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Bacillus flexus β-淀粉酶在短小芽孢杆菌中的重组表达、分子改造及应用研究

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
第一章 绪论第8-14页
    1.1 β-淀粉酶的概述第8-10页
        1.1.1 β-淀粉酶的种类及应用第8-10页
    1.2 麦芽糖浆概述第10-12页
        1.2.1 麦芽糖浆的性质及应用第10-11页
        1.2.2 麦芽糖浆的分类第11页
        1.2.3 麦芽糖浆的制备及纯化第11-12页
    1.3 短小芽孢杆菌概述第12页
    1.4 立题依据和研究意义第12-13页
    1.5 主要研究内容第13-14页
第二章 材料与方法第14-24页
    2.1 实验材料第14-15页
        2.1.1 菌种、质粒以及主要试剂第14页
        2.1.2 主要仪器第14-15页
        2.1.3 培养基第15页
    2.2 实验方法第15-20页
        2.2.1 重组质粒的构建第15-18页
        2.2.2 重组菌的发酵第18-19页
        2.2.3 突变体的构建第19-20页
    2.3 分析方法第20-24页
        2.3.1 菌体光密度(OD_(600))的测定第20页
        2.3.2 蛋白浓度的测定第20页
        2.3.3 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第20页
        2.3.4 β-淀粉酶活力的测定第20-21页
        2.3.5 重组β-淀粉酶的纯化第21页
        2.3.6 重组β-淀粉酶的酶学性质分析第21-22页
        2.3.7 酶转化淀粉生成麦芽糖的反应条件优化第22-23页
        2.3.8 淀粉水解产物测定方法第23-24页
第三章 结果与讨论第24-42页
    3.1 β-淀粉酶在短小芽孢杆菌中的异源表达及发酵优化第24-30页
        3.1.1 β-淀粉酶在B.choshinensis中的异源表达第24-26页
        3.1.2 重组菌B.choshinensis/pNCMO2-amy摇瓶优化第26-29页
        3.1.3 3-L罐中重组菌发酵生产β-淀粉酶第29-30页
    3.2 重组β-淀粉酶的纯化、酶学性质分析及应用条件优化第30-36页
        3.2.1 重组β-淀粉酶的分离纯化第30-31页
        3.2.2 重组β-淀粉酶的酶学性质研究第31-32页
        3.2.3 重组β-淀粉酶制备麦芽糖条件优化第32-36页
    3.3 定点突变降低β-淀粉酶的最适pH第36-42页
        3.3.1 突变位点的选择第36-37页
        3.3.2 突变体的构建、表达与纯化第37页
        3.3.3 突变体的酶学性质分析第37-39页
        3.3.4 突变体的应用探究第39-40页
        3.3.5 突变体性能改变的原因分析第40-42页
主要结论与展望第42-44页
    主要结论第42-43页
    展望第43-44页
致谢第44-45页
参考文献第45-50页
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第50页

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