| 摘要 | 第9-11页 |
| 英文摘要 | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第13-28页 |
| 1.1 苏云金芽胞杆菌 | 第13页 |
| 1.2 苏云金芽胞杆菌杀虫蛋白 | 第13-23页 |
| 1.2.1 Cry蛋白 | 第13-14页 |
| 1.2.2 Cry蛋白命名 | 第14-15页 |
| 1.2.3 Cry蛋白作用机制 | 第15页 |
| 1.2.4 Cry蛋白结构 | 第15-21页 |
| 1.2.5 Cry蛋白的进化 | 第21-23页 |
| 1.3 Cry1Ah蛋白 | 第23-24页 |
| 1.4 Cry1Ab蛋白 | 第24-25页 |
| 1.5 Cry1Ca蛋白 | 第25-27页 |
| 1.6 本研究的目的与意义 | 第27页 |
| 1.7 立题依据 | 第27-28页 |
| 2 材料与方法 | 第28-36页 |
| 2.1 材料 | 第28-31页 |
| 2.1.1 供试菌株和质粒 | 第28页 |
| 2.1.2 引物合成及序列测定 | 第28-29页 |
| 2.1.3 抗生素 | 第29页 |
| 2.1.4 培养基 | 第29页 |
| 2.1.5 核酸电泳试剂 | 第29页 |
| 2.1.6 E.coli质粒DNA提取 | 第29-30页 |
| 2.1.7 生化试剂和酶 | 第30页 |
| 2.1.8 标准分子量 | 第30页 |
| 2.1.9 SDS - PAGE试剂 | 第30页 |
| 2.1.10其他试剂 | 第30-31页 |
| 2.2 仪器设备 | 第31页 |
| 2.3 供试昆虫 | 第31页 |
| 2.4 试验方法 | 第31-34页 |
| 2.4.1 大肠杆菌质粒提取 | 第31-32页 |
| 2.4.2 PCR扩增程序 | 第32页 |
| 2.4.3 重叠PCR扩增 | 第32页 |
| 2.4.4 转化 | 第32-33页 |
| 2.4.5 基因鉴定 | 第33页 |
| 2.4.6 序列的测定及分析 | 第33页 |
| 2.4.7 杂合蛋白表达 | 第33-34页 |
| 2.5 蛋白电泳检测 | 第34页 |
| 2.6 杀虫活性测定 | 第34-36页 |
| 2.6.1 小菜蛾生物活性测定 | 第34-35页 |
| 2.6.2 玉米螟生物活性测定 | 第35页 |
| 2.6.3 甜菜夜蛾、棉铃虫的生物活性测定 | 第35页 |
| 2.6.4.猿叶甲生物活性测定 | 第35-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-55页 |
| 3.1 pET-AHAHAB构建 | 第36-42页 |
| 3.1.1 Cry1Ah与Cry1Ab、pET-AHAHAB序列比较 | 第36页 |
| 3.1.2 Cry1Ah与Cry1Ab结构域I比较 | 第36-37页 |
| 3.1.3 Cry1Ah与Cry1Ab杂合蛋白构建 | 第37-38页 |
| 3.1.4 pET-AHAHAB蛋白定量结果 | 第38-39页 |
| 3.1.5 pET-AHAHAB生物活性测定 | 第39-42页 |
| 3.2 AhAhCa构建 | 第42-47页 |
| 3.2.1 Cry1Ah1与Cry1Ca7、AhAhCa序列比较 | 第42-43页 |
| 3.2.2 Cry1Ah与Cry1Ca结构域I比较 | 第43-44页 |
| 3.2.3 Cry1Ah与Cry1Ca杂合蛋白构建 | 第44页 |
| 3.2.4 构建杂合蛋白测序结果 | 第44-45页 |
| 3.2.5 AhAhCa蛋白定量结果 | 第45页 |
| 3.2.6 AhAhCa生物活性测定 | 第45-47页 |
| 3.3 AhAb Ab构建 | 第47-50页 |
| 3.3.1 Cry1Ah与Cry1Ab、AhAbAb序列比较 | 第47页 |
| 3.3.2 Cry1Ah与Cry1Ab杂合蛋白构建 | 第47-48页 |
| 3.3.3 cry1Ah和cry1Ab13 PCR扩增产物 | 第48页 |
| 3.3.4 AhAbAb酶切鉴定结果 | 第48页 |
| 3.3.5 AhAbAb转Rosetta PCR鉴定结果 | 第48-49页 |
| 3.3.6 AhAbAb蛋白表达 | 第49页 |
| 3.3.7 p ET-AHABAB 生物活性测定 | 第49-50页 |
| 3.4 pET-AHCACA构建 | 第50-55页 |
| 3.4.1 Cry1Ah与Cry1Ca、pET-AHCACA序列比较 | 第50-51页 |
| 3.4.2 cry1Ah和cry1Ca7 PCR扩增产物 | 第51页 |
| 3.4.3 p ET-AHCACA酶切鉴定结果 | 第51-52页 |
| 3.4.4 pET-AHCACA转Rosetta PCR鉴定结果 | 第52页 |
| 3.4.5 pET-AHCACA表达 | 第52-53页 |
| 3.4.6 pET-AHCACA生物活性测定 | 第53-55页 |
| 4 讨论 | 第55-57页 |
| 5 结论 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 附录 | 第66-67页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第67页 |
