| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 主要符号对照表 | 第11-12页 |
| 第1章 引言 | 第12-30页 |
| 1.1 问题的提出 | 第12页 |
| 1.2 选题背景及意义 | 第12-13页 |
| 1.3 文献综述 | 第13-28页 |
| 1.3.1 体温调节及其体温调节中枢 | 第13-14页 |
| 1.3.2 热应激 | 第14-25页 |
| 1.3.3 小檗碱 | 第25-28页 |
| 1.4 研究方法 | 第28-29页 |
| 1.5 论文的组织结构 | 第29-30页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第30-47页 |
| 2.1 实验材料 | 第30-31页 |
| 2.1.1 实验动物与细胞 | 第30页 |
| 2.1.2 细胞培养试剂 | 第30页 |
| 2.1.3 生化试验试剂 | 第30页 |
| 2.1.4 抗体 | 第30-31页 |
| 2.2 实验仪器 | 第31页 |
| 2.3 实验方法 | 第31-47页 |
| 2.3.1 小檗碱的给药方式、剂量及给药后小鼠体温测量 | 第31页 |
| 2.3.2 高温模型 | 第31-32页 |
| 2.3.3 低温模型 | 第32-33页 |
| 2.3.4 高温致死模型 | 第33页 |
| 2.3.5 HSP70抑制剂KNK437 | 第33页 |
| 2.3.6 荧光定量PCR（Real-time PCR）测定mRNA的相对表达量 | 第33-36页 |
| 2.3.7 Western blot检测蛋白表达量 | 第36页 |
| 2.3.8 PC12细胞的诱导及鉴定 | 第36-37页 |
| 2.3.9 细胞的培养、高温模型的建立以及给药方式 | 第37页 |
| 2.3.10 MTT检测PC12细胞在不同浓度小檗碱培养基中的存活率 | 第37页 |
| 2.3.11 MTT检测不同造模时间对细胞存活率的影响 | 第37-38页 |
| 2.3.12 FITC Annexin V/PI双染色检测细胞凋亡 | 第38页 |
| 2.3.13 Docking软件预测HSP70蛋白与TNFa蛋白之间的相互作用 | 第38页 |
| 2.3.14 免疫共沉淀 | 第38页 |
| 2.3.15 应用放线菌素D检测HSP70与TNFα 蛋白的降解 | 第38页 |
| 2.3.16 免疫荧光染色 | 第38-39页 |
| 2.3.17 TNFα siRNA的转染 | 第39页 |
| 2.3.18 利用转座子系统构建HSP70过表达细胞系 | 第39-40页 |
| 2.3.19 利用慢病毒构建HSP70敲除细胞系 | 第40-42页 |
| 2.3.20 HSP70启动子质粒构建 | 第42-43页 |
| 2.3.21 TNFα 启动子质粒构建 | 第43页 |
| 2.3.22 构建TATA box-GC box突变质粒 | 第43-44页 |
| 2.3.23 流式细胞仪检测GFP的荧光强度 | 第44-45页 |
| 2.3.24 凝胶迁移实验 | 第45页 |
| 2.3.25 染色质免疫沉淀实验 | 第45页 |
| 2.3.26 荧光光谱检测DNA探针与小檗碱的结合 | 第45-46页 |
| 2.3.27 数据分析 | 第46-47页 |
| 第3章 小檗碱的体温调节特点 | 第47-58页 |
| 3.1 本章引言 | 第47页 |
| 3.2 实验结果 | 第47-57页 |
| 3.2.1 正常条件下小檗碱对小鼠体温的作用 | 第47-50页 |
| 3.2.2 高温条件下小檗碱对小鼠体温的调节 | 第50-52页 |
| 3.2.3 低温下小檗碱对小鼠体温的调节 | 第52-57页 |
| 3.3 本章小结 | 第57-58页 |
| 第4章 体温调节过程中小檗碱对HSP70、TNFα 和TRPM-8 的作用 | 第58-63页 |
| 4.1 本章引论 | 第58页 |
| 4.2 实验结果 | 第58-62页 |
| 4.2.1 40℃高温环境下小檗碱抑制小鼠下丘脑中HSP70和TNFα 表达 | 第58-59页 |
| 4.2.2 4℃低温环境下小檗碱促进小鼠下丘脑中TRPM-8 表达 | 第59-60页 |
| 4.2.3 高温下HSP70抑制剂对小鼠体温的影响 | 第60-62页 |
| 4.3 本章小结 | 第62-63页 |
| 第5章 热应激中小檗碱抑制PC12细胞中HSP70和TNFα 表达 | 第63-73页 |
| 5.1 本章引论 | 第63页 |
| 5.2 实验结果 | 第63-71页 |
| 5.2.1 小檗碱抑制HSP70、TNFα 在小鼠下丘脑中的表达 | 第63-64页 |
| 5.2.2 PC12细胞的诱导即神经元鉴定结果 | 第64-65页 |
| 5.2.3 MTT检测小檗碱对PC12细胞的毒性作用及安全剂量 | 第65页 |
| 5.2.4 高温模型的适宜时间 | 第65-68页 |
| 5.2.5 小檗碱抑制PC12细胞中HSP70和TNFα 表达 | 第68-69页 |
| 5.2.6 随着热应激时间的延长HSP70、TNFα 的表达变化 | 第69-71页 |
| 5.3 本章小结 | 第71-73页 |
| 第6章 热应激中HSP70与TNFα 之间的相互关系 | 第73-82页 |
