中文摘要 | 第5-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
中英缩略词对照表 | 第8-10页 |
前言 | 第10-12页 |
1 材料与方法 | 第12-30页 |
1.1 实验材料与仪器 | 第12页 |
1.1.1 细胞株 | 第12页 |
1.2 主要实验试剂 | 第12-16页 |
1.2.1 实验常用试剂 | 第12-14页 |
1.2.2 常用溶液的配制 | 第14-16页 |
1.3 主要实验仪器 | 第16-17页 |
1.4 实验方法 | 第17-30页 |
1.4.1 人肝癌 HepG2细胞空载体株control、稳定沉默shWnt10b | 第17-19页 |
1.4.2 Western Blot检测control、shWnt10b | 第19-24页 |
1.4.3 CCK-8检测 control、shWnt10b | 第24-25页 |
1.4.4 细胞克隆形成能力检测 | 第25页 |
1.4.5 细胞周期检测 | 第25-27页 |
1.4.6 Hoechst 33342染色检测细胞凋亡 | 第27页 |
1.4.7 细胞迁移能力检测 | 第27-28页 |
1.4.8 细胞侵袭能力检测 | 第28-29页 |
1.4.9 统计与分析 | 第29-30页 |
2 结果 | 第30-42页 |
2.1 倒置荧光显微镜下拍照 | 第30-31页 |
2.2 特异性sh RNA抑制Wnt10b蛋白的表达 | 第31-32页 |
2.3 细胞增殖能力测定 | 第32-33页 |
2.4 克隆形成能力检测 | 第33-34页 |
2.5 流式细胞术检测细胞周期 | 第34-35页 |
2.6 Hoechst 33342染色检测细胞凋亡 | 第35-38页 |
2.7 划痕愈合实验检测细胞的迁移能力 | 第38-40页 |
2.8 Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力 | 第40-42页 |
3 讨论 | 第42-45页 |
3.1 Wnt10基因失活对肝癌细胞影响的研究及意义 | 第42-44页 |
3.2 Wnt10b基因失活肝癌细胞株的构建及对人肝癌细胞增殖、周期、凋亡、迁移及侵袭能力影响的检测 | 第44-45页 |
4 结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-49页 |
综述 | 第49-59页 |
参考文献 | 第56-59页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第59-60页 |
致谢 | 第60-61页 |