| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-8页 |
| 第1章 引言 | 第8-13页 |
| ·酵母Tra1蛋白结构及其功能 | 第8-10页 |
| ·染色质重塑复合体SAGA与NuA4 | 第10-12页 |
| ·染色质重塑复合体SAGA | 第10-11页 |
| ·染色质重塑复合体NuA4 | 第11-12页 |
| ·本课题研究的目的及意义 | 第12-13页 |
| 第2章 材料与方法 | 第13-37页 |
| ·实验材料 | 第13-20页 |
| ·菌种 | 第13页 |
| ·质粒 | 第13-15页 |
| ·引物序列 | 第15页 |
| ·酶及化学试剂 | 第15页 |
| ·主要仪器设备 | 第15页 |
| ·培养基 | 第15-20页 |
| ·抗体 | 第20页 |
| ·实验方法 | 第20-37页 |
| ·提取酵母基因组DNA | 第20-21页 |
| ·引物设计与PCR扩增 | 第21-22页 |
| ·DNA产物纯化试剂盒 | 第22-23页 |
| ·酶切体系(TaKaRa) | 第23页 |
| ·酶连体系(TaKaRa) | 第23-24页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第24页 |
| ·DH5α感受态细胞的制备与转化 | 第24-25页 |
| ·酵母转化 | 第25-27页 |
| ·酵母菌落PCR | 第27页 |
| ·酵母总RNA的抽提 | 第27-28页 |
| ·RNA变性电泳 | 第28页 |
| ·Northern blot | 第28-30页 |
| ·Western blot | 第30-33页 |
| ·免疫共沉淀 | 第33-34页 |
| ·抗体制备 | 第34-37页 |
| 第3章 结果与分析 | 第37-49页 |
| ·染色质重塑复合体SAGA亚基Ada2和Spt7加(myc)_(13)标签 | 第37-39页 |
| ·部分抗体制备 | 第39-42页 |
| ·酵母RPL36B抗体制备 | 第39-40页 |
| ·酵母SAGA复合体组分蛋白spt3、ada5、taf90兔多克隆抗体制备 | 第40-41页 |
| ·酵母NuA4复合体组分蛋白Eaf1、RNA聚合酶Ⅰ亚基Rpa135兔多克隆抗体制备 | 第41-42页 |
| ·温度对Tra1蛋白突变菌株生长的影响 | 第42-46页 |
| ·Spotting assay测定不同温度下Tra1野生型和突变型菌株的生长表型 | 第43-44页 |
| ·测定温度转变条件下Tra1野生型和突变型菌株的生长曲线 | 第44页 |
| ·温度转变后不同时间Tra1野生型和突变型菌株总RNA的抽提 | 第44-45页 |
| ·northern检测温度转变后不同时间对Tra1野生型和突变型菌株rRNA的影响 | 第45-46页 |
| ·芯片分析Tra1突变直接影响的靶基因 | 第46页 |
| ·Tra1蛋白突变对SAGA和NuA4复合物稳定性的影响 | 第46-49页 |
| ·部分酵母蛋白抗体效价及蛋白标签添加的检测 | 第47-48页 |
| ·免疫共沉淀检测Tra1突变对SAGA、NuA4复合体稳定性的影响 | 第48-49页 |
| 第4章 总结与展望 | 第49-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第57页 |
