| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 1 绪论 | 第7-15页 |
| 1.1 稀有糖概述 | 第7页 |
| 1.2 D-甘露糖概述 | 第7-10页 |
| 1.2.1 D-甘露糖的结构与性质 | 第7-8页 |
| 1.2.2 D-甘露糖的生理功能与应用 | 第8页 |
| 1.2.3 D-甘露糖的生产制备 | 第8-10页 |
| 1.3 D-来苏糖异构酶概述 | 第10-13页 |
| 1.3.1 D-来苏糖异构酶简介 | 第10-11页 |
| 1.3.2 D-来苏糖异构酶的性质 | 第11-12页 |
| 1.3.3 D-来苏糖异构酶的应用研究 | 第12-13页 |
| 1.4 本课题立题依据与意义 | 第13页 |
| 1.5 本课题研究主要内容 | 第13-15页 |
| 2 实验材料与方法 | 第15-23页 |
| 2.1 实验材料与仪器 | 第15页 |
| 2.1.1 主要试剂与材料 | 第15页 |
| 2.1.2 主要实验仪器 | 第15页 |
| 2.1.3 实验菌株 | 第15页 |
| 2.2 培养基与实验试剂的配制 | 第15-17页 |
| 2.2.1 培养基的配制 | 第15页 |
| 2.2.2 相关实验试剂的配制 | 第15-17页 |
| 2.3 来苏糖异构酶研究实验方法 | 第17-20页 |
| 2.3.1 基因克隆 | 第17页 |
| 2.3.2 E. coli DH5α 及E. coli BL21(DE3)感受态细胞制备 | 第17页 |
| 2.3.3 基因重组菌的构建 | 第17-18页 |
| 2.3.4 质粒的抽提制备 | 第18页 |
| 2.3.5 琼脂糖凝胶电泳检测 | 第18页 |
| 2.3.6 重组菌的诱导表达 | 第18页 |
| 2.3.7 来苏糖异构酶的分离纯化 | 第18页 |
| 2.3.8 重组酶蛋白分子量测定 | 第18-19页 |
| 2.3.9 重组酶的蛋白含量测定 | 第19页 |
| 2.3.10 重组来苏糖异构酶的酶活测定 | 第19页 |
| 2.3.11 来苏糖异构酶的酶学性质研究 | 第19-20页 |
| 2.4 共表达体系研究实验方法 | 第20-23页 |
| 2.4.1 共表达体系基因克隆 | 第20页 |
| 2.4.2 E. coli DH5α 及E. coli BL21(DE3)感受态细胞制备 | 第20页 |
| 2.4.3 基因重组菌的构建 | 第20-21页 |
| 2.4.4 质粒的抽提制备 | 第21页 |
| 2.4.5 琼脂糖凝胶电泳检测 | 第21页 |
| 2.4.6 重组菌的诱导表达 | 第21页 |
| 2.4.7 SDS-PAGE凝胶电泳检测 | 第21页 |
| 2.4.8 共表达体系酶活测定 | 第21页 |
| 2.4.9 共表达体系的酶学性质研究 | 第21-23页 |
| 3 结果与讨论 | 第23-39页 |
| 3.1 重组来苏糖异构酶的基因序列及氨基酸序列分析 | 第23-25页 |
| 3.2 重组来苏糖异构酶的表达与分离纯化 | 第25-26页 |
| 3.3 重组来苏糖异构酶的酶活测定 | 第26页 |
| 3.4 重组来苏糖异构酶的酶学性质 | 第26-32页 |
| 3.4.1 反应温度对酶活和酶稳定性的影响 | 第26-28页 |
| 3.4.2 pH对酶活的影响 | 第28-29页 |
| 3.4.3 金属离子对酶活的影响 | 第29-30页 |
| 3.4.4 重组来苏糖异构酶的底物特异性与动力学参数 | 第30页 |
| 3.4.5 D-甘露糖的生产 | 第30-32页 |
| 3.4.6 D-来苏糖异构酶的酶学性质比较 | 第32页 |
| 3.5 重组共表达体系的构建与表达 | 第32-34页 |
| 3.6 重组共表达体系的酶学性质 | 第34-39页 |
| 3.6.1 反应温度对酶活和酶稳定性的影响 | 第34-35页 |
| 3.6.2 pH对酶活的影响 | 第35-36页 |
| 3.6.3 金属离子对酶活的影响 | 第36页 |
| 3.6.4 D-甘露糖的生产 | 第36-39页 |
| 主要结论与展望 | 第39-41页 |
| 主要结论 | 第39-40页 |
| 展望 | 第40-41页 |
| 致谢 | 第41-43页 |
| 参考文献 | 第43-48页 |
| 附录作者在攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第48页 |
