Abstract | 第4-5页 |
INTRODUCTION | 第9-11页 |
CHAPTER I Literature Reviews | 第11-25页 |
1.1 Chicken Toll-like Recpetor3 | 第11-18页 |
1.2 Infectious Bursal Disease Virus (IBDV) | 第18-21页 |
1.3 Interplay between Innate immunity and Viral Infection | 第21-23页 |
1.4 Objective of Study | 第23-24页 |
1.5 Experiment Design | 第24-25页 |
CHAPTER II Preparation of Polyclonal Antibody of Chicken Toll-like Receptor3 | 第25-36页 |
2.1 Experimental Materials | 第26页 |
2.1.1 Antigens, Cells & Animals | 第26页 |
2.1.2 Experimental Reagents | 第26页 |
2.1.3 Experimental Equipments | 第26页 |
2.1.4 Primer Sequences | 第26页 |
2.2 Experimental Methods | 第26-31页 |
2.2.1 Extraction of Recombinant Plasmid | 第26-27页 |
2.2.2 Identification of Recombinant Plasmid by RE digestion and PCR | 第27页 |
2.2.4 Transformation Protocol | 第27-28页 |
2.2.5 Induction of Recombinant Protein Expression | 第28页 |
2.2.6 SDS-PAGE detection of recombinant Protein | 第28-29页 |
2.2.7 Western-blot Determination of ch TLR3-LRR | 第29页 |
2.2.8 Immunization | 第29-30页 |
2.2.10 Standardization Optimal of Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) | 第30-31页 |
2.3 Experimental Results | 第31-34页 |
2.3.1 The identification result of chTLR3-LRR | 第31-32页 |
2.3.2 The result of expression and identification of chTLR3-LRR in BL21 | 第32-33页 |
2.3.3 The ELISA titre of newly prepared anti-ch TLR3-LRR polyclonal antibody | 第33-34页 |
2.4 Discussion | 第34-36页 |
CHAPTER III Differential activation of chTLR3 in the bursa of Fabricius by different virulence of IBDVs in commercial chicken | 第36-50页 |
3.1 Experimental Materials | 第37-38页 |
3.1.1 Virus Strain and cell | 第37页 |
3.1.2 Animal | 第37页 |
3.1.3 Experimental Reagents | 第37页 |
3.1.4 Experimental Equipments | 第37页 |
3.1.5 Primer Sequences | 第37-38页 |
3.2 Experimental Methods | 第38-43页 |
3.2.1 Amplification of IBDV in Vero Cells and titration | 第38页 |
3.2.2 Experiment design | 第38-39页 |
3.2.3 RNA Extraction | 第39页 |
3.2.4 Reverse Transcription | 第39页 |
3.2.5 Viral load detection by qRT-PCR | 第39-40页 |
3.2.6 Detection of ChTLR3 gene by Real time RT-PCR amplification system | 第40-41页 |
3.2.7 Detection of IL-8 and IFN-β gene by Real time RT-PCR amplification system | 第41-43页 |
3.2.8 Data Analysis | 第43页 |
3.3 Experimental Results | 第43-50页 |
3.3.1 Result of IBDV amplification | 第43页 |
3.3.2 The Clinical Pathogenicity of IBD | 第43-44页 |
3.3.3 The result of viral load | 第44-46页 |
3.3.4 The expression of Ch-TLR3 on mRNA level after infected with NN1172 and B87 | 第46-47页 |
3.3.5 The expression of IFN- -8 on mRNA level after infected with Different virulent strain of IBDV | 第47-50页 |
CHAPTER IV Discussion | 第50-51页 |
CHAPTER V Conclusion | 第51-52页 |
References | 第52-57页 |
List of Figures | 第57页 |
List of Tables | 第57-59页 |
Acknowledgements | 第59页 |