| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 英文缩略表 | 第11-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-24页 |
| 1.1 鸡球虫病及其防治 | 第13页 |
| 1.2 表观遗传学 | 第13-14页 |
| 1.3 组蛋白乙酰化 | 第14-15页 |
| 1.4 组蛋白去乙酰化酶 | 第15-16页 |
| 1.4.1 HDACs的亚细胞分布 | 第15-16页 |
| 1.4.2 HDACs的功能 | 第16页 |
| 1.5 NAD+依赖的组蛋白去乙酰化酶 | 第16-20页 |
| 1.5.1 Sir2的蛋白质结构 | 第16-18页 |
| 1.5.2 亚细胞定位 | 第18-19页 |
| 1.5.3 Sirtuins的生物功能 | 第19页 |
| 1.5.4 Sirtuins的催化机制 | 第19-20页 |
| 1.6 寄生原虫的Sir2研究进展 | 第20-22页 |
| 1.6.1 分类 | 第20-21页 |
| 1.6.2 结构 | 第21页 |
| 1.6.3 功能 | 第21-22页 |
| 1.7 艾美耳球虫HDACS研究的目的和意义 | 第22-24页 |
| 第二章 E. tenella Sir2基因克隆 | 第24-36页 |
| 2.1 材料 | 第24-25页 |
| 2.1.1 虫株 | 第24页 |
| 2.1.2 菌株和载体 | 第24页 |
| 2.1.3 主要试剂与仪器 | 第24页 |
| 2.1.4 试剂的配制 | 第24-25页 |
| 2.2 方法 | 第25-29页 |
| 2.2.1 E. tenella接种 | 第25页 |
| 2.2.2 第二代裂殖子、卵囊、子孢子的收集纯化 | 第25页 |
| 2.2.3 合成第一链cDNA | 第25-26页 |
| 2.2.4 EtSir2A及EtSir2B基因扩增 | 第26-28页 |
| 2.2.5 菌液鉴定与测序 | 第28-29页 |
| 2.2.6 EtSir2A核酸序列和氨基酸序列分析 | 第29页 |
| 2.3 结果与分析 | 第29-35页 |
| 2.3.1 EtSir2A基因ORF的预测 | 第29-30页 |
| 2.3.2 EtSir2A和EtSir2B PCR扩增结果 | 第30页 |
| 2.3.3 菌液鉴定 | 第30-31页 |
| 2.3.4 测序结果 | 第31-34页 |
| 2.3.5 系统进化分析 | 第34-35页 |
| 2.4 讨论 | 第35页 |
| 2.5 小结 | 第35-36页 |
| 第三章 球虫不同发育阶段EtSir2A的表达差异 | 第36-43页 |
| 3.1 材料 | 第36页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第36页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第36页 |
| 3.1.3 荧光定量PCR模板 | 第36页 |
| 3.2 方法 | 第36-38页 |
| 3.2.1 引物设计 | 第36页 |
| 3.2.2 实时荧光定量PCR（qRT-PCR）扩增 | 第36-38页 |
| 3.3 结果与分析 | 第38-41页 |
| 3.3.1 E. tenella广东株不同发育时期总RNA的提取 | 第38页 |
| 3.3.2 EtSir2A特异引物检测结果 | 第38-39页 |
| 3.3.3 扩增效率检测及标准曲线的建立 | 第39-40页 |
| 3.3.4 EtSir2A mRNA转录量差异分析 | 第40-41页 |
| 3.4 讨论 | 第41-42页 |
| 3.5 小结 | 第42-43页 |
| 第四章 Et Sir2A序列分析及原核表达 | 第43-53页 |
| 4.1 材料 | 第43-44页 |
| 4.1.1 菌株与载体 | 第43页 |
| 4.1.2 酶与主要试剂 | 第43页 |
| 4.1.3 仪器设备 | 第43页 |
| 4.1.4 试剂配制 | 第43-44页 |
| 4.2 方法 | 第44-48页 |
| 4.2.1 EtSir2A核酸和蛋白质分析 | 第44页 |
| 4.2.2 构建pMAL-c2x-EtSir2A原核表达载体 | 第44-46页 |
| 4.2.3 原核表达 | 第46-48页 |
| 4.3 结果 | 第48-52页 |
| 4.3.1 EtSir2A序列的初步分析 | 第48-50页 |
| 4.3.2 重组表达质粒pMAL-c2x- EtSir2A双酶切鉴定结果 | 第50-51页 |
| 4.3.3 EtSir2A-MBP融合表达结果及其可溶性分析 | 第51-52页 |
| 4.4 讨论 | 第52页 |
| 4.5 小结 | 第52-53页 |
| 第五章 全文结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 附录 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 作者简历 | 第61页 |
