS-mDip2a-EGFP载体的构建 | 第26-27页 |
| 1.2 Dip2a在293A细胞中的亚细胞定位 | 第27-28页 |
| 2. 原核共注射环状pX330-sgRNA和Dip2a-LacZ knockin DONOR质粒构建Dip2a-LacZ报告基因小鼠模型 | 第28-30页 |
| 3. Dip2a-LacZ小鼠模型中Dip2a的表达分析 | 第30-31页 |
| 4. Dip2a-LacZ成鼠神经系统染色结果分析 | 第31-36页 |
| 4.1 Dip2a在Dip2a+/-成鼠脑中的表达分布 | 第32-33页 |
| 4.2 Dip2a在Dip2a+/-成鼠脊髓中的表达分布 | 第33-34页 |
| 4.3 Dip2a在Dip2a+/-成鼠眼部的表达分布 | 第34-36页 |
| 讨论 | 第36-39页 |
| 结论 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-45页 |
| 致谢 | 第45页 |
