| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 主要符号对照表 | 第10-11页 |
| 第1章 引言 | 第11-14页 |
| 1.1 棘球绦虫和棘球蚴病 | 第11页 |
| 1.2 棘球蚴病的流行范围和特点 | 第11-12页 |
| 1.3 棘球蚴病的诊疗现状 | 第12-14页 |
| 第2章 多房棘球蚴抗原Emy162序列获得与优化 | 第14-21页 |
| 2.1 实验材料 | 第14-16页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第14页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第14-15页 |
| 2.1.3 试剂配制 | 第15页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第15-16页 |
| 2.2 实验方法 | 第16-17页 |
| 2.2.1 Emy162序列的获得及优化 | 第16页 |
| 2.2.2 Emy162核苷酸序列的基因合成 | 第16-17页 |
| 2.2.3 PCR产物的回收 | 第17页 |
| 2.3 实验结果 | 第17-19页 |
| 2.3.1 Emy162序列的优化 | 第17-18页 |
| 2.3.2 Emy162基因的c DNA序列的扩增 | 第18-19页 |
| 2.4 讨论 | 第19-20页 |
| 2.5 结论 | 第20-21页 |
| 第3章 多房棘球蚴亚单位疫苗CTB-Emy162载体构建 | 第21-32页 |
| 3.1 实验材料 | 第21-23页 |
| 3.1.1 Emy162氨基酸序列 | 第21页 |
| 3.1.2 免疫佐剂霍乱毒素B亚基（CTB） | 第21-22页 |
| 3.1.3 质粒的获取 | 第22页 |
| 3.1.4 主要试剂 | 第22-23页 |
| 3.1.5 实验仪器 | 第23页 |
| 3.2 实验方法 | 第23-26页 |
| 3.2.1 CTB-Emy162间隔序列选择及偶联设计 | 第23-24页 |
| 3.2.2 重组表达载体p ET-CTB-Emy162的构建 | 第24-26页 |
| 3.2.2.1 Emy162基因的合成 | 第24页 |
| 3.2.2.2 Emy162重组质粒载体构建 | 第24-25页 |
| 3.2.2.3 重组质粒p ET-CTB-Emy162的鉴定 | 第25-26页 |
| 3.3 实验结果 | 第26-30页 |
| 3.3.1 CTB-Emy162间隔序列选择及偶联设计 | 第26页 |
| 3.3.2 亚单位疫苗CTB-Emy162偶联设计 | 第26-27页 |
| 3.3.3 亚单位疫苗CTB-Emy162间隔序列设计 | 第27-28页 |
| 3.3.4 重组质粒载体p ET-CTB-Emy162的构建 | 第28-30页 |
| 3.3.4.1 经优化后的基因Emy162的合成 | 第28页 |
| 3.3.4.2 载体p ET-CTB-Emy162的构建及鉴定 | 第28-29页 |
| 3.3.4.3 载体p ET-CTB-Emy162的核苷酸测序 | 第29-30页 |
| 3.4 讨论 | 第30-31页 |
| 3.5 结论 | 第31-32页 |
| 第4章 多房棘球蚴亚单位疫苗CTB-Emy162的表达与纯化 | 第32-40页 |
| 4.1 实验材料 | 第32-34页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第32-33页 |
| 4.1.2 主要溶液及配方 | 第33-34页 |
| 4.1.3 实验仪器 | 第34页 |
| 4.2 实验方法 | 第34-36页 |
| 4.2.1 基因工程菌株的诱导表达及鉴定 | 第34-35页 |
| 4.2.1.1 重质粒p ET-CTB-Emy162的转化 | 第34-35页 |
| 4.2.1.2 基因工程重组菌株的诱导 | 第35页 |
| 4.2.1.3 重组蛋白CTB-Emy162的分离、表达部位及形式的鉴定 | 第35页 |
| 4.2.1.4 诱导表达产物的SDS-PAGE电泳检测 | 第35页 |
| 4.2.2 重组蛋白CTB-Emy162的Ni-NTA柱纯化 | 第35-36页 |
| 4.2.3 重组蛋白CTB-Emy162的透析复性和浓缩 | 第36页 |
| 4.3 实验结果 | 第36-38页 |
| 4.3.1 基因工程菌株的诱导表达及鉴定 | 第36-37页 |
| 4.3.2 重组蛋白CTB-Emy162的Ni-NTA亲和层析纯化 | 第37-38页 |
| 4.4 讨论 | 第38-39页 |
| 4.5 结论 | 第39-40页 |
| 第5章 多房棘球蚴亚单位疫苗CTB-Emy162免疫性研究 | 第40-50页 |
| 5.1 实验材料 | 第40-42页 |
| 5.1.1 CTB-Emy162等蛋白的获取 | 第40页 |
| 5.1.2 实验动物 | 第40页 |
| 5.1.3 主要试剂 | 第40-41页 |
| 5.1.4 主要溶液及配方 | 第41-42页 |
| 5.1.5 实验仪器 | 第42页 |
| 5.2 实验方法 | 第42-44页 |
| 5.2.1 BALB/c小鼠的免疫接种 | 第42-43页 |
| 5.2.2 CTB-Emy162与GM1的结合活性 | 第43页 |
| 5.2.3 ELISA检测特异性抗体 | 第43页 |
| 5.2.4 小鼠脾脏淋巴细胞增殖实验 | 第43-44页 |
| 5.3 实验结果 | 第44-48页 |
| 5.3.1 亚单位疫苗CTB-Emy162与GM1结合活性的检测 | 第44-45页 |
| 5.3.2 CTB-Emy162特异性抗体的检测 | 第45-46页 |
| 5.3.3 小鼠脾脏淋巴细胞增殖反应的检测 | 第46-47页 |
| 5.3.4 Ig G1、Ig G2a和Ig A特异性抗体的检测 | 第47-48页 |
| 5.4 讨论 | 第48-49页 |
| 5.5 结论 | 第49-50页 |
| 全文总结 | 第50-51页 |
| 不足与创新 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 综述 | 第65-76页 |
| 参考文献 | 第71-76页 |
| 作者简介 | 第76页 |
