摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
第1章 引言 | 第9-23页 |
1.1 HBV的概述 | 第9-13页 |
1.1.1 HBV的分类学及基因分型 | 第9-10页 |
1.1.2 HBV的结构和形态 | 第10-11页 |
1.1.3 HBV基因组结构及蛋白产物 | 第11-13页 |
1.2 HBV的生活周期 | 第13-17页 |
1.2.1 病毒入侵宿主细胞 | 第14-15页 |
1.2.2 双股DNA形成cccDNA | 第15页 |
1.2.3 病毒的转录与翻译 | 第15-16页 |
1.2.4 核衣壳的组装与反转录 | 第16-17页 |
1.2.5 病毒的分泌与释放 | 第17页 |
1.3 乙型肝炎的治疗 | 第17-19页 |
1.3.1 干扰素 | 第17-18页 |
1.3.2 核苷(酸)类似物 | 第18-19页 |
1.4 热休克蛋白 | 第19-20页 |
1.4.1 热休克蛋白概述 | 第19-20页 |
1.4.2 热休克蛋白与HBV反转录的作用 | 第20页 |
1.5 KNK437 | 第20-22页 |
1.5.1 KNK437概述 | 第20-21页 |
1.5.2 KNK437生物功能 | 第21-22页 |
1.6 本研究的目的、意义 | 第22-23页 |
第2章 实验材料及方法 | 第23-42页 |
2.1 实验材料 | 第23-31页 |
2.1.1 实验细胞和质粒 | 第23-24页 |
2.1.2 实验试剂及耗材 | 第24-27页 |
2.1.3 实验仪器 | 第27-28页 |
2.1.4 培养基及生化试剂的配制 | 第28-31页 |
2.2 实验方法 | 第31-42页 |
2.2.1 细胞培养及药物处理 | 第31页 |
2.2.2 细胞转染 | 第31-32页 |
2.2.3 细胞毒性实验 | 第32页 |
2.2.4 细胞冻存 | 第32-33页 |
2.2.5 胶原包被 | 第33页 |
2.2.6 大肠杆菌感受态细胞制备 | 第33页 |
2.2.7 质粒DNA向大肠杆菌中转化及质粒提取 | 第33-34页 |
2.2.8 ELISA检测细胞上清中HBsAg/HBeAg水平 | 第34-35页 |
2.2.9 Bradford法测定蛋白浓度 | 第35-36页 |
2.2.10 细胞内DNA提取 | 第36-37页 |
2.2.11 SDS-PAGE | 第37页 |
2.2.12 Western Blot | 第37-38页 |
2.2.13 RNA的提取 | 第38页 |
2.2.14 反转录实验 | 第38-39页 |
2.2.15 荧光定量 | 第39-40页 |
2.2.16 统计性分析 | 第40页 |
2.2.17 实时定量PCR引物表 | 第40-42页 |
第3章 结果与分析 | 第42-70页 |
3.1 KNK437对HepG2.215细胞系和Huh7细胞系的细胞毒性 | 第42-44页 |
3.1.1 KNK437对HepG2.215细胞系的细胞毒性 | 第42-43页 |
3.1.2 KNK437对Huh7细胞系的细胞毒性 | 第43-44页 |
3.1.3 小结 | 第44页 |
3.2 KNK437对HBV的HBsAg和HBeAg水平的影响 | 第44-54页 |
3.2.1 KNK437的浓度梯度处理后对HBsAg和HBeAg表达的影响 | 第45-49页 |
3.2.2 KNK437的时间梯度处理后对HBsAg和HBeAg表达的影响 | 第49-54页 |
3.2.3 小结 | 第54页 |
3.3 KNK437对HBV DNA复制的影响 | 第54-60页 |
3.3.1 KNK437的浓度梯度处理后对HBV DNA复制的影响 | 第55-57页 |
3.3.2 KNK437的时间梯度处理后对HBV DNA复制的影响 | 第57-60页 |
3.3.3 小结 | 第60页 |
3.4 KNK437对HBV转录的影响 | 第60-65页 |
3.4.1 KNK437的浓度梯度处理后对HBV RNA水平的影响 | 第60-63页 |
3.4.2 KNK437的时间梯度处理后对HBV RNA复制的影响 | 第63-65页 |
3.4.3 小结 | 第65页 |
3.5 KNK437对热休克蛋白的转录的影响 | 第65-70页 |
3.5.1 用荧光定量PCR检测KNK437对hsp70转录的影响 | 第66-67页 |
3.5.2 用荧光定量PCR检测KNK437对hsp90b转录的影响 | 第67页 |
3.5.3 用荧光定量PCR检测KNK437对hsp40转录的影响 | 第67-68页 |
3.5.4 小结 | 第68-70页 |
第4章 讨论 | 第70-73页 |
参考文献 | 第73-81页 |
致谢 | 第81-82页 |
作者简历 | 第82页 |