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以热休克蛋白为靶点的抗HBV药物研究

摘要第4-5页
Abstract第5页
第1章 引言第9-23页
    1.1 HBV的概述第9-13页
        1.1.1 HBV的分类学及基因分型第9-10页
        1.1.2 HBV的结构和形态第10-11页
        1.1.3 HBV基因组结构及蛋白产物第11-13页
    1.2 HBV的生活周期第13-17页
        1.2.1 病毒入侵宿主细胞第14-15页
        1.2.2 双股DNA形成cccDNA第15页
        1.2.3 病毒的转录与翻译第15-16页
        1.2.4 核衣壳的组装与反转录第16-17页
        1.2.5 病毒的分泌与释放第17页
    1.3 乙型肝炎的治疗第17-19页
        1.3.1 干扰素第17-18页
        1.3.2 核苷(酸)类似物第18-19页
    1.4 热休克蛋白第19-20页
        1.4.1 热休克蛋白概述第19-20页
        1.4.2 热休克蛋白与HBV反转录的作用第20页
    1.5 KNK437第20-22页
        1.5.1 KNK437概述第20-21页
        1.5.2 KNK437生物功能第21-22页
    1.6 本研究的目的、意义第22-23页
第2章 实验材料及方法第23-42页
    2.1 实验材料第23-31页
        2.1.1 实验细胞和质粒第23-24页
        2.1.2 实验试剂及耗材第24-27页
        2.1.3 实验仪器第27-28页
        2.1.4 培养基及生化试剂的配制第28-31页
    2.2 实验方法第31-42页
        2.2.1 细胞培养及药物处理第31页
        2.2.2 细胞转染第31-32页
        2.2.3 细胞毒性实验第32页
        2.2.4 细胞冻存第32-33页
        2.2.5 胶原包被第33页
        2.2.6 大肠杆菌感受态细胞制备第33页
        2.2.7 质粒DNA向大肠杆菌中转化及质粒提取第33-34页
        2.2.8 ELISA检测细胞上清中HBsAg/HBeAg水平第34-35页
        2.2.9 Bradford法测定蛋白浓度第35-36页
        2.2.10 细胞内DNA提取第36-37页
        2.2.11 SDS-PAGE第37页
        2.2.12 Western Blot第37-38页
        2.2.13 RNA的提取第38页
        2.2.14 反转录实验第38-39页
        2.2.15 荧光定量第39-40页
        2.2.16 统计性分析第40页
        2.2.17 实时定量PCR引物表第40-42页
第3章 结果与分析第42-70页
    3.1 KNK437对HepG2.215细胞系和Huh7细胞系的细胞毒性第42-44页
        3.1.1 KNK437对HepG2.215细胞系的细胞毒性第42-43页
        3.1.2 KNK437对Huh7细胞系的细胞毒性第43-44页
        3.1.3 小结第44页
    3.2 KNK437对HBV的HBsAg和HBeAg水平的影响第44-54页
        3.2.1 KNK437的浓度梯度处理后对HBsAg和HBeAg表达的影响第45-49页
        3.2.2 KNK437的时间梯度处理后对HBsAg和HBeAg表达的影响第49-54页
        3.2.3 小结第54页
    3.3 KNK437对HBV DNA复制的影响第54-60页
        3.3.1 KNK437的浓度梯度处理后对HBV DNA复制的影响第55-57页
        3.3.2 KNK437的时间梯度处理后对HBV DNA复制的影响第57-60页
        3.3.3 小结第60页
    3.4 KNK437对HBV转录的影响第60-65页
        3.4.1 KNK437的浓度梯度处理后对HBV RNA水平的影响第60-63页
        3.4.2 KNK437的时间梯度处理后对HBV RNA复制的影响第63-65页
        3.4.3 小结第65页
    3.5 KNK437对热休克蛋白的转录的影响第65-70页
        3.5.1 用荧光定量PCR检测KNK437对hsp70转录的影响第66-67页
        3.5.2 用荧光定量PCR检测KNK437对hsp90b转录的影响第67页
        3.5.3 用荧光定量PCR检测KNK437对hsp40转录的影响第67-68页
        3.5.4 小结第68-70页
第4章 讨论第70-73页
参考文献第73-81页
致谢第81-82页
作者简历第82页

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