摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
第一章 绪论 | 第8-14页 |
1.1 β-淀粉酶的概述 | 第8-10页 |
1.1.1 β-淀粉酶的种类及应用 | 第8-10页 |
1.2 麦芽糖浆概述 | 第10-12页 |
1.2.1 麦芽糖浆的性质及应用 | 第10-11页 |
1.2.2 麦芽糖浆的分类 | 第11页 |
1.2.3 麦芽糖浆的制备及纯化 | 第11-12页 |
1.3 短小芽孢杆菌概述 | 第12页 |
1.4 立题依据和研究意义 | 第12-13页 |
1.5 主要研究内容 | 第13-14页 |
第二章 材料与方法 | 第14-24页 |
2.1 实验材料 | 第14-15页 |
2.1.1 菌种、质粒以及主要试剂 | 第14页 |
2.1.2 主要仪器 | 第14-15页 |
2.1.3 培养基 | 第15页 |
2.2 实验方法 | 第15-20页 |
2.2.1 重组质粒的构建 | 第15-18页 |
2.2.2 重组菌的发酵 | 第18-19页 |
2.2.3 突变体的构建 | 第19-20页 |
2.3 分析方法 | 第20-24页 |
2.3.1 菌体光密度(OD_(600))的测定 | 第20页 |
2.3.2 蛋白浓度的测定 | 第20页 |
2.3.3 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第20页 |
2.3.4 β-淀粉酶活力的测定 | 第20-21页 |
2.3.5 重组β-淀粉酶的纯化 | 第21页 |
2.3.6 重组β-淀粉酶的酶学性质分析 | 第21-22页 |
2.3.7 酶转化淀粉生成麦芽糖的反应条件优化 | 第22-23页 |
2.3.8 淀粉水解产物测定方法 | 第23-24页 |
第三章 结果与讨论 | 第24-42页 |
3.1 β-淀粉酶在短小芽孢杆菌中的异源表达及发酵优化 | 第24-30页 |
3.1.1 β-淀粉酶在B.choshinensis中的异源表达 | 第24-26页 |
3.1.2 重组菌B.choshinensis/pNCMO2-amy摇瓶优化 | 第26-29页 |
3.1.3 3-L罐中重组菌发酵生产β-淀粉酶 | 第29-30页 |
3.2 重组β-淀粉酶的纯化、酶学性质分析及应用条件优化 | 第30-36页 |
3.2.1 重组β-淀粉酶的分离纯化 | 第30-31页 |
3.2.2 重组β-淀粉酶的酶学性质研究 | 第31-32页 |
3.2.3 重组β-淀粉酶制备麦芽糖条件优化 | 第32-36页 |
3.3 定点突变降低β-淀粉酶的最适pH | 第36-42页 |
3.3.1 突变位点的选择 | 第36-37页 |
3.3.2 突变体的构建、表达与纯化 | 第37页 |
3.3.3 突变体的酶学性质分析 | 第37-39页 |
3.3.4 突变体的应用探究 | 第39-40页 |
3.3.5 突变体性能改变的原因分析 | 第40-42页 |
主要结论与展望 | 第42-44页 |
主要结论 | 第42-43页 |
展望 | 第43-44页 |
致谢 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-50页 |
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第50页 |