| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第11-27页 |
| 1.1 甲壳动物蜕皮相关研究 | 第11-13页 |
| 1.1.1 甲壳动物蜕皮相关器官 | 第11页 |
| 1.1.2 甲壳动物蜕皮相关的主要激素 | 第11-13页 |
| 1.2 蜕皮抑制激素MIH | 第13-15页 |
| 1.3 CRISPR/Cas9 | 第15-25页 |
| 1.3.1 CRISPR/Cas9简介 | 第15-18页 |
| 1.3.2 ZFNs，TALENs和CRISPR/Cas9的对比 | 第18-21页 |
| 1.3.3 CRISPR/Cas9在基因功能研究中的重要作用 | 第21-24页 |
| 1.3.4 CRISPR/Cas9在海洋生物中的应用 | 第24-25页 |
| 1.4 本研究的目的及其意义 | 第25-27页 |
| 第二章 CRISPR/Cas9介导的脊尾白虾EcMIH基因突变及其功能分析 | 第27-59页 |
| 2.1 材料与方法 | 第27-44页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第27页 |
| 2.1.2 主要试剂与仪器 | 第27-31页 |
| 2.1.3 实验方法 | 第31-44页 |
| 2.2 结果与讨论 | 第44-59页 |
| 2.2.1 EcMIH鉴定、序列分析以及gRNA位点设计 | 第44-48页 |
| 2.2.2 EcMIH组织分布表达特征分析 | 第48页 |
| 2.2.3 不同发育时期EcMIH的表达特征 | 第48-49页 |
| 2.2.4 EcMIH在各个蜕皮时期的表达变化 | 第49-50页 |
| 2.2.5 gRNA与Cas9 mRNA的转录与纯化 | 第50-51页 |
| 2.2.6 基因组indels突变的Sanger测序检测 | 第51-54页 |
| 2.2.7 EcMIH功能初步分析 | 第54-56页 |
| 2.2.8 显微注射相对突变率及存活率统计 | 第56-59页 |
| 第三章 Cas9蛋白的重组表达及其在脊尾白虾基因编辑中的应用 | 第59-69页 |
| 3.1 材料与方法 | 第59-65页 |
| 3.1.1 主要试剂与仪器 | 第59-61页 |
| 3.1.2 实验方法 | 第61-65页 |
| 3.2 结果与讨论 | 第65-69页 |
| 3.2.1 重组Cas9的诱导表达 | 第65-66页 |
| 3.2.2 重组Cas9核酸内切酶的分离纯化 | 第66-67页 |
| 3.2.3 重组Cas9蛋白体外活性检测 | 第67-69页 |
| 结论 | 第69-71页 |
| 展望 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-87页 |
| 致谢 | 第87-89页 |
| 作者简介 | 第89-91页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文与研究成果 | 第91页 |
