| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略词表 | 第8-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-25页 |
| 1.1 乙烯是影响月季切花损耗的关键因素 | 第13-14页 |
| 1.1.1 月季是全球最重要的切花之一 | 第13页 |
| 1.1.2 月季切花采后损耗是月季产业发展中亟待解决的问题 | 第13-14页 |
| 1.1.3 乙烯对月季花朵开放品质具有重要影响 | 第14页 |
| 1.2 花瓣细胞扩展是花朵开放品质的重要决定因素 | 第14-18页 |
| 1.2.1 花朵开放品质的形成主要依赖花瓣扩展 | 第14-15页 |
| 1.2.2 花瓣细胞扩展的调节机制 | 第15-16页 |
| 1.2.3 乙烯参与植物细胞扩展的调节 | 第16-17页 |
| 1.2.4 乙烯调节植物细胞扩展的机理 | 第17-18页 |
| 1.3 转录因子是乙烯作用机制中的重要组分 | 第18-22页 |
| 1.3.1 乙烯信号转导途径 | 第18-20页 |
| 1.3.2 转录因子概述 | 第20-21页 |
| 1.3.3 与乙烯合成和信号相关的转录因子 | 第21-22页 |
| 1.4 HD-Zip转录因子可能参与乙烯调节的细胞扩展 | 第22-24页 |
| 1.4.1 HD-Zip转录因子概述 | 第22-24页 |
| 1.4.2 HD-Zip转录因子与乙烯 | 第24页 |
| 1.5 研究思路 | 第24页 |
| 1.6 本研究的目的与意义 | 第24-25页 |
| 第二章 RhHB2基因的表达特性和蛋白生化特性分析 | 第25-50页 |
| 2.1 材料与方法 | 第25-38页 |
| 2.1.1 植物材料及处理 | 第25-26页 |
| 2.1.2 月季花瓣RNA提取及基因组DNA提取 | 第26-28页 |
| 2.1.3 反转录PCR与实时荧光定量PCR | 第28-30页 |
| 2.1.4 大肠杆菌感受态的制备及转化 | 第30-32页 |
| 2.1.5 RhHB2基因全长及启动子的克隆 | 第32-33页 |
| 2.1.6 质粒的提取 | 第33-34页 |
| 2.1.7 相关载体及载体构建引物 | 第34-35页 |
| 2.1.8 基因枪法转化洋葱表皮细胞 | 第35-36页 |
| 2.1.9 酵母感受态细胞的制备及转化 | 第36页 |
| 2.1.10 转录激活检测 | 第36-37页 |
| 2.1.11 农杆菌感受态细胞制备及转化 | 第37-38页 |
| 2.2 结果与分析 | 第38-49页 |
| 2.2.1 RhHB2基因的筛选与克隆 | 第38-41页 |
| 2.2.2 RhHB2基因的表达特性分析 | 第41-44页 |
| 2.2.3 RhHB2蛋白的亚细胞定位 | 第44-45页 |
| 2.2.4 RhHB2蛋白的转录激活活性分析 | 第45-46页 |
| 2.2.5 RhHB2蛋白的二聚化分析 | 第46-47页 |
| 2.2.6 RhHB2基因启动子的克隆及顺式作用元件分析 | 第47-48页 |
| 2.2.7 RhHB2基因启动子载体的构建及转化拟南芥 | 第48-49页 |
| 2.3 小结 | 第49-50页 |
| 第三章 沉默RhHB2对月季花朵开放和花瓣扩展的影响 | 第50-59页 |
| 3.1 材料与方法 | 第50-52页 |
| 3.1.1 VIGS载体构建及下游基因检测引物 | 第50-51页 |
| 3.1.2 VIGS | 第51-52页 |
| 3.1.3 花枝、花瓣面积计算及花朵开放进程统计 | 第52页 |
| 3.1.4 显微观察与细胞计数 | 第52页 |
| 3.1.5 花瓣圆片衰老观察及统计 | 第52页 |
| 3.2 结果与分析 | 第52-58页 |
| 3.2.1 沉默载体的构建 | 第52-53页 |
| 3.2.2 月季中RhHB2基因沉默的检测 | 第53-54页 |
| 3.2.3 沉默RhHB2对月季花朵开放的影响 | 第54页 |
| 3.2.4 沉默RhHB2对月季花瓣扩展的影响 | 第54-55页 |
| 3.2.5 沉默RhHB2对月季花瓣衰老的影响 | 第55-56页 |
| 3.2.6 RhHB2沉默花瓣中与细胞扩展相关的潜在下游基因的表达分析 | 第56-58页 |
| 3.3 小结 | 第58-59页 |
| 第四章 RhHB2在拟南芥中的过表达对植株生长的影响 | 第59-76页 |
| 4.1 材料与方法 | 第59-63页 |
| 4.1.1 植物材料培养 | 第59页 |
| 4.1.2 拟南芥遗传转化 | 第59-60页 |
| 4.1.3 拟南芥RhHB2异源过表达株系的筛选 | 第60页 |
| 4.1.4 拟南芥RNA提取、DNA消化及下游基因检测引物 | 第60-62页 |
| 4.1.5 转基因植株表型观察及统计 | 第62页 |
| 4.1.6 花瓣表皮细胞固定和观察 | 第62页 |
| 4.1.7 转基因植株黄化苗下胚轴长度统计 | 第62页 |
| 4.1.8 各种处理条件下转基因植株成活率统计 | 第62-63页 |
| 4.2 结果与分析 | 第63-75页 |
| 4.2.1 过表达载体的构建及转基因植株的筛选 | 第63页 |
| 4.2.2 拟南芥转RhHB2基因植株表型观测 | 第63-68页 |
| 4.2.3 不同处理下转基因植株的特性分析 | 第68-72页 |
| 4.2.4 拟南芥过表达植株中与细胞分裂和扩展相关的潜在下游基因的表达分析 | 第72-75页 |
| 4.3 小结 | 第75-76页 |
| 第五章 讨论与结论 | 第76-79页 |
| 5.1 讨论 | 第76-78页 |
| 5.1.1 RhHB2基因的表达受乙烯显著诱导 | 第76页 |
| 5.1.2 RhHB2可能调节了细胞分裂和扩展相关基因的表达 | 第76-77页 |
| 5.1.3 RhHB2与RhHB1具有不同的转录调节机制 | 第77-78页 |
| 5.2 结论 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
| 个人简历 | 第87页 |
