摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
1. 前言 | 第10-18页 |
·水稻化感作用的研究进展 | 第10-13页 |
·植物化感作用 | 第10-11页 |
·水稻化感物质及其分类 | 第11-12页 |
·水稻化感物质的作用机制 | 第12-13页 |
·水稻化感物质的基因调控 | 第13页 |
·PAL(苯丙氨酸解氨酶)基因家族的研究现状 | 第13-16页 |
·苯丙烷代谢途径 | 第13-14页 |
·苯丙氨酸解氨酶PAL 基因家族 | 第14-15页 |
·PAL 与水稻化感作用的潜在联系 | 第15-16页 |
·RNAi 技术及在水稻功能基因方面研究的应用 | 第16-17页 |
·RNA 干扰 | 第16页 |
·RNA 干扰在水稻功能基因方面的研究进展 | 第16-17页 |
·实时荧光量PCR 技术 | 第17页 |
·本研究的目的和意义 | 第17-18页 |
2 材料与方法 | 第18-25页 |
·材料 | 第18-19页 |
·供试材料 | 第18页 |
·相关引物 | 第18页 |
·RNAi 载体及菌株 | 第18-19页 |
·实验试剂 | 第19页 |
·实验方法 | 第19-25页 |
·供式材料的种植 | 第19页 |
·水稻总RNA 的提取及单链cDNA 的合成 | 第19-20页 |
·水稻RNAi 载体的构建 | 第20页 |
·PAL21-RNAi 转基因水稻的获得 | 第20页 |
·阳性PTCK303+PAL-S-A 转基因干扰植株的筛选 | 第20-21页 |
·稗草胁迫处理转基因水稻与野生型水稻P1312777 | 第21页 |
·水稻酚酸关键酶基因的实时荧光定量PCR(FQ-PCR)分析 | 第21-23页 |
·水培液总酚含量测定Folin-Ciocalteu 比色法 | 第23页 |
·HPLC 测定酚酸含量 | 第23-24页 |
·生物测试法(测试水稻化感潜力的变化) | 第24-25页 |
3 结果与分析 | 第25-38页 |
·PAL-21 基因片段的克隆及其PAL-21-RNAi 载体的构建 | 第25-26页 |
·PAL-21-RNAi 的菌液PCR 及质粒酶切验证 | 第26页 |
·PAL-21 基因沉默转基因植株的获得 | 第26-27页 |
·转基因水稻GUS 基因、HPT 基因的PCR 验证检测 | 第27页 |
·转基因水稻与野生型水稻PAL-21 基因表达分析 | 第27-28页 |
·转基因水稻与野生型水稻PAL 酶活的测定 | 第28页 |
·qRT-PCR 分析PAL 基因家族各基因成员的表达 | 第28-29页 |
·稗草胁迫下转基因水稻苯丙氨酸代谢关键基因的表达分析 | 第29-30页 |
·稗草胁迫下转基因水稻相对野生型的苯丙氨酸代谢关键基因的表达分析 | 第30-31页 |
·转基因水稻及野生型根系总酚含量测定结果 | 第31-32页 |
·HPLC 分析转基因水稻及野生型酚类物质的含量 | 第32-36页 |
·转基因水稻及野生型根系分泌物的生物测试 | 第36-38页 |
4 讨论 | 第38-42页 |
5 问题与展望 | 第42-43页 |
·本研究不足之处 | 第42页 |
·进一步研究的设想 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-50页 |
附录1 主要仪器 | 第50-51页 |
附录2 DH5α 感受态细胞制备及转化 | 第51-52页 |
附录3 EHA105 根癌农杆菌感受态的制备及转化 | 第52-53页 |
附录4 水稻 RNA 提取及单链 cDNA 的合成 | 第53-55页 |
致谢 | 第55页 |