| 摘要 | 第5-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第1章 文献综述 | 第15-38页 |
| 1.1 动物细胞培养技术生产抗体药物概况 | 第15-19页 |
| 1.1.1 动物细胞培养技术的发展 | 第15-16页 |
| 1.1.2 抗体药物的发展 | 第16-17页 |
| 1.1.3 运用动物细胞培养技术生产抗体药物的进展 | 第17-19页 |
| 1.2 抗体的质量及其控制 | 第19-21页 |
| 1.2.1 抗体的质量属性 | 第19-20页 |
| 1.2.2 抗体的质量管理与控制 | 第20-21页 |
| 1.2.3 质量源于设计在抗体研发和生产过程中的应用 | 第21页 |
| 1.3 抗体的电荷异质性 | 第21-36页 |
| 1.3.1 抗体电荷变体的来源及其对药物功能的影响 | 第22-29页 |
| 1.3.2 抗体电荷变体的生成 | 第29-31页 |
| 1.3.3 细胞培养工艺过程对抗体电荷异质性的影响 | 第31-34页 |
| 1.3.4 抗体电荷异质性的检测 | 第34-35页 |
| 1.3.5 抗体电荷异质性研究过程中存在的问题 | 第35-36页 |
| 1.4 本文的研究内容、目的及意义 | 第36-38页 |
| 第2章 材料与方法 | 第38-45页 |
| 2.1 实验材料 | 第38-39页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第38页 |
| 2.1.2 培养基 | 第38页 |
| 2.1.3 实验器材 | 第38-39页 |
| 2.2 细胞培养 | 第39-40页 |
| 2.2.1 细胞复苏和种子细胞培养 | 第39页 |
| 2.2.2 批式培养 | 第39-40页 |
| 2.2.3 流加培养 | 第40页 |
| 2.3 分析方法 | 第40-45页 |
| 2.3.1 细胞计数和细胞直径检测 | 第40页 |
| 2.3.2 胞内外pH检测 | 第40页 |
| 2.3.3 营养物和代谢产物的检测 | 第40-41页 |
| 2.3.4 抗体浓度的检测 | 第41页 |
| 2.3.5 抗体的纯化 | 第41页 |
| 2.3.6 抗体电荷异质性的检测和分离 | 第41-42页 |
| 2.3.7 抗体多聚体的检测 | 第42页 |
| 2.3.8 抗体还原型片段的检测 | 第42-43页 |
| 2.3.9 抗体糖型的检测 | 第43页 |
| 2.3.10 木瓜蛋白酶的酶切 | 第43页 |
| 2.3.11 抗体结合能力的检测 | 第43-44页 |
| 2.3.12 抗体CDC生物学活性的检测 | 第44页 |
| 2.3.13 逆转录PCR和荧光定量PCR | 第44页 |
| 2.3.14 统计学分析 | 第44-45页 |
| 第3章 rCHO细胞培养表达的单克隆抗体电荷异质性基本特征 | 第45-56页 |
| 3.1 前言 | 第45页 |
| 3.2 实验设计 | 第45页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第45-55页 |
| 3.3.1 流加培养过程中rCHO细胞的生长、抗体合成和电荷分布 | 第46-48页 |
| 3.3.2 抗体电荷异质性的基本特征 | 第48-55页 |
| 3.4 本章小结 | 第55-56页 |
| 第4章 rCHO细胞培养表达的单克隆抗体酸性电荷变体研究 | 第56-80页 |
| 4.1 前言 | 第56页 |
| 4.2 实验设计 | 第56-58页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第58-78页 |
| 4.3.1 胞外抗体酸性电荷变体的生成 | 第58-66页 |
| 4.3.2 抗体酸性电荷变体生成动力学模型 | 第66-68页 |
| 4.3.3 胞内部分抗体酸性电荷变体的生成 | 第68-72页 |
| 4.3.4 培养温度及降温时间对细胞生长、抗体合成以及抗体电荷分布的影响 | 第72-78页 |
| 4.4 本章小结 | 第78-80页 |
| 第5章 rCHO细胞培养表达的单克隆抗体碱性电荷变体研究 | 第80-106页 |
| 5.1 前言 | 第80页 |
| 5.2 实验设计 | 第80-81页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第81-104页 |
| 5.3.1 赖氨酸变体的检测 | 第81-83页 |
| 5.3.2 培养温度对抗体赖氨酸变体的影响 | 第83-86页 |
| 5.3.3 金属离子对抗体赖氨酸变体的影响 | 第86-91页 |
| 5.3.4 碱性氨基酸对抗体赖氨酸变体的影响 | 第91-99页 |
| 5.3.5 抗体C末端赖氨酸酶切过程分析 | 第99-104页 |
| 5.4 本章小结 | 第104-106页 |
| 第6章 全文总结与展望 | 第106-110页 |
| 6.1 全文总结 | 第106-108页 |
| 6.2 本文创新点 | 第108-109页 |
| 6.3 建议和展望 | 第109-110页 |
| 参考文献 | 第110-124页 |
| 致谢 | 第124-125页 |
| 研究成果 | 第125页 |
