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液体深层发酵羊肚菌胞内多糖提取、结构分析及抗结肠癌作用研究

摘要第4-6页
Abstract第6-8页
第1章 绪论第14-24页
    1.1 研究目的及意义第14页
    1.2 文献综述第14-22页
        1.2.1 羊肚菌概述第14-15页
        1.2.2 羊肚菌液体深层发酵技术第15-16页
        1.2.3 羊肚菌多糖提取、分离和纯化第16页
        1.2.4 羊肚菌多糖生理活性第16-17页
        1.2.5 羊肚菌多糖结构分析第17-21页
        1.2.6 多糖的结构与其生理活性的关系第21-22页
    1.3 研究内容第22-24页
第2章 羊肚菌胞内多糖提取工艺研究第24-46页
    2.1 引言第24页
    2.2 试验材料及设备第24-25页
        2.2.1 材料第24页
        2.2.2 试剂及设备第24-25页
    2.3 试验方法第25-31页
        2.3.1 液态发酵法生产羊肚菌菌丝体第25-26页
        2.3.2 多糖测定第26-27页
        2.3.3 超声波-微波协同提取法第27-29页
        2.3.4 高压脉冲电场提取法第29-30页
        2.3.5 对比试验第30页
        2.3.6 数据分析第30-31页
    2.4 试验结果第31-44页
        2.4.1 标准曲线绘制第31页
        2.4.2 超声波-微波协同提取第31-38页
        2.4.3 高压脉冲电场提取第38-43页
        2.4.4 对比试验第43-44页
    2.5 分析与讨论第44页
    2.6 本章小结第44-46页
第3章 羊肚菌胞内多糖分离纯化第46-62页
    3.1 引言第46页
    3.2 试验材料及设备第46-47页
        3.2.1 材料第46页
        3.2.2 试剂及仪器第46-47页
    3.3 试验方法第47-53页
        3.3.1 羊肚菌粗多糖分离纯化工艺路线第47页
        3.3.2 粗多糖分离第47-48页
        3.3.3 糖醛酸含量的测定第48页
        3.3.4 多糖除蛋白第48-51页
        3.3.5 多糖脱色第51页
        3.3.6 多糖分离纯化第51-52页
        3.3.7 统计分析第52-53页
    3.4 试验结果第53-59页
        3.4.1 多糖酒精沉淀第53页
        3.4.2 MEP中糖醛酸含量测定第53-54页
        3.4.3 多糖脱蛋白方法比较第54-56页
        3.4.4 多糖分离纯化第56-59页
    3.5 分析与讨论第59-60页
    3.6 本章小结第60-62页
第4章 羊肚菌多糖体外抗人结肠癌细胞HT-29 增殖及作用机制第62-80页
    4.1 引言第62页
    4.2 试验材料及设备第62-64页
        4.2.1 肿瘤细胞第62页
        4.2.2 试剂第62-63页
        4.2.3 仪器与设备第63-64页
    4.3 试验方法第64-71页
        4.3.1 培养基与试剂配制第64页
        4.3.2 细胞培养第64-65页
        4.3.3 羊肚菌多糖抑制HT-29 细胞增殖能力的测定第65-66页
        4.3.4 Annexin V-FITC/PI双染色法分析第66页
        4.3.5 HT-29 线粒体膜电位测量第66-67页
        4.3.6 多糖对HT-29 细胞凋亡相关基因表达的影响第67-69页
        4.3.7 caspase-3、8、9 活性检测第69-70页
        4.3.8 Western-blot分析第70页
        4.3.9 多糖对正常人纤维原细胞增殖影响第70-71页
        4.3.10 统计分析第71页
    4.4 试验结果第71-78页
        4.4.1 羊肚菌多糖体外对HT-29 增殖的抑制作用第71-72页
        4.4.2 HT-29 细胞凋亡检测第72-73页
        4.4.3 MEPN-B-Ⅱ对HT-29 线粒体膜电位影响第73-74页
        4.4.4 MEPN-B-Ⅱ对HT-29 相关凋亡基因表达水平影响第74-76页
        4.4.5 MEPN-B-Ⅱ对HT-29 中caspase-3、8、9 活性的影响第76-77页
        4.4.6 MEPN-B-Ⅱ对普通人纤维原细胞的影响第77-78页
    4.5 分析与讨论第78-79页
    4.6 本章小结第79-80页
第5章 羊肚菌胞内多糖分子结构研究第80-98页
    5.1 引言第80页
    5.2 试验材料及设备第80-81页
        5.2.1 材料第80-81页
        5.2.2 试剂及仪器第81页
    5.3 试验方法第81-84页
        5.3.1 单糖组成分析第81-82页
        5.3.2 红外光谱分析第82页
        5.3.3 紫外光谱扫描第82-83页
        5.3.4 甲基化分析第83页
        5.3.5 NMR分析第83-84页
        5.3.6 SEM分析第84页
        5.3.7 X-射线衍射分析第84页
    5.4 试验结果第84-96页
        5.4.1 单糖组成分析第84-85页
        5.4.2 红外光谱分析第85页
        5.4.3 紫外光谱分析第85-86页
        5.4.4 甲基化分析第86-91页
        5.4.5 NMR分析第91-94页
        5.4.6 SEM分析第94-95页
        5.4.7 X-射线衍射分析第95-96页
    5.5 分析与讨论第96页
    5.6 本章小结第96-98页
第6章 结论与展望第98-100页
    6.1 结论第98-99页
    6.2 后续工作展望第99-100页
参考文献第100-110页
攻读博士学位期间取得的学术成果第110-111页
致谢第111-112页

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