| 6.1 本章引论 | 第73页 |
| 6.2 实验结果 | 第73-80页 |
| 6.2.1 HSP70敲低后HSP70、TNFα 的表达变化 | 第73-75页 |
| 6.2.2 HSP70过表达后HSP70、TNFα 的表达变化 | 第75-76页 |
| 6.2.3 TNFα siRNA对TNFα、HSP70表达的影响 | 第76页 |
| 6.2.4 外源TNFα 蛋白对HSP70表达的影响 | 第76-78页 |
| 6.2.5 HSP70蛋白与TNFα 蛋白之间的相互作用 | 第78-80页 |
| 6.3 本章小结 | 第80-82页 |
| 第7章 小檗碱对HSP70、TNFα 的作用机制 | 第82-94页 |
| 7.1 本章引论 | 第82页 |
| 7.2 实验结果 | 第82-93页 |
| 7.2.1 小檗碱抑制HSP70启动子活性 | 第82-86页 |
| 7.2.2 小檗碱与HSP70 TATA box探针以及突变探针的结合 | 第86-87页 |
| 7.2.3 小檗碱抑制HSP70基因启动子区“TATA box”与TBP结合 | 第87页 |
| 7.2.4 小檗碱提高HSP70突变启动子活性 | 第87-88页 |
| 7.2.5 小檗碱抑制TNFα 启动子活性 | 第88-90页 |
| 7.2.6 小檗碱与TNFα“TATA box”探针以及突变探针的结合 | 第90-92页 |
| 7.2.7 小檗碱抑制TBP与TNFα 基因启动子区“TATA box”结合 | 第92页 |
| 7.2.8 小檗碱提高TNFα 突变启动子的活性 | 第92-93页 |
| 7.3 本章小结 | 第93-94页 |
| 第8章 NFκB可能是HSP70-TNFα 信号通路的介导者 | 第94-100页 |
| 8.1 本章引论 | 第94页 |
| 8.2 实验结果 | 第94-99页 |
| 8.2.1 热应激中小檗碱抑制NFκB表达 | 第94-96页 |
| 8.2.2 热应激中NFκB在细胞内的分布变化 | 第96页 |
| 8.2.3 小檗碱对NFκB转录活性的抑制 | 第96-98页 |
| 8.2.4 HSP70的表达变化对NFκB表达的影响 | 第98-99页 |
| 8.3 本章小结 | 第99-100页 |
| 第9章 小檗碱对高温致死小鼠的影响 | 第100-103页 |
| 9.1 本章引言 | 第100页 |
| 9.2 实验结果 | 第100-102页 |
| 9.2.1 小檗碱减少小鼠的高温致死数量 | 第100页 |
| 9.2.2 持续热应激对HSP70、TNFα 表达的影响 | 第100-102页 |
| 9.3 本章小结 | 第102-103页 |
| 第10章 讨论与展望 | 第103-109页 |
| 10.1 讨论 | 第103-105页 |
| 10.1.1 热应激中小檗碱对小鼠体温的调节作用 | 第103页 |
| 10.1.2 HSP70在体温调节中的作用 | 第103-104页 |
| 10.1.3 HSP70与TNFα 之间的关系 | 第104-105页 |
| 10.1.4 小檗碱的作用靶点 | 第105页 |
| 10.2 总结 | 第105-107页 |
| 10.2.1 小檗碱可以降低高温致死率并下调由高温环境引起的体温上升 | 第105页 |
| 10.2.2 HSP70、TNFα 在热应激体温调节中的重要作用 | 第105-106页 |
| 10.2.3 神经细胞自身可因局部温度升高而上调表达HSP70和TNFα | 第106页 |
| 10.2.4 小檗碱可以通过细胞因子进行体温的调节 | 第106页 |
| 10.2.5 HSP70作为分子伴侣对TNFα 蛋白的稳定起保护作用 | 第106页 |
| 10.2.6“TATA box”是小檗碱抑制HSP70、TNFα 表达的作用位点 | 第106-107页 |
| 10.2.7 关于小檗碱抑制热应激体温升高的相关分子机制小结 | 第107页 |
| 10.3 展望 | 第107-109页 |
| 第11章 其它工作：菠萝叶对药物代谢酶的诱导作用及相关质量标准研究 | 第109-122页 |
| 11.1 本章引言 | 第109页 |
| 11.2 实验材料与方法 | 第109-113页 |
| 11.2.1 实验材料 | 第109页 |
| 11.2.2 实验仪器 | 第109-110页 |
| 11.2.3 实验方法 | 第110-113页 |
| 11.3 实验结果 | 第113-120页 |
| 11.3.1 菠萝叶组织学观察 | 第113-114页 |
| 11.3.2 对香豆酸与菠萝酰脂含量测定 | 第114-115页 |
| 11.3.3 加样回收率 | 第115页 |
| 11.3.4 不同产地菠萝叶对香豆酸和菠萝酰脂含量 | 第115-116页 |
| 11.3.5 菠萝叶对小鼠肝脏CYPA2、2E1和 3A11表达的影响 | 第116-117页 |
| 11.3.6 菠萝叶对小鼠肝脏CYPA2、2E1和 3A11功能的影响 | 第117-120页 |
| 11.4 本章小结及讨论 | 第120-122页 |
| 参考文献 | 第122-133页 |
| 致谢 | 第133-135页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第135-136页 |
