| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 英文缩略词表 | 第15-16页 |
| 文献综述 | 第16-32页 |
| 1 猪卵母细胞体外成熟的研究进展 | 第16-26页 |
| 1.1 卵母细胞的发育 | 第17-19页 |
| 1.1.1 卵母细胞核成熟 | 第18-19页 |
| 1.1.2 卵母细胞质成熟 | 第19页 |
| 1.2 影响卵母细胞体外成熟的因素 | 第19-26页 |
| 1.2.1 卵母细胞来源 | 第20-21页 |
| 1.2.2 卵泡大小 | 第21-22页 |
| 1.2.3 卵丘颗粒细胞 | 第22-23页 |
| 1.2.3 培养体系 | 第23页 |
| 1.2.4 氧化应激 | 第23-24页 |
| 1.2.5 组蛋白乙酰化 | 第24-25页 |
| 1.2.6 自噬 | 第25-26页 |
| 2 褪黑素对卵母细胞体外成熟及胚胎发育的研究进展 | 第26-31页 |
| 2.1 褪黑素的合成与代谢 | 第26-27页 |
| 2.2 褪黑素的生物学功能 | 第27-29页 |
| 2.2.1 清除自由基和抗氧化应激 | 第28页 |
| 2.2.2 生理节律性和糖代谢 | 第28页 |
| 2.2.3 抗炎、抗癌和提高免疫力 | 第28-29页 |
| 2.3 褪黑素对卵母细胞体外成熟及胚胎发育的影响 | 第29-31页 |
| 2.3.1 褪黑素对卵母细胞体外成熟的影响 | 第29-30页 |
| 2.3.2 褪黑素对植入前胚胎体外发育的影响 | 第30-31页 |
| 3 结语 | 第31-32页 |
| 研究论文 | 第32-64页 |
| 引言 | 第32-33页 |
| 1 材料与方法 | 第33-47页 |
| 1.1 试验材料 | 第33-38页 |
| 1.1.1 试验材料 | 第33页 |
| 1.1.2 主要仪器 | 第33页 |
| 1.1.3 试验耗材 | 第33-34页 |
| 1.1.4 所需试剂及溶液配制 | 第34-37页 |
| 1.1.5 引物 | 第37-38页 |
| 1.2 试验方法 | 第38-44页 |
| 1.2.1 猪卵母细胞体外成熟(PIVM) | 第38-39页 |
| 1.2.2 MII期卵母细胞准备 | 第39页 |
| 1.2.3 猪卵母细胞孤雌激活(PA) | 第39-40页 |
| 1.2.4 极体排出数计数染色 | 第40页 |
| 1.2.5 囊胚总细胞数计数染色 | 第40-41页 |
| 1.2.6 组蛋白乙酰化间接免疫荧光染色 | 第41页 |
| 1.2.7 总RNA提取 | 第41-43页 |
| 1.2.7.1 溶液配制 | 第41-42页 |
| 1.2.7.2 操作前准备工作 | 第42页 |
| 1.2.7.3 操作步骤 | 第42-43页 |
| 1.2.8 反转录 | 第43页 |
| 1.2.9 实时荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第43-44页 |
| 1.2.10 猪卵母细胞卵丘扩散指数分析 | 第44页 |
| 1.2.11 荧光信号强度半定量分析 | 第44页 |
| 1.3 试验设计 | 第44-46页 |
| 1.3.1 非限定性成熟培养基(PIVM)中添加不同浓度褪黑素对猪卵母细胞体外成熟及孤雌激活后胚胎发育的影响 | 第44-45页 |
| 1.3.2 不同时间段添加 1nM褪黑素对猪卵母细胞体外成熟及孤雌激活后胚胎发育的影响 | 第45页 |
| 1.3.3 褪黑素(1nM)对不同直径卵泡来源的猪卵母细胞体外成熟及孤雌激活后胚胎发育的影响 | 第45页 |
| 1.3.4 褪黑素(1nM)对包裹层次≤1 及人工裸卵的猪卵母细胞体外成熟和孤雌激活后胚胎发育的影响 | 第45页 |
| 1.3.5 完全培养基(PZM-3)中添加不同浓度褪黑素对猪孤雌胚体外发育的影响 | 第45页 |
| 1.3.6 不同时间段添加 10nM褪黑素对猪孤雌胚体外发育的影响 | 第45页 |
| 1.3.7 褪黑素 (1nM) 添加到PIVM中与褪黑素 (10nM) 添加到PZM-3 中联合处理对猪卵母细胞体外成熟和孤雌胚体外发育的影响 | 第45-46页 |
| 1.3.8 褪黑素对体外成熟猪卵母细胞H3K27ac/H4K16ac位点的影响 | 第46页 |
| 1.3.9 褪黑素对猪卵丘颗粒细胞、卵母细胞和孤雌囊胚相关基因表达的影响 | 第46页 |
| 1.4 统计分析 | 第46-47页 |
| 2 结果 | 第47-59页 |
| 2.1 在猪卵母细胞体外培养阶段添加不同浓度褪黑素对体外成熟及孤雌激活后胚胎发育的影响 | 第47-48页 |
| 2.2 褪黑素对猪卵丘颗粒细胞扩散的影响 | 第48页 |
| 2.3 在猪卵母细胞体外培养不同时间段添加 1nM褪黑素对体外成熟及孤雌激活后胚胎发育的影响 | 第48-49页 |
| 2.4 不同直径卵泡来源的猪卵母细胞培养阶段添加褪黑素(1nM)对体外成熟和孤雌激活后胚胎发育的影响 | 第49-50页 |
| 2.5 包裹层次≤1 及人工裸卵的猪卵母细胞培养阶段添加褪黑素(1nM)对体外成熟和孤雌激活后胚胎发育的影响 | 第50-51页 |
| 2.6 在猪孤雌胚培养阶段添加不同浓度褪黑素对猪孤雌胚体外发育的影响 | 第51-52页 |
| 2.7 在猪孤雌胚胎不同培养时间段添加 10nM褪黑素对孤雌胚体外发育的影响 | 第52页 |
| 2.8 褪黑素(1nM)添加到PIVM中与褪黑素(10nM)添加到PZM-3 中联合处理对猪早期孤雌胚胎体外发育的影响 | 第52-53页 |
| 2.9 褪黑素(1nM)对体外成熟猪卵母细胞H3K27ac/H4K16ac位点的影响 | 第53-55页 |
| 2.10 褪黑素对猪体外成熟的卵丘颗粒细胞及卵母细胞相关基因mRNA水平表达的影响 | 第55-56页 |
| 2.11 褪黑素添加到PIVM或PZM-3 的联合处理对猪孤雌囊胚相关基因mRNA水平表达的影响 | 第56-59页 |
| 3 讨论 | 第59-63页 |
| 4 结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-77页 |
| 致谢 | 第77-79页 |
| 作者简介 | 第79页 |
